Отбор проб морской воды и сбор

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Это видео документы методы сбора проб воды прибрежных морских и обработка их для различных приложений, включая вниз по течению концентрация биомассы, нуклеиновые кислоты очистки, сотовые изобилие, питательных веществ и следов анализ газа.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Zaikova, E., Hawley, A., Walsh, D. A., Hallam, S. J. Seawater Sampling and Collection. J. Vis. Exp. (28), e1159, doi:10.3791/1159 (2009).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Это видео документы методы сбора проб воды прибрежных морских и обработка их для различных приложений, включая вниз по течению концентрация биомассы, нуклеиновые кислоты очистки, сотовые изобилие, питательных веществ и следов анализ газа. Для демонстрации сегодняшней образцы были собраны с палубы HMS Джон Стрикленд, работающих в Саанич входе. А-образные вышки, с многоцелевым лебедки и кабельная система, используется в сочетании с Niskin или Go-Flo бутылки отбора проб воды. Проводимости, температуры и глубины (CTD) датчики используются также для образца основной водной массы. Чтобы свести к минимуму дегазации, следов газа образцы собраны в первую очередь. Затем, питательные вещества, химический состав воды, а также клеток определяются. Наконец, воды собираются для биомассы фильтрации. Настройка и время сбора для одного приведение ~ 1,5 часа при максимальной глубине 215 метров. Таким образом, в общей сложности 6 часов, как правило, необходимых для завершения коллекции серии описаны здесь.

Protocol

Часть 1: для сбора воды

  1. Глубины присваиваются каждому актеров.
  2. Глубины на отбор проб и общего объема должны быть собраны для текущего литых определяются.
  3. Он заверил, что Go-Фло и Niskin бутылки открыты, и что их клапаны и краны закрыты.
  4. CTD загружается на нижней линии и ниже в воду.
  5. Бутылки для глубокой глубине, отобранных в литых первой загружается на линии после CTD, он заверил, что линия правильно установлены в скобы и винты затянуты.
  6. Посланник прилагается к каждой бутылке (за исключением самых глубоких один) перед спуском.
  7. Линия опускается расстояние между первым глубину и затем; еще одну бутылку, затем загружены. Следует отметить, что для глубин, где 20L собираются для фильтрации, в общей сложности 2 12L бутылки загружаются последовательно около 0,75 м друг от друга.
  8. После того как все бутылки на линии, линии опускают на необходимую глубину и 2 минуты разрешается проход.
  9. Гонец направляется вниз и через несколько минут разрешено пройти, чтобы все бутылки близко.
  10. Линия наматывается внутри и бутылки выгружаются по мере их появления на стойках.
  11. Для глубин, которые требуют 20L пробы для ДНК и РНК, две бутылки Niskin собираются. Одна бутылка используется для образцов химических параметров (см. ниже), в то время как другие сливают в бутыль. РНК собирается сразу со второго Niskin. Остальная часть первой также слить в бутыль, чтобы дать ~ 20L конечного объема. Для низкого разрешения образцов только 1л воды, предназначенные для фильтрации в стерильные бутылки Nalgene.

Часть 2: сбор пробы газа

  1. Если кислорода образцы нужны, они собираются в первую очередь.
  2. Кусок тонкой трубки крепится к Niskin / Go-Flo кран, а другой конец трубки находится место в стеклянные бутылки сыворотки.
  3. Сыворотке бутылки промыть 3 раза пробы воды, и наполнил до краев, что нет воздушных пузырей присутствуют.
  4. 50 мкл хлоридом ртути (HgCl 2) будут добавлены в сыворотке бутылку так, чтобы не вводить воздушных пузырьков в пробе.
  5. Бутылка запечатана с резиновой пробкой и обжимается с алюминиевой крышкой, а затем хранится на льду в кулере.

Часть 3: Питательный сбор образцов

  1. 60 мл шприца промывают пробы воды, (0,2 мкм) прилагается в линию и немного воды выталкивается через Acrodisc.
  2. Полиэтиленовые бутылки промыть ~ 10 мл фильтрованной воды 3 раза (взболтайте бутылку, когда промывка).
  3. Фильтрованный пробы воды добавляется в бутылки, около ¾ полном объеме.
  4. Образец хранится на лед в холодильнике.

