5,758 Views
•
09:36 min
•
April 26, 2019
DOI:
המספר הקטן של שבבי דם מרוכבים שבוצעו קלינית מחייב מודל אמין, רבייה בעלי חיים על מנת לחקור את הגורמים הבסיסיים של דחיית השתל. רקמות רלוונטיות קלינית כגון עור, שרירים ועצמות נמצאות כולן במודל. בנוסף, האופי הלא פונקציונלי של המודל שלנו מאפשר ניתוח מהיר יותר, פחות זמן איסכמי לדש, ותחלואה נמוכה יותר בהשוואה למודלים אורתוטופיים של VCA.
במקבלי השתלת יד, vasculopathy של כלי תורמים יכול להוביל לסגירה מוחלטת של כלי השיט, ונזק איסכמי ליד המושתלת. מודל זה הוא כלי לחקר התפתחותם של אירועים וסקולופתיים אלה. לפני שתנסה את המודל הכירורגי הזה, המנתח הראשי צריך להכיר ולמיומנות בטכניקות כירורגיות מקרו-וסקולריות.
זהו הליך מסובך וא ארוך. ההדגמה החזותית תסייע למעבדות אחרות להיערך בהתאם, ולהבין את שלבי הניתוח. כדי להתחיל, תחילה לקצור את האיבר האחורי של חולדה תורם על ידי ביצוע חתך בעור בקונסיברטיות המפשעה, חשיפת כלי הירך.
בצע חתך בעור הגחוני, אשר יסייע ניתוח של פדיקל. לאחר פירוק הברך והקרסול, בצעו חתכים בעור הגבי, חותך את הפדיקל כדי לשחרר את השתל, ולהעביר את השתל מיד לשולחן הניתוחי של המטופל, שם האתר הכירורגי של החיה המטופלת מוכן מראש כדי למזער את הזמן האיסכמי של השתל. על החיה המטופלת, לחשוף ול לנתח את כלי הירך כמו קודם, ולאחר מכן anastomose השתל, וריד מקצה לקצה, עורק מקצה לקצה.
מכניסים את השתל לכיס הפנימי ומכווןים אותו במהופך. לבסוף, לתפור את העור. כדי להתחיל את ההליך, לגלח חולדה תורם הרדמה, ולאחר מכן להשתמש קרם depilatory.
להזריק 30 יחידות של הפרין תת עורית באזור scruff. מניחים את בעלי החיים על כרית חימום ומייצרים שדה כירורגי סטרילי על ידי הכנה, קרצוף ותעטפות של האזור הכירורגי, כולל ההיבט הגבי של הרגל. השתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי להפוך חתך עור 3 ס”מ ב concavity המפשעה של החולדה התורם.
השתמש מספריים איריס כדי לשקף באופן מאוחר את כרית השומן inguinal. באמצעות ניתוח קהה עם ספוגית כותנה, לחשוף את כלי הירך הנפוצים, ולאחר מכן למקם וו חוט עם רצועה אלסטית כדי לחזור בו שרירי הבטן. תחת מיקרוסקופ ניתוח עם הגדלה של עד פי 40, השתמש במיקרו-מספריים, מספר שלוש מטליות תכשיטים ישרות, ומספר חמש מדפים בזווית של 45 מעלות כדי לנתח את הפדיקל באופן פרוקסימאלי מהופעת כלי הירך הנפוצים תחת הרצועה המגוחכת, ובדיסוס לקונפלינציה של כלי פופליטי לתוך השתל.
באמצעות מיקרו קליפים ותכשיטנים דו קוטביים מטלטולים, ליגטה ולחלק את ענפי העורקים והווסקים הגדולים כדי לגייס את כלי הירך העיקריים. השתמש במדפים דו קוטביים עדין כדי לצרוב ענפים קטנים. השתמש מספריים איריס לעשות חתך בעור ממרכז העור הקודם לחתוך לאורך הצד הגחוני של hindlimb לאזור הקרסול.
חותכים את שריר gracilis ואת השרירים adductor אחרים מתחתיו בצורה אנכית כדי לחשוף וללגר את כלי genicular proximal המדיאלי, כלי קטן הסתעפות עמוקה, ואת העצב הסיאטי. בשלב זה, על שולחן כירורגי נפרד, המנתח השני צריך להצביע ולהרים את החיה המטופלת כדי להכין את האתר הכירורגי של המטופל בזמן למיקום השתל, ולמזער את הזמן האיסכמי של השתל. בצע חתכים בעור היקפי ברמה של הברך והקרסול, לפרק את הברך והקרסול, ולהסיר שרירים ורקמות מיותרים.
בצע חתך עור אנכי בצד הגבי של hindlimb כדי לשחרר את השתל, המורכב שוקית וטיביה, ועכשיו מחובר רק על ידי pedicle. מניחים מלחציים קטנים באופן פרוקסימילי ככל האפשר על עורק הירך והווריד וחותכים את הפדיקל קרוב ככל האפשר לרצועה המגוחך. השתמש 27-מד שטיפה cannula קהה להזריק מלוחים heparinized לתוך עורק הירך כדי לשטוף את השתל של דם.
