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Les analyses couplées pour la surveillance protéines repliement<em> Saccharomyces cerevisiae</em
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Biology
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Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae
DOI:

13:52 min

July 09, 2013

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
  • 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
  • 03:48Induction of FFL-GFP
  • 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
  • 07:35Fluorescence Microscopy
  • 08:55Single Cell Microscopy
  • 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
  • 13:36Conclusion

Summary

Automatic Translation

Cet article décrit l'utilisation d'une protéine de fusion GFP-luciférase Firefly pour enquêter<em> In vivo</em> Le repliement des protéines à<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. L'utilisation de ce réactif, le repliement d'un modèle de protéine dénaturée par la chaleur peut être surveillé simultanément par microscopie à fluorescence, et un dosage enzymatique pour sonder les rôles des éléments du réseau de proteostasis dans le contrôle de la qualité des protéines.

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