Journal
/
Genetics
/
Reação em Cadeia da Polimerase Digital de Gota Única para Detecção Abrangente e Simultânea de Mutações em Regiões de Hotspot
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Single Droplet Digital Polymerase Chain Reaction for Comprehensive and Simultaneous Detection of Mutations in Hotspot Regions

Reação em Cadeia da Polimerase Digital de Gota Única para Detecção Abrangente e Simultânea de Mutações em Regiões de Hotspot

DOI:
10.3791/58051-v

•

08:23 min

•

September 25, 2018

•

, , , , , ,
1Circulating Tumor Biomarkers Laboratory, SiRIC, Translational Research Department,Institut Curie, PSL Research University, 2CNRS UMR144,Institut Curie, PSL Research University, 3Department of Medical Oncology,Institut Curie, PSL Research University, 4University Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines, 5University Paris Descartes, 6Inserm U830,Institut Curie, PSL Research University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:48Blood Collection and Plasma Storage
  • 02:04cfDNA Extraction
  • 04:45ddPCR Mix Preparation
  • 05:46Droplet Generation
  • 06:25PCR Amplification
  • 07:06Results: KRAS and EGFR Drop-off ddPCR Assays
  • 07:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Aqui, apresentamos um protocolo para quantificar com precisão a múltiplas alterações genéticas de uma região de destino em uma única reação usando ddPCR de entrega e um único par de testes de hidrólise.

Tags

Single Droplet Digital PCRCirculating Tumor DNAMutation DetectionHotspot RegionsCancer DiagnosisAbsolute QuantificationMolecular AnalysisQPCR AlternativePlasma ExtractionProteinase KLysis BufferSilica MembraneVacuum Pump

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Melhoria Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism Genotipagem de Pufferfish Tóxico por Cromatografia Líquida / Espectrometria de Massa

A detecção visual Colorimétrico de polimorfismos multi-nucleótidos em uma plataforma de manipulação pneumático gota

De tipo selvagem Bloqueio de PCR combinada com sequenciação directa como um método altamente sensível para a detecção de Baixa Frequência mutações somáticas

Detecção de Copy Number Alterações Usando Sequencing única célula

Varredura Retroviral: Mapeamento de sites de integração MLV para definir regiões reguladoras específicas de células

Detecção semi-quantitativa de atividade RNA-dependente do RNA polimerase humana Telomerase Transcriptase reversa proteína

Mediada por CRISPR reorganização da estrutura de Loop de cromatina

Análise das células do epitélio do pigmento da retina humana, diferenciação e manutenção: um modelo de doença-em-um-prato de mutações BEST1

Identificação de eventos de recombinação homóloga em células-tronco embrionárias de camundongo usando Southern Blotting e reação em cadeia da polimerase

Avaliação de uma reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa universal aninhada para a detecção de lissavírus

Read Article