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Flujo de trabajo integral de proteómica de escopeta basada en espectrometría de masas de muestras de tejido
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Biology
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JoVE Journal Biology
Comprehensive Workflow of Mass Spectrometry-based Shotgun Proteomics of Tissue Samples
DOI:

14:51 min

November 13, 2021

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Chapters

  • 00:00Introduction
  • 00:42Tissue Lysate Preparation
  • 01:51Quantification and Quality Check of Tissue Lysates
  • 02:33Enzymatic Digestion of Proteins
  • 03:57Desalting of Digested Peptides
  • 05:16Quantification of Desalted Peptides
  • 05:58Labeling of Digested Peptides using iTRAQ Reagents
  • 08:14Liquid Chromatography Set-up
  • 09:25Mass Spectrometry Set-up
  • 12:30Representative Results
  • 13:45Conclusions

Summary

Automatic Translation

El protocolo descrito proporciona un análisis proteómico cuantitativo optimizado de muestras de tejido utilizando dos enfoques: cuantificación basada en etiquetas y sin etiquetas. Los enfoques basados en etiquetas tienen la ventaja de una cuantificación más precisa de las proteínas, mientras que un enfoque sin etiquetas es más rentable y se utiliza para analizar cientos de muestras de una cohorte.

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