Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Anthony R. Di Carluccio; Eleonora Tresoldi; Michelle So; Stuart I. Mannering

doi:10.3791/59545

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Immunology and Infection

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カルボキシフルオレスチンスクシニミジルエステルを用いたヒト抗原特異的CD4+T細胞の増殖の定量化

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Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4⁺ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

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カルボキシフルオレスチンスクシニミジルエステルを用いたヒト抗原特異的CD4+T細胞の増殖の定量化

DOI:

10.3791/59545-v

•

07:00 min

•

June 04, 2019

•

Anthony R. Di Carluccio, Eleonora Tresoldi, Michelle So, Stuart I. Mannering²

¹Immunology and Diabetes Unit,St. Vincent’s Institute of Medical Research, ²Department of Medicine,University of Melbourne, St. Vincent’s Hospital

Chapters

00:04Title
00:41Whole Blood Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Preparation
01:21CD4⁺ T Cell Preparation
03:16CD4⁺ T Cell Labeling
04:11Flow Cytometric Analysis
05:31Results: Representative CFSE-labeled, Activated CD4⁺ T Cell Proliferation
06:21Conclusion

Summary

Automatic Translation

ここで提示される、色素希釈を用いた抗原タンパク質またはペプチドに応答して増殖CD4+T細胞を測定するためのプロトコルである。このアッセイは、特に希少な抗原特異的T細胞に対して感受性があり、抗原特異的細胞のクローニングを容易にするために改変することができる。

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抗原特異的インビボでのキリングアッセイ

リンパ球増殖を監視するためのカルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル（CFSE）の使用

ゾレドロネートを使用してヒト末梢血γδT細胞の拡大

ナイーブCD4のアデノウイルス形質導入Tregの分化を研究するためにT細胞

離とナイーブCD4 Tリンパ球のTh17分化

HIV-1感染CD4の生得センシングを評価 +使用して形質細胞様樹状細胞によるT細胞エクスビボ共培養系。

効率的なためキラー人工抗原提示細胞（KaAPC）体外ヒト抗原特異的T細胞の枯渇

生成デ・ノボセンHemichainのレトロウイルス形質導入によって抗原特異的ヒトT細胞受容体

自己免疫に対する幹細胞由来の抗原特異的制御性T細胞の開発

TGF-βを含むプロトコルを使用したナイーブCD4 ⁺ T細胞からのヒトCD4 ⁺ FOXP3 ⁺誘導された調節性T細胞（iTregs）のインビトロ分化における