/
/
Proteinekspression og -oprensning af menneskelige Lipid-følsomme kation kanal TRPC3 for Strukturbestemmelse af enkelt-partikel kryo-elektronmikroskopi
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:34Infection of HEK293 Mammalian Cells with P2 Baculovirus for Large-scale Protein Expression
- 02:42Purification of hTRPC3 Protein from the Frozen Cell Pellet
- 05:26Results: Structural Determination of hTRPC3
- 07:36Conclusion
Denne protokol beskriver teknikker, der anvendes til at bestemme ion-kanal strukturer af kryo-elektronmikroskopi, herunder en baculovirus, der anvendes til effektivt express gener i pattedyrceller med minimalt besvær og toksicitet, protein udvinding, rensning, og kvalitet kontrol, gitter forberedelse af prøver og screening, samt indsamling af data og forarbejdning.
