Das molekulare Klonieren besteht aus verschiedenen Methoden, die benutzt werden um rekombinante DNA in einen Vektor – also ein Träger-DNA Molekül, das die rekombinante DNA in einem Wirtsorganismus vervielfältigt – einzufügen. DNA Fragmente, wie zum Beispiel Gene, können von prokaryotischen oder eukaryotischen Quellen isoliert worden sein. Nachdem das gesuchte Fragment isoliert worden ist, müssen sowohl der Vektor als auch das Fragment durch Restriktionsenzyme geschnitten und danach aufgereinigt werden. Die aufgereinigten Stücke werden dann durch eine Methode, die Ligationsreaktion genannt wird, zusammengeklebt. Das Enzym, das die Ligation katalysiert, wird als Ligase bezeichnet.

Dieses Video erklärt die verschiedenen Methoden, die nacheinander kombiniert werden, und damit das gesamte Klonierungsverfahren darstellen. Wir behandeln die wichtigen Aspekte der molekularen Klonierung, wie zum Beispiel die Notwendigkeit einer Klonierungsstrategie und wie man den Überblick über die transformierten Bakterien behält. Außerdem erwähnen wir die Validierungsschritte, wie zum Beispiel das Prüfen der Anwesenheit des DNA Fragments in dem auf gereinigten Plasmid durch Restriktionsverdaue und Sequenzieren.