A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Introduction
- 00:42Tissue Lysate Preparation
- 01:51Quantification and Quality Check of Tissue Lysates
- 02:33Enzymatic Digestion of Proteins
- 03:57Desalting of Digested Peptides
- 05:16Quantification of Desalted Peptides
- 05:58Labeling of Digested Peptides using iTRAQ Reagents
- 08:14Liquid Chromatography Set-up
- 09:25Mass Spectrometry Set-up
- 12:30Representative Results
- 13:45Conclusions
वर्णित प्रोटोकॉल दो दृष्टिकोणों का उपयोग करके ऊतक नमूनों का एक अनुकूलित मात्रात्मक प्रोटेओमिक्स विश्लेषण प्रदान करता है: लेबल-आधारित और लेबल मुक्त क्वांटिटेशन। लेबल आधारित दृष्टिकोण प्रोटीन के अधिक सटीक मात्रा का लाभ है, जबकि एक लेबल मुक्त दृष्टिकोण अधिक लागत प्रभावी है और एक पलटन के नमूनों के सैकड़ों का विश्लेषण करने के लिए इस्तेमाल किया ।
