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Medições de lipossoma único para o estudo das enzimas de membrana de bombeamento de prótons usando microscopia fluorescente e eletroquímica
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Chapters
- 00:04Title
- 00:28Preparation of a Lipid/UQ-10/FDLL Mix
- 01:26Reconstitution of Cytochrome bo3
- 05:06Fabrication of Semi-Transparent Gold Electrodes and Modification of the Gold Surface with Self-Assembled Monolayer (SAM)
- 06:07Electrochemical Testing of Proteoliposomes Activity
- 07:46Detection of Enzymatic Proton Pumping by Fluorescence Microscopy
- 09:44Results: Liposome Identification and pH Change
- 11:35Conclusion
Aqui, apresentamos um protocolo para estudar o mecanismo molecular de translocação de prótons através das membranas lipídicas de lipossomas único, usando citocromo bo3 como exemplo. Combinando a eletroquímica e microscopia de fluorescência, mudanças de pH no lúmen do única vesículas, contendo uma única ou várias enzimas, podem ser detectados e analisados individualmente.
