קביעת העדפת טמפרטורה של יתושים ואקטותרמיות אחרות

מערך זה של שני תאים משמש לחקר העדפת הטמפרטורה של חרקים וניתן לשנות אותו כדי לחקור מצבי העדפת בחירה בינאריים אחרים כגון אור לעומת כהה או לחות גבוהה לעומת נמוכה. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם ההתקנה הפשוטה, השטח המרווח המאפשר לחרקים להפגין את טבעם המעופף בעת בחירת הטמפרטורה המועדפת עליהם, וניקוד קל ללא ציוד חיצוני. החלק הקשה ביותר בפרוטוקול הוא הסרת הפרצה האקרילית לאחר הניסוי.

הסיבה לכך היא שיש סיכוי גבוה שהחרקים יברחו. לכן, חשוב לנו להשתמש בפחמן הדו-חמצני כדי להרדים את החרקים. מי שידגימו את ההליך יהיו קינגה סטוביירסקה ולורנה גלן, שתיהן תלמידות מאסטר מהמעבדה שלי.

כדי להתחיל, הכינו 2 כלובי יתושים ריקים עם פתחי שרוול של 12 ס”מ וודאו שאין חורים או נזקים אחרים. לאחר מכן, באמצעות שואב מכני, העבירו 30 חרקים לכלוב נפרד לצורך טיפול וסילוק קלים יותר לאחר הניסוי. הגדר את האינקובטורים לטמפרטורות הרצויות ואפשר להם להתחמם ולהתייצב.

זה לוקח בערך 30 דקות כדי להשיג טמפרטורה בטווח של 25 עד 30 מעלות צלזיוס. לאחר מכן מניחים כלוב יתושים ריק באינקובטור ומזינים את שרוולי הכלוב דרך החור הקדמי של האינקובטור. אשר את טמפרטורת האוויר הפנימית של האינקובטור באמצעות בדיקת טמפרטורה.

לאחר מכן, מניחים דש נפתח מוכן עם סרט דביק מעל החור בצינור האקריליק. מגלגלים את השרוול הבולט דרך החור שלפני האינקובטור הראשון, ומהדקים אותו מעל קצה אחד של הצינור האקרילי באמצעות רצועה אלסטית. לאחר מכן מניחים את האינקובטורים זה מול זה ומכניסים קצה אחד של הצינור האקרילי לשרוול חור האינקובטור השני.

ודא כי קוטר הצינור האקרילי גדול יותר מהחור בחזית האינקובטורים, כך שהוא מכסה לחלוטין את החור. ודא שהצינור האקרילי אינו רופף ומשתלשל בין האינקובטורים. אם כן, משכו את שרוולי הכלוב כדי להסיר את עודפי החומר בין הכלוב לגומי.

כדי להכניס את היתושים פנימה, פתח את דש סרט הדבקה. מכניסים משפך לתוך החור של הצינור האקרילי ואז מרוקנים את החרקים לתוך הצינור דרך המשפך. לאחר ריקון החרקים, הסר את המשפך וכסה את חור הצינור בדש סרט דביק.

השאירו למשך 30 דקות לחרקים לבחור את התא המועדף. בתום זמן ההתיישבות, התבוננו ויזואלית ורשמו את מספר החרקים שנראו בגשר הצינור האקרילי. לאחר מכן הקישו או פוצצו את כל החרקים בגשר לכל צד של האינקובטור או על ידי שחרור פחמן דו חמצני לתוך הגשר.

לאחר מכן, צובטים וסוגרים את השרוולים מהצינור האקרילי משני הצדדים על ידי הידוק מהיר שלהם עם קשר הדוק. לאחר מכן הסר את הכלובים משני האינקובטורים וספור חזותית את החרקים בכל כלוב. ודא שהמספרים משני האינקובטורים והגשר מסתכמים ב-30.

במחקר הנוכחי נקבעה העדפת הטמפרטורה של היתושים וזבובי הפירות באמצעות המודל הדו-תאי. התוצאות לא הראו הבדל משמעותי כאשר שני הכלובים הוחזקו בטמפרטורה של 27 מעלות צלזיוס, מה שמעיד על יכולתם של היתושים לבחור באופן חופשי בין כלובים המציגים את התנהגותם הטבעית. לעומת זאת, כאשר שני התאים נקבעו בטמפרטורות שונות, היתושים בחרו בעקביות את הטמפרטורה האופטימלית של 27 מעלות צלזיוס על פני 30 מעלות צלזיוס.

באופן דומה, כאשר ההתקנה נבדקה עם Drosophila Melanogaster, דגם אקטודרם אחר, זבובי הפירות נמנעו מתא חם יותר והעדיפו את הטמפרטורה האופטימלית שלהם של 25 מעלות צלזיוס. ודא כי ההתקנה אטומה לחלוטין ללא מקומות מסתור וללא רשת המשבשת את אזור המעופף, כך שהחרקים יכולים לבחור בחופשיות בין 2 החדרים.