Часть 4: коллекции образцов Аммиак

  1. Пример трубы промываются пробы воды.
  2. Пример трубы заполняются полностью с образцом воды.
  3. 5 мл пробы воды берутся с помощью пипетки 10 мл, остальное вода в трубке отбрасывается и 5 мл в пипетки наконечник заменяются в пробирку.
  4. 7.5ml аммония рабочий раствор добавляют в каждую пробирку раз образцы из всех глубинах были собраны.

Часть 5: сбор проб для сотовых перечисления

  1. Предварительно меченных 50 мл Сокол пробирку, содержащую 5,4 мл 37% формальдегида доверху для конечной концентрации 4%. Уход берется не расплескать.

Часть 6: сбор проб для измерения водородного сульфида

  1. Предварительно меченных 50 мл Сокол трубки, содержащей 20% ацетат цинка (Zn (O 2 CCH 3) 2) заполняется до самого верха. Уход берется не расплескать.

Часть 7: Небольшая коллекция объем биомассы концентрация

  1. 1-литровые бутылки доверху.

Часть 8: Большая коллекция объем биомассы концентрация

  1. 20-литровых бутылях заполнены.

Часть 9: Представитель Результаты

Окончательные результаты отбора проб морской воды приводит к приблизительно 12 растворенные образцы кислорода, 32-48 образцов газа, 16 питательных проб, 32 пробы аммония, 16 образцов сероводорода, 16 образцов для клеток, 6 20-литровых бутылях 16, 1-литровых бутылок и 4 Sterivex 0.22μm фильтры, содержащие микробной биомассы сохранились с РНК позже.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

В целом, существует большая подготовка и планирование необходимых для этого типа выборки, поэтому бюджет за 2 дня до поездки, чтобы получить вещи в порядок и потом в один прекрасный день для очистки все вверх. В общем, не давайте соленой воде вступает в контакт с перистальтического насоса или в окне алюминия Zarges использовались для перевозки полевого оборудования. Лечить оборудования с уважением и он будет выполнять в течение длительного времени в будущем.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Мы хотели бы поблагодарить Канадский фонд инноваций, знаний британской Колумбии Фонд развития и Национального наукам и инженерным исследованиям Совета (NSERC) Канады за поддержку проводимых исследований на регионах с низким уровнем кислорода в прибрежных и открытых водах океана. Кроме того, ОУПЖ была поддержана стипендии NSERC, Киллам и ТУЛА основу финансируемого Центром микробного разнообразия и эволюции.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
20L Carboys Fisher Scientific 02-960-15
3/8" Tygon Cole-Parmer 06429-36
Sterivex filters Fisher Scientific SVG010RS
Prefilter Housing Unit AMD 501200
Luer Fitting Cole-Parmer 31507-27
1/4" Tygon tubing Cole-Parmer 06429-24
1/4" Tygon tubing Cole-Parmer 06429-24
1/4" Tygon tubing Cole-Parmer 06429-24
50ml Plastic tubes
Glass Serum Bottles Glass Sample Collection
Septa and aluminum caps for glass serum bottles
Hand Crimper
20-200ul Pipette and Tips
Glass Tubes Ammonium Sample Collection
30ml Plastic Bottles Nutrient Collection
Acrodisc Filters EMD Millipore
5 ml Tubes Nitrite Sample Collection
37% Formaldehyde Reagent For cell count samples
20% Zinc Acetate Reagent For sulfide samples
Mercuric Chloride Reagent For gas samples
milliQ water Reagent
Ammonium Working Reagent Reagent Borate buffer, sodium sulfite, orthophaladialdehyde
Sulfanilamide Reagent 5g into 450ml water and 50ml HCl
N-(1-naphthy)-ethylenediamine dihydrochloride solution Reagent 0.5g into 500ml water

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cline, J. D. Spectrophotometric determination of hydrogen sulfide in natural waters. Limnology & Oceanography. 14, 454-458 (1969).
  2. Holmes, R. M., Aminot, A., Kerouel, R., Hooker, B. A., Peterson, B. J. A simple and precise method for measuring ammonium in marine and freshwater ecosystems. Canadian Journal of fisheries and Aquatic Science. 56, 1801-1808 (1999).

Comments

1 Comment

  1. Why is the mercuric chloride added to the sample to be tested for DO? Can the Winkler method be used to determine DO on these samples?

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 25, 2009 - 7:18 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics