Chemistry
This content is Free Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Количественный 31P ЯМР анализ лигнинов и танинов
Chapters
Summary August 2nd, 2021
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
31 31 ЯМР является мощным инструментом для структурного выяснения полифенолов. Эта быстрая, простая, точная, количественная и высоко воспроизводимая аналитическая процедура, которая позволяет количественно оценивать и дифференцировать различные типы гидрокси,фенольных и карбоксильных групп в лигнинах и танинах, теперь стала обычным аналитическим инструментом.
Transcript
Количественный фосфорный ЯМР представляет собой один из самых значительных прорывов в аналитической химии лигнина и танина за последние три десятилетия. Этот метод предлагает быструю, надежную и количественную информацию для различных гидроксигрупп в образце. Эти методы ЯМР имеют огромное значение для понимания структуры лигнанов и танинов.
Он также был применен к множеству других систем, которые имеют реакционноспособные гидроксильные группы. Начните с предварительной обработки 100 миллиграммов образца лигнина или танина, высушивая ночь в вакуумной печи при 40 градусах Цельсия. После высыхания быстро перенесите образец в безводный осушитель сульфата кальция до тех пор, пока он не достигнет комнатной температуры.
Чтобы подготовить образец к ЯМР-спектроскопии, точно взвесьте около 30 миллиграммов образца в двухмиллилитровом флаконе, оснащенном перемешивающим стержнем. Затем добавьте 500 микролитров свежеприготовленного раствора растворителя во флакон с образцом и запечатайте флакон колпачком. Используя микропипетку, добавьте 100 микролитров внутреннего стандартного раствора во флакон с образцом, затем магнитно перемешайте полученную дисперсию со скоростью 500 оборотов в минуту.
Когда образец полностью растворен, переложите 100 микролитров тетраметилдиоксифосфолана или TMDP в раствор образца во время работы под капотом и запечатайте раствор образца перед помещением образца для энергичного магнитного перемешивания. В этот момент указанная реакция происходит на образцах лигнина и танина. Используя пипетку Пастера, перенесите образец раствора в ЯМР-трубку для анализа.
Если в образце наблюдается желтый осадок, повторите процедуру, обеспечив избежание всех возможных загрязнений влагой. Загрузите пробоотборник в прибор ЯМР, оснащенный широкополосным зондом, и установите экспериментальные параметры. Используя резонансную частоту дейтерированного хлороформа, устанавливают частоту в спектрометре.
Проставим образец и настройте спектрометр перед началом приобретения. Начните обработку необработанных данных из ЯМР-спектроскопии P31, выполнив преобразование Фурье. Отрегулируйте фазовую коррекцию вручную, разверкя вкладку обработки и выбрав коррекцию фазы и ручную коррекцию.
Исправьте базовую линию вручную, тщательно установив нулевые точки после щелчка обработки и выбора базовой и многоточечной базовой коррекции. Для калибровки сигнала установите сигнал для фосфорилированной воды на значение химического сдвига 132,2 части на миллион, открыв вкладку анализа, затем выберите ссылку в справочной вкладке. Для интеграции сигналов откройте интеграл в меню анализа.
Чтобы нормализовать интеграцию, установите внутренний стандарт на 1,0, щелкнув по пику, чтобы выбрать интеграл редактирования и ввести значение 1,00 в нормализованной вкладке, а затем выполните интеграцию спектра в соответствии с химическими сдвигами, о которых сообщается в рукописи. Используйте уравнение для расчета молярной концентрации внутреннего стандартного, или IS, раствора и используйте рассчитанное значение для оценки эквивалентного количества конкретного сигнала на грамм образца. Количественная оценка спектра различных гидроксигрупп в лигнине хвойных пород, полученном с помощью TMDP, была зарегистрирована с использованием 300 мегагерц и 700 мегагерц ЯМР-спектрометра.
В спектрах ЯМР были обнаружены резкие и сильные пики при 144 и 132 PPM из-за внутреннего стандарта и гидроксилирования TMD соответственно. Различные сигналы гидроксигрупп были очевидны во всех количественных спектрах ЯМР P31 лигнинов. В количественном спектре ЯМР P31 образца танина, дериватированного с использованием TMDP, был хорошо виден характерный сигнал от различных алифатических единиц пирогаллола и катехола.
Сравнение между ЯМР-спектром лигнина до и после окисления регистрировалось с помощью 300-мегагерцового ЯМР-спектрометра, показывающего снижение интенсивности пиков гидроксигрупп. Важнейшими этапами являются этапы, относящиеся к сушке и взвешиванию образца, а также к используемым параметрам обработки ЯМР. И самое главное, фазирование полученных спектров.
Когда этот метод сочетается с двумерной ЯМР и гель-проникающей хроматографией, может появиться очень подробная картина природных полифенолов, предлагающая беспрецедентную структурную информацию и новые идеи.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