עוטפים את השתל המבודד בגאזה ספוגה מלוחים חמים ומעבירים אותו מיד לשולחן עם החיה המטופלת, כאשר האתר הכירורגי כבר מוכן לאנזטומוזיס כלי דם. צנרר את החולדה המטופל, ולהרדים עמוק עם 2.5 עד 3% איזופלורן מאודה, מאוזן עם ליטר אחד לדקה של חמצן. מניחים את החיה על כרית חימום, ולשפשף ולעטף את האתר הכירורגי.
בזמן שהמנתח הראשון עובד על לשחרר את השתל מהחיה התורמת, השתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי לבצע חתך עור באורך 3 ס”מ בקונסטיות המפשעה של החולדה המטופלת שהורדמה. השתמש מספריים איריס כדי לשקף באופן מאוחר את כרית השומן inguinal. לאחר חשיפת כלי הירך הנפוצים באותו אופן כמו עם החיה התורמת, מניחים וו תיל עם רצועה אלסטית כדי לחזור בו שרירי הבטן.
ואז ליגטה ולחלק ענפי מרפי. באמצעות 10-0 ניילון קטע תפרים, כלי תורמים anastomose. לכלי נמען באמצעות טכניקה הווריית מקצה לקצה.
לאחר מכן לבצע anastomosis עורקים באמצעות טכניקה מקצה לקצה. לאחר שחרור הדרגתי של המהדקים, יש לנטר את האתרים ההאנטומוטיים לדימום ולהוסיף תפרים נוספים במידת הצורך. על מנת להבטיח תדלוק שתל יעיל, חזותית להעריך את anastomosis כלי הדם.
לאחר מכן להכניס את השתל לכיס inguinal, ולכוון אותו במהופך, עם מפרק הקרסול מעולה, ואת מפרק הברך נחות. השתמש תפרים תחוב כדי לאבטח את השתל לשרירים סמוכים. לבסוף, סגרו את העור באמצעות תפרים אופקיים ספוגים בעור 4-0, והמשיכו בטיפול לאחר הניתוח כמתואר בכתב היד.
עכברוש VCA הטרוטופית בדיעבד מודל דש osteomyocutaneous מאפשר הישרדות allograft לטווח ארוך תחת דיכוי המערכת החיסון. הדש מוסתר היטב באזור המפשעה, ומהווה תחלואה מינימלית ואי נוחות לבעלי החיים. כאשר הטיפול בדיכוי המערכת החיסון הופסק, השתל נדחה.
תמונות דופלר של allograft להראות מעבר מ שפע דם מינימלי מיד לאחר VCA, כדי revascularization מלא של הדש ביום 64. ביופסיה של העור של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית של מרכיבי העור, ואילו יש ניוון חדירת תא מונונוקלארי allograft allogeneic בדחייה ביום 75 מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון. ביופסיית שרירים של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית, ואילו ניוון שרירים חדירת תאים מונונוקלאריים ניכרים allograft allogeneic בדחייה ביום 98, מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון.
ביופסיה עורק הירך של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית של העורק, בניגוד לעורק הירך של allograft allogeneic בדחייה ביום 98, מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון. מודל זה מספק כלי לבדיקת ההשפעות של דחייה חריפה, דחייה כרונית וגורמים סביבתיים כגון זיהום ועלבונות כירורגיים על התפתחות vasculopathy. תרופות לדיכוי המערכת החיסון נדרשות להישרדות ארוכת טווח של השתל.
תרופות אלה הן מסוכנות מבחינה כימית, ויש לטפל בהן בזהירות ובציוד מגן נכון של כוח אדם.
השתל המורכב של vascularized מציע יתרונות משנים חיים לנמעני ההשתלה, אך הגורמים הביולוגיים לדחיית השתל והעיקור נשארים ברורים לקוי. המודל הכירורגי מכרסם הציג כאן מציע המודל הרלוונטי קלינית של השתלת, המאפשר לחוקרים להעריך את אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כדי למנוע את התרחשותן.
14:03
Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats
Related Videos
11658 Views
11:12
In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury
Related Videos
13696 Views
09:09
A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research
Related Videos
12439 Views
12:24
A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice
Related Videos
9230 Views
07:15
Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse
Related Videos
11640 Views
10:31
Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model
Related Videos
7569 Views
10:10
A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap
Related Videos
16603 Views
05:34
A Reliable Porcine Fascio-Cutaneous Flap Model for Vascularized Composite Allografts Bioengineering Studies
Related Videos
2288 Views
06:19
Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats
Related Videos
2719 Views
14:18
Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat
Related Videos
7299 Views
Read Article
Cite this Article
Fleissig, Y., Reed, R. M., Beare, J. E., LeBlanc, A. J., Williams, S. K., Kaufman, C. L., Hoying, J. B. Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research. J. Vis. Exp. (146), e59458, doi:10.3791/59458 (2019).
Copy