Bestemme temperaturpreferanse for mygg og andre ektotermer

Dette oppsettet med to kammerapparater brukes til å studere insektenes temperaturpreferanse og kan modifiseres for å studere andre binære valgpreferansesituasjoner som lys versus mørk eller høy versus lav luftfuktighet. De viktigste fordelene med denne teknikken er det enkle oppsettet, det romslige området som gjør at insektene kan vise sin flygende natur når de velger sin foretrukne temperatur, og enkel scoring uten eksternt utstyr. Den vanskeligste delen av protokollen er å fjerne akrylbruddet etter forsøket.

Dette er fordi det er stor sjanse for at insektene rømmer. Derfor er det avgjørende for oss å bruke karbondioksidet til å bedøve insektene. Demonstrere prosedyren vil være Kinga Stobierska og Lorna Glenn, begge masterstudenter fra laboratoriet mitt.

For å begynne, klargjør 2 tomme myggbur med 12 centimeter hylseåpninger og sørg for at det ikke er hull eller andre skader. Deretter bruker du en mekanisk aspirator, overfører 30 insekter til et eget bur for enklere håndtering og avhending etter forsøket. Sett inkubatorene til de ønskede temperaturene og la dem varme opp og stabilisere seg.

Det tar omtrent 30 minutter å oppnå en temperatur i området 25 til 30 grader Celsius. Legg deretter et tomt myggbur i en inkubator og mate ermene på buret gjennom inkubatorens fremre hull. Bekreft innelufttemperaturen til inkubatoren med en temperatursonde.

Deretter plasserer du en åpen klaff tilberedt med tape over hullet i akrylrøret. Rull opp ermet som stikker ut gjennom hullet foran den første inkubatoren, og fest den over den ene enden av akrylrøret med et elastisk bånd. Plasser deretter inkubatorene vendt mot hverandre og sett den ene enden av akrylrøret inn i hylsen til det andre inkubatorhullet.

Forsikre deg om at diameteren på akrylrøret er større enn hullet foran på inkubatorene slik at den helt dekker hullet. Forsikre deg om at akrylrøret ikke er løs og dingler mellom inkubatorene. Hvis det er det, trekk burhylsene for å fjerne overflødig materiale mellom buret og gummibåndet.

For å sette myggene inni, åpne duct tape klaffen. Plasser en trakt i hullet i akrylrøret og tøm deretter insektene inn i røret gjennom trakten. Etter tømming av insekter, fjern trakten og dekk rørhullet med en tapeklaff.

La i 30 minutter for insekter å velge det foretrukne kammeret. På slutten av sedimenteringstiden, visuelt observere og skrive ned antall insekter sett i akrylrørbroen. Trykk deretter eller blås alle insektene i broen til hver side av inkubatoren eller ved å slippe karbondioksid inn i broen.

Deretter klemmer og lukker du ermene fra akrylrøret på begge sider ved raskt å feste dem med en tett knute. Fjern deretter burene fra begge inkubatorer og visuelt telle insekter i hvert bur. Pass på at tallene fra både inkubatorer og broen legger opp til 30.

I denne studien ble temperaturpreferansen til mygg og fruktfluer bestemt ved hjelp av tokammermodellen. Resultatene viste ingen signifikant forskjell når begge burene ble opprettholdt på 27 grader Celsius, noe som indikerer myggens evne til fritt å velge mellom bur som viser sin naturlige oppførsel. Omvendt, når de to kamrene ble satt til forskjellige temperaturer, valgte myggene konsekvent den optimale temperaturen på 27 grader Celsius over 30 grader Celsius.

På samme måte, da oppsettet ble testet med Drosophila Melanogaster, en annen ektodermmodell, unngikk bananfluene det varmere kammeret og foretrakk deres optimale temperatur på 25 grader Celsius. Sørg for at oppsettet er helt forseglet uten gjemmesteder og ingen maske som forstyrrer det flygende området, slik at insektene fritt kan velge mellom de 2 kamrene.