A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Introduction
- 00:42Tissue Lysate Preparation
- 01:51Quantification and Quality Check of Tissue Lysates
- 02:33Enzymatic Digestion of Proteins
- 03:57Desalting of Digested Peptides
- 05:16Quantification of Desalted Peptides
- 05:58Labeling of Digested Peptides using iTRAQ Reagents
- 08:14Liquid Chromatography Set-up
- 09:25Mass Spectrometry Set-up
- 12:30Representative Results
- 13:45Conclusions
Den beskrevne protokol giver en optimeret kvantitativ proteomics analyse af vævsprøver ved hjælp af to tilgange: etiket-baseret og etiket fri kvantitet. Etiketbaserede tilgange har den fordel, at proteiner kvantificeres mere præcist, mens en etiketfri tilgang er mere omkostningseffektiv og bruges til at analysere hundredvis af prøver af en kohorte.
