Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Om agressie bij vliegen te beoordelen, gebruikt u een gesloten gevechtskamer uitgerust met twee ingangen en een scheidingswand om proefpersonen gescheiden te houden voor de proef. Plaats een voedselbron in het midden van de kamer om conflicten voor de vliegen te creëren. Laad vervolgens eerder geïsoleerde en gemarkeerde mannetjes door de toegangspunten aan weerszijden van de arena. Verwijder de verdeler en noteer de ontmoetingen van de vliegen om agressie te kwantificeren.
Om dominantie vast te stellen, vertoont een man stereotiep offensief gedrag dat in intensiteit toeneemt, van het naderen en achtervolgen van de tegenstander tot longing, een gedrag dat wijst op agressie, waarbij de aanvallende vlieg hoog op zijn achterpoten optilt en op de tegenstander klikt in een poging om hem te grijpen. De tegenstander vertoont daarentegen defensief gedrag, zoals weglopen in de terugtocht van de aanvaller. Zo komen een verliezer en een winnaar uit het gevecht tevoorschijn en wordt bij elke tegenstander een herinnering aan nederlaag of overwinning gevormd.
In het voorbeeldprotocol zullen we zien hoe een opstelling die de behandeling van dieren tijdens de agressietest elimineert, wordt gebruikt om geheugenvorming te bestuderen bij vliegen die hun eerste gevecht hebben verloren, het "loser"-effect genoemd.
- Begin gedragsexperimenten door plastic verdelers in elke vechtkamer te plaatsen. Verwijder de katoenen plug uit de isolatiebuis en plaats de buis onder een open gat aan de zijkant van het apparaat. Laat de vlieg de vechtkamer binnenkomen door negatieve geotaxis. Sluit vervolgens de schuifwand nadat de vlieg de kamer is binnengekomen. Herhaal de procedure om de tweede vlieg in de vechtkamer aan de andere kant van het apparaat te introduceren.
Plaats vervolgens het apparaat terug in de verlichte video-opnamepositie. Begin met de video-opname en verwijder de plastic scheidingswand om de vliegen te laten interageren. Voor experimenten met het "loser"-effect neemt u de eerste gevechten gedurende 20 minuten op om de vorming van sterke dominantierelaties te garanderen. Vervang na 20 minuten de plastic scheidingswand voorzichtig in de vechtkamers om de vliegen te scheiden en de video te stoppen.
- Om een sterke "loser"-mentaliteit op te wekken, moet u ervoor zorgen dat de vliegen tijdens de eerste gevechten een dominantierelatie tot stand brengen en behouden, en vervolgens de verstoring van de dieren minimaliseren bij het plaatsen van de verdelers om de vliegen te scheiden.
- Na een rustperiode van 10 minuten begint u met opnemen en verwijdert u voorzichtig de plastic verdeler. Laat de vliegen nog 20 minuten interageren. Stop met opnemen na 20 minuten. Om het experiment af te sluiten, verwijdert u de vliegen uit de gedragskamers door negatieve geotaxis door de eerder beschreven procedure om te keeren.
