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Mesures de Liposome unique pour l’étude des Enzymes membranaires Proton-pompage, à l’aide de l’électrochimie et microscopie fluorescente
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Single Liposome Measurements for the Study of Proton-Pumping Membrane Enzymes Using Electrochemistry and Fluorescent Microscopy
DOI:

12:15 min

February 21, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:28Preparation of a Lipid/UQ-10/FDLL Mix
  • 01:26Reconstitution of Cytochrome bo3
  • 05:06Fabrication of Semi-Transparent Gold Electrodes and Modification of the Gold Surface with Self-Assembled Monolayer (SAM)
  • 06:07Electrochemical Testing of Proteoliposomes Activity
  • 07:46Detection of Enzymatic Proton Pumping by Fluorescence Microscopy
  • 09:44Results: Liposome Identification and pH Change
  • 11:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous présentons ici un protocole afin d’étudier le mécanisme moléculaire de la translocation des protons à travers les membranes lipidiques des liposomes unique, à l’aide du cytochrome bo3 à titre d’exemple. Combinant l’électrochimie et la microscopie de fluorescence, les variations de pH dans la lumière des vésicules unique, contenant un seul ou plusieurs enzymes, peuvent être détectés et analysés individuellement.

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