Drosophila Aggression Assay: Eine Methode, um Verhaltensplastizität bei Fliegen zu testen

- Um Aggression in Fliegen zu beurteilen, verwenden Sie eine geschlossene Kampfkammer mit zwei Einstiegspunkten ausgestattet, und eine Trennwand, um Die Themen getrennt vor dem Versuch zu halten. Platzieren Sie eine Nahrungsquelle in der Mitte der Kammer, um Konflikte für die Fliegen zu schaffen. Dann laden Sie zuvor isolierte und markierte Männchen durch die Einstiegspunkte auf beiden Seiten der Arena. Entfernen Sie die Trennlinie und zeichnen Sie die Begegnungen der Fliegen auf, um Aggression zu quantifizieren.

Um die Dominanz zu etablieren, zeigt ein Männchen stereotype offensive Verhaltensweisen, die an Intensität zunehmen, von der Annäherung und Verfolgung des Gegners bis zur Lunge, ein Verhalten, das auf Aggression hindeutet, wo die angreifende Fliege hoch auf ihren Hinterbeinen steigt und auf den Gegner einrastet, um ihn zu packen. Im Gegensatz dazu zeigt der Gegner defensives Verhalten, wie das Weglaufen im Rückzug des Angreifers. So entstehen ein Verlierer und ein Sieger aus dem Kampf, und ein Sieg wird gebildet.

Im Beispielprotokoll werden wir sehen, wie ein Setup, das den Umgang mit Tieren während des Aggressions-Assays eliminiert, verwendet wird, um die Gedächtnisbildung bei Fliegen zu untersuchen, die ihren ersten Kampf verloren haben, den so genannten "Verlierereffekt".

- Beginnen Sie Verhaltensexperimente, indem Sie Kunststoffteiler in jede Kampfkammer einsetzen. Entfernen Sie den Baumwollstecker aus dem Isolationsrohr und positionieren Sie das Rohr unter einem offenen Loch auf der Seite des Geräts. Lassen Sie die Fliege durch negative Geotaxis in die Kampfkammer eindringen. Schließen Sie dann die Schiebewand, nachdem die Fliege die Kammer betreten hat. Wiederholen Sie den Vorgang, um die zweite Fliege in die Kampfkammer auf der anderen Seite des Geräts einzuführen.

Als nächstes legen Sie das Gerät wieder in die beleuchtete Videoaufnahmeposition. Beginnen Sie die Videoaufzeichnung und entfernen Sie den Kunststoffteiler, damit die Fliegen interagieren können. Für "Verlierer"-Effektexperimente nehmen Sie die ersten Kämpfe für 20 Minuten auf, um die Bildung starker Dominanzbeziehungen zu gewährleisten. Nach 20 Minuten ersetzen Sie den Kunststoffteiler sanft in die Kampfkammern, um die Fliegen zu trennen und das Video zu stoppen.

- Um eine starke "Verlierer"-Mentalität zu induzieren, stellen Sie sicher, dass die Fliegen während der ersten Kämpfe eine Dominanzbeziehung aufbauen und aufrechterhalten, und minimieren Sie dann die Störung der Tiere, wenn sie die Trennwände einsetzen, um die Fliegen zu trennen.

- Nach einer 10-minütigen Ruhezeit beginnen Sie mit der Aufnahme und entfernen Sie vorsichtig den Kunststoffteiler. Lassen Sie die Fliegen für weitere 20 Minuten interagieren. Beenden Sie die Aufnahme nach 20 Minuten. Um das Experiment abzuschließen, entfernen Sie die Fliegen aus den Verhaltenskammern durch negative Geotaxis, indem Sie das zuvor beschriebene Verfahren umkehren.