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In Vitro Evolução dirigida de uma endonuclease de restrição com especificidade mais rigorosa
 
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In Vitro Evolução dirigida de uma endonuclease de restrição com especificidade mais rigorosa

Article DOI: 10.3791/60807-v
March 25th, 2020

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Summary March 25th, 2020

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Endonucleases de restrição com nova especificidade de seqüência podem ser desenvolvidas a partir de enzimas que reconhecem uma seqüência parcialmente degenerada. Aqui fornecemos um protocolo detalhado que usamos com sucesso para alterar a especificidade da seqüência da enzima NlaIV. Os ingredientes-chave do protocolo são a compartimentação in vitro da reação de transcrição/tradução e a seleção de variantes com novas especificidades de seqüência.

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