Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Etablering af akut Pontine Infarkt hos rotter ved elektrisk stimulation
Chapters
Summary August 27th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Præsenteret her er en protokol for oprettelse af akut pontin infarkt i en rotte model via elektrisk stimulation med en enkelt puls.
Transcript
Vi leverer en protokol til at etablere infarkt i en pons af rotte. Denne pontine infarkt rotte model blev let udført, let gengives, og meget vellykket model. Den elektriske stimulation kan bruges til at gøre infarkt i ethvert andet hjerneområde som thalamus.
Folk, der ønsker at udføre denne model bør lære pontine autonomi før eksperimentet. Før operationen, vejer rotterne og vurdere deres neurologiske ydeevne i henhold til de adfærdsmæssige tests som beskrevet i den medfølgende tekst. Forvarm varmepuden til 37 grader Celsius umiddelbart før anæstesi og fastgør kraniet boret til holderen på stereotaxic ramme.
Bekræft manglende reaktion på pedalrefleks i den første bedøvede rotte og monter rotten på den stereoaksiske ramme i den udsatte position på varmepuden. Placer ørestængerne over øregangen for at fastgøre hovedet, idet du skal passe på, at kraniet holdes vandret for at undgå skævvridning af injektionen. Påfør salve til dyrets øjne og bruge en mikro barbermaskine til at fjerne håret fra kraniet.
Brug en markør til at tegne en tre centimeter linje langs midterlinjen af kraniet fra linjen af den bilaterale laterale canthus til 0,5 centimeter bag den bageste fontanelle og bruge en skalpel til at gøre en midterlinje snit langs den markerede linje. Brug en vatpind til at fjerne blod og placere et stykke kirurgisk tape på hver side af huden flap til at udsætte kraniet. Brug en ny vatpind dyppet med 0,9% natriumchlorid til forsigtigt at fjerne bindevæv fra kraniet og finde bregma.
Brug en fin spids markør pen til at angive det centrale punkt i bregma som oprindelse punkt, skal du placere boret på seks millimeter forreste posterior, to millimeter mediale lateral. Brug boret til omhyggeligt at udføre en en millimeter diameter kraniotomi. Dernæst erstattet boret med en 22 gauge sonde med en isoleret kappe med spidsen placeret to millimeter over den proksimale ende af skeden.
Sæt arkene syv millimeter ind i hjernen og fremrykning sonden langs hylsteret, indtil toppen af sonden er ni millimeter under overfladen af hjernen. Tilslut elektroderne til en elektrisk stimulator og tilslut anoden til sonden. Derefter oprette forbindelse til katoden til øret af rotten.
Tænd derefter for den elektriske stimulator og indstil den enkelte pulsbredde til 4.050 millisekunder, spændingen til 50 volt og strømmen til fire milliampere. Lad sonden være i position i fem minutter efter stimulering, før du fjerner enheden fra hjernen. Dæk kraniotomi med knoglecement og lad cementen tørre, før du bruger 4,0 polyamid sutur filamenter til at lukke såret.
Efter tre eller fire sting bindes 2-1-1 standard kirurgiske knuder. Derefter intraperitoneally injicere rotten med 250 mikroliter af penicillin og overvåge rotten hver 15 minutter, indtil fuldt vågen, før du returnerer dyret til sit bur. I denne analyse blev seks dyr udsat for operationen som påvist, og seks dyr blev behandlet som kontrol.
Hjernesnit i disse billeder stammer fra en rotte pr. gruppe. MR-scanning viste, at infarkt var placeret i grundlaget for pons efterligne anterolateral infarktering hos menneskelige patienter. Fordi en isoleret kappe blev brugt, infarkt blev ikke observeret i cortex, lillehjernen, eller midhjernen.
Diffusion vægtede billeder afslørede også den akutte pontin infarkt. TTC farvning blev brugt til at bekræfte infarkt 24 timer efter operationen. Som forventet var infarktvolumenet signifikant højere i operationsgruppen sammenlignet med kontrolgruppen.
Adfærdsmæssige score blev målt før og efter operationen. Sammenlignet med kontrolgruppen kredsede rotter med en pontininfarkt til venstre. Signifikante forskelle blev observeret i Longa, Berderson, lemmer placering, stråle balance, og klæbemiddel fjernelse somatosensoriske testscores mellem rants med pontine infarkt og kontrol gruppe rotter.
Ethvert specifikt hjerneområde vil blive ødelagt af den elektriske stimulation.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
