分子克隆是将重组DNA插入到载体中的一套方法，载体作为DNA分子的携带者，将在宿主体内复制重组DNA片段。 而DNA片段，可能是从原核或真核生物中分离得到一个基因。分离得到目的片段或称插入片段后，将其与载体用限制性酶切割并进行纯化。纯化后的片段通过一种叫做“连接”的技术连在一起。催化该连接反应的酶被称为连接酶。

本短片将按顺序介绍构成整个分子克隆操作过程的主要方法。并将讨论分子克隆技术的重要方面，例如分子克隆方案的必要性和如何追踪转化的菌落。也将提及其检测步骤，如用限制性酶切和测序来判断纯化的质粒中是否含有目的片段。