Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Модель Murine вируса денге-индуцированного Острый вирусный энцефалит-подобный заболевание
Chapters
Summary April 28th, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Здесь мы представляем протокол для создания иммунокомпетентной Модели МЦР (Институт онкологических исследований) моринической модели инфекции центральной нервной системы для отображения развития невропатии. Мониторинг острых вирусных энцефалитических расстройств с одинаковыми показателями заболеваний может быть выполнен для показа вирусной нейропатии, вызванной вирусом денге in vivo.
Transcript
Этот протокол болезни модели вы видите инфекции вируса денге в головном мозге стать in vivo платформы для скрининга вирусных и принимающих векторов, связанных с нейропатогенезом. В отличие от предыдущих моделей, наши модели используют инструменты инфекции с низким вирусным titer, чтобы заразить иммунокомпетентного Института исследований рака сосание мышей для энцефалитической индукции деторождения болезни. Демонстрацией процедуры будет Тьинг-Цзин Шен, кандидат наук из моей лаборатории.
Перед началом инфекционной процедуры разбавляют неприспособленный вирус денге двумя бульонами, до одного раза от 10 до пятого бляшка, образуя единицы на 40 микролитров средней концентрации RPMI 1640. Затем загрузите один 0,3 миллилитровый шприц, оснащенный иглой 30 калибра с 10 микролитров разбавленного вируса. И один 0,3 миллилитровый шприц, оснащенный иглой 30 калибра, с 30 микролитров вируса на животное.
Для межцеребальной доставки вируса, нажмите оракул между большим и указательным пальцами, чтобы мягко ограничить семь дней старый сосание Институт исследований рака мыши в подверженном положении и ввести 10 микролитер объем разбавленного вируса в области лямбды, на пересечении sagittal и овсяного шва. После межцеребальной инъекции используйте большой и указательный пальцы, чтобы держать мышь в положении на спине, и осторожно интраперитонически, ввиснуть 30 микролитра объем разбавленного вируса, в живот мурина. Для оценки прогрессирования заболевания, назначить балл от нуля до пяти к каждому привитой мыши ежедневно, в соответствии с классом острого вирусного энцефалита, как болезни, и участок оценки за каждый день, как кривая основе фигуры, используя среднее плюс и минус стандартное отклонение ежедневных тестов в каждой группе.
По сравнению с изменениями массы тела измеряется в макет, средний только привитых мышей, вирус денге привитых животных демонстрируют снижение массы тела в каждый момент времени во время судебного разбирательства. Кроме того, вирус денге инфицированных животных демонстрируют значительное увеличение горбуна осанки, лимбические припадки, лимбической слабости, паралича и смерти по сравнению с симптомами отображается макет привитых животных. Действительно, инфицированные денге мыши демонстрируют зависимое от времени снижение выживаемости, которое не наблюдается у инсценированных привитых животных, что подтверждает создание инфекционной модели вируса денге в центральной нервной системе, которая демонстрирует прогрессирование острых вирусных заболеваний, похожих на энцефалит у мышей.
Прокол неправильного сайта может привести к блокировке иглы счетом и переполнению раствора вируса за пределами головы, что приводит к неудачной инъекции и неудачной инфекции. После процедуры, образцы мозга могут быть собраны для патологического повреждения, инфильтрации иммунных клеток, и вирусный анализ репликации гематоксилин и эозин окрашивания потока цитометрии, и образование бляшек анализ, соответственно. Наша иммунокомпетентная модель мурина обеспечивает платформу для изучения патогенных механизмов инфицирования вирусом денге, для разработки вакцин против вируса денге или препаратов против вируса денге.
Вирус денге является патогеном уровня биобезопасности 2, и, как таковой, все эксперименты с этим вирусом должны быть завершены в квалифицированной лаборатории биобезопасности животных уровня 2.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
