שיבוט מולקולרי הוא מערכת של שיטות, המשמשות להחדרת דנ”א רקומביננטי לווקטור – נשא של מולקולות דנ”א שישכפלו שברי דנ”א רקומביננטיים באורגניזמים מארחים. שבר הדנ”א, שעשוי להיות גן, יכול להיות מבודד מדגם פרוקריוטי או אאוקריוטי. לאחר בידוד של שבר העניין, או להוסיף, הן הווקטור ואת ההוספה חייב להיות חתוך עם אנזימי הגבלה מטוהר. החלקים המטוהרים מחוברים יחד למרות טכניקה הנקראת קשירה. האנזים שמזרז את תגובת קשירה ידוע בשם ליגאז.
וידאו זה מסביר את השיטות העיקריות המשולבות, בד בבד, כדי לכלול את הליך השיבוט המולקולרי הכולל. היבטים קריטיים של שיבוט מולקולרי נדונים, כגון הצורך באסטרטגיית שיבוט מולקולרי וכיצד לעקוב אחר מושבות חיידקים שעברו טרנספורמציה. כמו כן מוזכרים שלבי אימות, כגון בדיקת plasmid מטוהר לנוכחות של הוספה עם מגבלות ורצף.
Procedure
שיבוט מולקולרי הוא קבוצה של טכניקות המשמשות להחדרת DNA רקומביננטי ממקור פרוקריוטי או אאוקריוטי לרכב משכפל כגון פלסמידים או וקטורים ויראליים. שיבוט מתייחס ליצירת עותקים רבים של שבר DNA של עניין, כגון גן. בסרטון זה תלמד על השלבים השונים של שיבוט מולקולרי, כיצד להגדיר את ההליך, ויישומים שונים של…