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Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry
Ein reporterbasierter zellulärer Assay zur Überwachung der Spleißeffizienz
An Alternative Approach to Protein Quantification by Bradford Assay Using a Smartphone (Video) | JoVE
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Ein reporterbasierter zellulärer Assay zur Überwachung der Spleißeffizienz

Article DOI: 10.3791/63014-v • 08:53 min • September 15th, 2021
September 15th, 2021 •
1, 1, 1
1Department of Basic Medical Sciences, College of Medicine-Phoenix, University of Arizona

Chapters

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Dieses Protokoll beschreibt einen Minigene-Reporter-Assay zur Überwachung der Auswirkungen von 5'-Spleißstellenmutationen auf das Spleißen und entwickelt Suppressor U1 snRNA zur Rettung der mutationsinduzierten Spleißhemmung. Die Reporter- und Suppressor-U1-snRNA-Konstrukte werden in HeLa-Zellen exprimiert, und das Spleißen wird durch Primer-Extension oder RT-PCR analysiert.

Tags

Biochemie Ausgabe 175 RNA-Protein-Interaktion pre-mRNA-Spleißen Spleißosom U1 snRNP Intron Exon Spleißstelle Dup51p-Reporter Exon-Skipping
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