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Génération de Clones de cellules de Cancer de visualiser contenant répétition télomérique RNA TERRA exprimée à partir d’un seul télomères dans les cellules vivantes
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JoVE Journal Genetics
Generation of Cancer Cell Clones to Visualize Telomeric Repeat-containing RNA TERRA Expressed from a Single Telomere in Living Cells
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Génération de Clones de cellules de Cancer de visualiser contenant répétition télomérique RNA TERRA exprimée à partir d’un seul télomères dans les cellules vivantes

DOI:
10.3791/58790-v

•

09:13 min

•

January 17, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Cell Biology and Molecular Genetics, Department of Cellular, Computational and Integrative Biology – CIBIO,University of Trento, 2Department of Life Sciences,University of Trieste

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Selection of Neomycin Resistant Clones
  • 03:41Screening of Neomycin Resistant Clones
  • 05:34Elimination of the Neomycin Resistance Gene from the MS2 Cassette Integrated at Subtelomere 15q
  • 06:06Visualization of TERRA-MS2 Transcripts in Living Cells
  • 06:49Results: Cancer Cell Clones with MS2 Sequence Tag Created and Imaged
  • 08:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Nous présentons ici un protocole visant à générer des clones de cellules de cancer contenant une balise de séquence MS2 à un subtélomère unique. Cette approche, en s’appuyant sur le système de MS2-GFP, permet la visualisation des transcriptions endogènes de télomérique répétition contenant RNA (TERRA) exprimée à partir d’un seul télomères dans les cellules vivantes.

Tags

Cancer Cell ClonesTelomeric Repeat-containing RNA (TERRA)Yeast Telomeric Noncoding RNATelomereCell VisualizationSingle TelomereCell CultureCRISPR-Cas9Cell CloningCell FreezingFluorescence Microscopy

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