Encyclopedia of Experiments: Biology
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- GCaMP를 표현하는 1개의 형질전환 벌레 -- 칼슘 감지 단백질 -- 벌레를 위한 세균성 음식과 더불어 화상 실에서. 다음 증발을 방지하기 위하여 뚜껑 및 실험실 필름으로 접시를 밀봉합니다.
트랜스제닉 웜은 특정 뉴런에서 GCaMP 발현을 구동하는 프로모터의 제어하에 GCaMP 센서 단백질을 발현합니다.
흥분된 뉴런의 GCaMP는 칼슘 이온을 결합합니다. 이것은 벌레가 저강도 형광 흥분빛으로 이미지될 때 GCaMP를 형광으로 일으킵니다.
- 칼슘 이미징은 광장 에피플루오렌스를 위해 장착된 복합 현미경으로 수행됩니다.
15~30분마다 각 웜을 이미지화하는 버스트 영화를 24시간 동안 실행합니다.
시각적 데이터 검사의 경우 거짓 색상 맵을 사용하여 형광 강도의 작은 변화의 가시성을 향상시킵니다.