Journal
/
Biology
/
En raskere, High Resolution, mtpa-GFP-baserte Mitokondrie Fusion Assay Innhente Kinetic Data om flere celler i parallell Bruke konfokalmikroskopi
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
A Faster, High Resolution, mtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion Assay Acquiring Kinetic Data of Multiple Cells in Parallel Using Confocal Microscopy

En raskere, High Resolution, mtpa-GFP-baserte Mitokondrie Fusion Assay Innhente Kinetic Data om flere celler i parallell Bruke konfokalmikroskopi

DOI:
10.3791/3991-v

•

10:45 min

•

July 20, 2012

•

, , , ,
1Department of Neuroscience, Center for Neuroscience Research,Tufts School of Medicine, 2Department of Internal Medicine, Geriatrics & Gerontology,Wake Forest Baptist Medical Center, 3Department of Medicine,Boston University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:33Imaging Plate Preparation
  • 02:29Imaging Parameters for the Zeiss LSM 710 Confocal Microscope
  • 03:37Optimizing the Imaging Parameters
  • 04:49Mitochondrial-fusion Assay Set-up
  • 07:36Analyzing the PA-GFP Signal Intensity
  • 08:17Results: Representative Mitochondrial-fusion Assays
  • 09:49Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Mitokondrie fusjon ble målt ved å spore ekvilibrering av photoconverted matrix-målrettet GFP over mitokondrie nettverket over tid. Så langt, kunne bare en celle må utsettes for en times lang kinetisk analyse av gangen. Vi presenterer en metode som samtidig måler flere celler, og dermed påskynde datainnsamlingen.

Tags

FasterHigh ResolutionMtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion AssayKinetic DataMultiple CellsParallelConfocal MicroscopyFusion ActivityPhoto-conversionPhotoactivatable GFP (mtPAGFP)EquilibrationLiving CellsTime Lapse ApproachScale UpAutomateLow Concentration Of TMRESignal IntensityPAGFP Expressing CellsSubcellular QuantificationCytoarchitectural Environment

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Fluorescens-basert Måling av Store-opererte Calcium Entry i levende celler: fra Helstøpt Cancer Cell til Skeletal Muscle Fiber

Analyse av snare-mediert membran fusion Bruke en Enzymatisk Cell Fusion Assay

Samtidig måling av pH i endocytic og cytosoliske avdelinger i levende celler ved hjelp konfokalmikroskopi

In vivo Klonal Sporing av Hematopoetiske Stem og stamceller Preget av fem Fluorescent Proteiner bruker Confocal og multiphoton Mikros

Høy oppløsning Time-lapse Imaging og automatisk analyse av mikrotubulidynamikk i levende menneske navleveneendotel Cells

Høy oppløsning respirometri å vurdere mitokondrienes funksjon i permeabilized og intakte celler

Samtidig Måling av mitokondrie Kalsium og Mitokondriell membranpotensialet i levende celler med fluorescerende mikros

Kombinere mitotisk celle synkronisering og høy oppløsning AC Confocal mikroskopi å studere rollen til multifunksjonelle celle syklus proteiner under mitose

Høy oppløsning Respirometry å måle mitokondrie funksjon av intakt Beta-cellene i nærvær av naturlige forbindelser

Parallell høy gjennomstrømning enkelt molekyl kinetisk analyse for stedsspesifikk DNA cleavage

Read Article