8,878 Views
•
04:54 min
•
October 24, 2019
DOI:
Este protocolo é uma avaliação hemodinâmica baseada em cirurgia torácica aberta e é útil para a avaliação de pressão ventricular e pulmonar direita em pequenos animais, como camundongos. A vantagem deste procedimento é que ele pode gerar parâmetros VP e PAP ao mesmo tempo. Por isso, é preferível para avaliações de modelos PAH.
Comece montando o equipamento para a cirurgia. Mergulhe o cateter transdutor de pressão em 0,9% salino à temperatura ambiente por pelo menos 30 minutos antes do experimento hemodinâmico. Em seguida, conecte o cateter a um sistema de volume de pressão.
Calibrar o transdutor de pressão girando o botão de calibração para zero e 25 milímetros de mercúrio para enviar um sinal de pressão de verificação para o software de aquisição de dados e, em seguida, configurar a configuração de calibração. Gire o botão para o transdutor e ajuste a válvula de equilíbrio para zero de linha de base. Configure um microscópio estéreo padrão, mesa cirúrgica de pequeno animal controlada pela temperatura e um sistema de iluminação leve para microcirurgia.
Uma vez que o rato esteja devidamente anestesiado, remova a pele do peito e do pescoço usando uma máquina de barbear e loção de depilação. Fixar o mouse na posição supina na mesa cirúrgica controlada pela temperatura. Depois de garantir que a anestesia esteja em vigor, faça uma incisão midline na pele do pescoço.
Disseque o músculo esquelético usando fórceps curvos e exponha a traqueia. Realizar intubação pela boca com um cateter de bainha intravenosa de 22 bitolas, confirmando que o tubo está na traqueia com fórceps. Conecte a tubulação a um pequeno ventilador animal e fixe-o para ventilação usando fita adesiva.
Em seguida, faça uma incisão midline na pele do peito e disseca cuidadosamente o músculo torácico usando uma ferramenta de cauteria. Corte o esterno usando uma tesoura no meio, e exponha a cavidade torácica. Certifique-se de evitar qualquer sangramento usando a ferramenta cautery.
Exponha o ventrículo direito com retráteis e, em seguida, insira o cateter transdutor de pressão embebido salino através de um pequeno túnel criado com uma agulha de calibre 25 no ventrículo direito para medir a pressão ventricular direita, ou RVP. Segure o cabo do cateter e cruze a válvula pulmonar de forma coaxial com a artéria pulmonar. Observe a forma de onda de pressão e obtenha uma pressão arterial pulmonar estável ou sinal PAP.
Em seguida, registo os dados hemodinâmicos usando o software de aquisição de dados. Remova cuidadosamente o cateter do sistema cardíaco direito e coloque-o em uma seringa de um mililitro contendo solução de enzima digestiva de 1%. Este protocolo foi usado com sucesso para obter formas de onda RVP e PAP em camundongos, inserindo um cateter transdutor de pressão no ventrículo direito e na artéria pulmonar.
Para evitar a geração de dados artificiais, segmentos com ruído foram excluídos da análise de dados e correções foram feitas se o nível zero do cateter tivesse derivado. RVP e PAP foram medidos em camundongos com hipóxia crônica induzida, e os resultados foram comparados aos obtidos de um grupo controle. PAP sistólica, PAP diastólica, PAP médio e pressão sistólica ventricular direita foram significativamente aumentadas no grupo de hipóxia crônica.
A coisa mais importante a se lembrar é inserir o cateter transdutor de pressão no ventrículo direito cuidadosamente, certificando-se de evitar danos ao cateter e confirmar que a forma de onda RVP lisa aparece na tela.
Aqui, apresentamos um protocolo para realizar uma avaliação hemodinâmica invasiva do ventrículo direito e artéria pulmonar em camundongos usando uma abordagem de cirurgia de caixa aberta.
Read Article
Cite this Article
Luo, F., Wang, X., Luo, X., Li, B., Zhu, D., Sun, H., Tang, Y. Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice. J. Vis. Exp. (152), e60090, doi:10.3791/60090 (2019).
Copy