钙成像：一种在活C.电子人中可视化神经活动的方法

-将一种表达 GCaMP 的转基因蠕虫（一种钙感应蛋白）与蠕虫细菌食物一起放置在成像室中。 然后用盖子和实验室膜密封盘子，防止蒸发。 在配备用于宽场癫痫的复合显微镜下查看。 记录蠕虫的时间推移图像，以跟踪其行为，并使用成像软件捕获荧光。

转基因蠕虫在推动特定神经元中 GCaMP表达的促进器的控制下表达 GCaMP 传感器蛋白。当该神经元被激活时，它会激发一种行动潜力，从而去极化等离子膜。 去极化后，等离子膜中打开电压门钙通道。这会导致钙离子大量涌入细胞，导致神经元激发。

兴奋神经元的GCaMP结合了钙离子。当蠕虫用低强度荧光激发光成像时，这会导致GCaMP荧光。在示例协议中，我们将使用钙成像来可视化 AVA 内生菌活性在合成的C.

- 钙成像是在配备用于宽场表观荧光的复合显微镜上进行的。为了限制光线照射，使用晶体管晶体管逻辑信号触发 LED 在摄像机记录帧的同时照亮样品。

运行一个突发电影24小时，图像每个蠕虫每15至30分钟。首先，记录20秒与DIC，然后20秒与GFP荧光，最后，图像的mKate2信号控制表达水平。

对于可视数据检查，使用假彩色地图提高荧光强度小变化的可见性。最后，使用标准程序进行钙数据分析。