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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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칼슘 이미징: 살아있는 C. 예인선에서 신경 활동을 시각화하는 방법

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- GCaMP를 표현하는 1개의 형질전환 벌레 -- 칼슘 감지 단백질 -- 벌레를 위한 세균성 음식과 더불어 화상 실에서. 다음 증발을 방지하기 위하여 뚜껑 실험실 필름으로 접시를 밀봉합니다.

트랜스제닉 웜은 특정 뉴런에서 GCaMP 발현을 구동하는 프로모터의 제어하에 GCaMP 센서 단백질을 발현합니다.

흥분된 뉴런의 GCaMP는 칼슘 이온을 결합합니다. 이것은 벌레가 저강도 형광 흥분빛으로 이미지될 GCaMP를 형광으로 일으킵니다.

- 칼슘 이미징은 광장 에피플루오렌스를 위해 장착된 복합 현미경으로 수행됩니다.

15~30분마다 웜을 이미지화하는 버스트 영화를 24시간 동안 실행합니다.

시각적 데이터 검사의 경우 거짓 색상 맵을 사용하여 형광 강도의 작은 변화의 가시성을 향상시킵니다.

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