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Expression et Purification de l’homme sensible lipides canal de Cation TRPC3 pour la détermination de structure par particule Cryo microscopie électronique
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Expression and Purification of the Human Lipid-sensitive Cation Channel TRPC3 for Structural Determination by Single-particle Cryo-electron Microscopy
DOI:

08:27 min

January 07, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Infection of HEK293 Mammalian Cells with P2 Baculovirus for Large-scale Protein Expression
  • 02:42Purification of hTRPC3 Protein from the Frozen Cell Pellet
  • 05:26Results: Structural Determination of hTRPC3
  • 07:36Conclusion

Summary

Automatic Translation

Ce protocole décrit les techniques utilisées pour déterminer les structures de canal d’ion par cryo microscopie électronique, y compris un système baculovirus utilisé pour exprimer efficacement gènes dans des cellules de mammifères avec le minimum d’effort et de toxicité, d’extraction de protéine, de purification, contrôle qualité, préparation des échantillons grille et dépistage, ainsi que collecte de données et traitement.

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