Journal
/
Genetics
/
Lentiviral vektor Platform for effektiv levering af Epigenome-redigeringsværktøjer i menneskelige induceret pluripotente stamceller-afledt sygdomsmodeller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Lentiviral vektor Platform for effektiv levering af Epigenome-redigeringsværktøjer i menneskelige induceret pluripotente stamceller-afledt sygdomsmodeller

DOI:
10.3791/59241-v

•

13:47 min

•

March 29, 2019

•

, , , , , , , ,
1Department of Neurology,Duke University Medical Center, 2Center for Genomic and Computational Biology,Duke University Medical Center, 3Viral Vector Core,Duke University Medical Center, 4Division of Gynecologic Oncology, Department of Obstetrics and Gynecology,Duke University Medical Center

Chapters

  • 00:04Title
  • 02:01Plasmid Design and Construction
  • 03:20HEK-293T Cells Culturing, Plating, and Transfection
  • 05:15Virus Harvesting and Viral Particles Concentrating
  • 08:16Transduction of MD NPCs
  • 09:48Analysis of Methylation Changes
  • 11:04Results: Assessment of the LV-dCas9-DNMT3A-GFP/Puro Vectors Compared to the Naive GFP Counterpart
  • 12:45Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Målrettet DNA epigenome redigering repræsenterer en kraftfuld terapeutisk tilgang. Denne protokol beskriver produktion, oprensning og koncentration af All-in-one lentiviral vektorer husly CRISPR-dCas9-DNMT3A transgen til epigenome-redigering applikationer i menneskelige inducerede pluripotente stamceller (hiPSC)-afledt neuroner.

Tags

Lentiviral VectorEpigenome EditingHuman Induced Pluripotent Stem CellsDisease ModelsCRISPR/CasAlpha-synucleinGene ExpressionGuide RNAMolecular CloningPlasmid ConstructionNeural Progenitor CellsDNA Methyltransferase (DNMT3A)

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Systemisk levering af mikroRNA ved hjælp af rekombinante Adeno-associeret Virus Serotype 9 til behandling af neuromuskulære sygdomme i gnavere

En Array-baserede komparativ genomisk hybridisering Platform for effektiv påvisning af kopi antal variationer i hurtig Neutron-induceret Medicago truncatula mutanter

En protokol til produktion af Integrase-mangelfuld Lentiviral vektorer for CRISPR/Cas9-medieret gen Knockout i dividere celler

Embryo mikroinjektion og Transplantation teknik for Nasonia vitripennis genom Manipulation

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

Lentiviral medieret produktion af Transgene mus: en enkel og meget effektiv metode til direkte undersøgelse af grundlæggerne

En kombinatorisk encellede tilgang til at karakterisere de molekylære og Immunophenotypic heterogenitet af menneskelige stamceller og stamfader populationer

Isolation, karakterisering og mikroRNA-baseret genetisk modificering af menneskelige Dental follikel stamceller

Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9

Lentiviral medieret genhæmning i humant Pseudoø fremstillet i lave fastgørelses plader

Read Article