Valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e l'ipertensione arteriosa polmonare indotta dall'ipossia nei topi

Questo protocollo è una valutazione emodinamica basata su chirurgia toracica aperta ed è utile per la giusta valutazione della pressione dell’arteria ventricolare e polmonare in piccoli animali come i topi. Il vantaggio di questa procedura è che può generare sia parametri VP che PAP allo stesso tempo. Pertanto è preferibile per le valutazioni dei modelli di IAP.

Inizia impostando l’attrezzatura per l’intervento chirurgico. Immergere il catetere del trasduttore di pressione nello 0,9% di soluzione salina a temperatura ambiente per almeno 30 minuti prima dell’esperimento emodinamico. Quindi, collegare il catetere a un sistema di volume di pressione.

Calibrare il trasduttore di pressione ruotando la manopola di calibrazione a zero e 25 millimetri di mercurio per inviare un segnale di pressione di verifica al software di acquisizione dati, quindi configurare l’impostazione di calibrazione. Ruotare la manopola per trasduttore e regolare la valvola di bilanciamento su zero linea di base. Impostare un microscopio stereo standard, un tavolino chirurgico per animali di piccole dimensioni a temperatura controllata e un sistema di illuminazione leggera per la microchirurgia.

Una volta che il mouse è correttamente anestetizzato, rimuovere la pelliccia del petto e del collo usando un rasoio e una lozione per la depilazione. Fissare il mouse in posizione supina sul tavolo chirurgico a temperatura controllata. Dopo aver fatto in modo che l’anestesia sia in vigore, fare un’incisione della linea mediana sulla pelle del collo.

Sezionare il muscolo scheletrico usando forcep curve ed esporre la trachea. Eseguire l’intubazione attraverso la bocca con un catetere di sheath per via endovenosa calibro 22, confermando che il tubo è nella trachea con forcette. Collegare il tubo a un piccolo ventilatore per animali e fissarlo per la ventilazione utilizzando il nastro adesivo.

Quindi, fare un’incisione della linea mediana sulla pelle del torace e sezionare attentamente il muscolo toracico usando uno strumento cautery. Tagliare lo sterno usando le forbici attraverso il centro ed esporre la cavità toracica. Assicurarsi di evitare qualsiasi sanguinamento utilizzando lo strumento cautery.

Esporre il ventricolo destro con retrattori, quindi inserire il catetere trasduttore di pressione imbevuto salino attraverso un piccolo tunnel creato con un ago calibro 25 nel ventricolo destro per misurare la pressione ventricolare destra, o RVP. Tenere il cavo del catetere e attraversare la valvola polmonare in modo coassiale con l’arteria polmonare. Osservare la forma d’onda di pressione e ottenere una pressione dell’arteria polmonare stabile o un segnale PAP.

Successivamente, registrare i dati emodinamici utilizzando il software di acquisizione dati. Rimuovere con cura il catetere dal sistema cardiaco destro e posizionarlo in una siringa millilitro contenente l’1% di soluzione enzimatica digestiva. Questo protocollo è stato utilizzato con successo per ottenere forme d’onda RVP e PAP nei topi inserendo un catetere trasduttore di pressione nel ventricolo destro e nell’arteria polmonare.

Al fine di evitare la generazione di dati artificiali, i segmenti con rumore sono stati esclusi dall’analisi dei dati e sono state apportate correzioni se il livello zero del catetere era andato alla deriva. RVP e PAP sono stati misurati in topi con ipossia cronica indotta e i risultati sono stati confrontati con quelli ottenuti da un gruppo di controllo. Pap sistolico, PAP diastolico, PAP medio e pressione sistolica ventricolare destra sono stati tutti significativamente aumentati nel gruppo dell’ipossia cronica.

La cosa più importante da ricordare è inserire attentamente il catetere trasduttore di pressione nel ventricolo destro, assicurandosi di evitare danni al catetere e confermare che la forma d’onda RVP liscia appare sullo schermo.