A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
We beschrijven een betrouwbare methode voor de bereiding van hele celextracten uit gist of andere cellen met behulp van een cryogene vriesmolen die afbraak en denaturatie van eiwitten minimaliseert. De celextracten zijn geschikt voor zuivering van functionele eiwitcomplexen, proteomische analyses, co-immunoprecipitatiestudies en detectie van labiele eiwitmodificaties.
Tags
Yeast Cell LysisCryogrindingAutomated Freezer MillProtein ExtractionNative Protein IsolationMacromolecule ExtractionPhysical Lysis MethodsTemperature-sensitive LysisEnzymatic Lysis LimitationsChemical Lysis LimitationsFrench PressMortar And PestleBead Beater MillSonicationHeat GenerationProtein DenaturationProtein Degradation
