A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
- 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
- 03:48Induction of FFL-GFP
- 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
- 07:35Fluorescence Microscopy
- 08:55Single Cell Microscopy
- 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
- 13:36Conclusion
Bu makalede, araştırmak için bir ateş böceği lusiferaz-GFP füzyon proteini tanımının kullanımını tarif eder<em> In vivo</emIçinde> protein katlanması<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Bir model ısıyla denatüre edilmiş proteinin yeniden katlanması, bu tepkin madde kullanılarak floresan mikroskop ve protein kalite kontrol proteostasis ağ bileşenlerinin rollerini araştırmak için bir enzimatik deneyi ile aynı anda kontrol edilebilir.
