Neuronal नेटवर्क के विकास के स्वतःस्फूर्त गतिविधि हूँ कैल्शियम के प्रति संवेदनशील सूचक रंगों के एस्टर रूपों का उपयोग करके मापा जा सकता है है. Intracellular कैल्शियम में परिवर्तन, neuronal सक्रियण संकेत, सूचक प्रतिदीप्ति में क्षणिक परिवर्तन के रूप में एक या दो photon इमेजिंग के साथ पाया जाता है. इस प्रोटोकॉल developmentally पर निर्भर neuronal नेटवर्क की एक श्रृंखला के लिए अनुकूलित किया जा सकता है है<em> इन विट्रो में</em>.