Preparação e Utilização de lesões Fantasma à Prática biópsias aspirativa por agulha fina

Published 9/29/2009
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Biology
 

Summary

Prática de PAAF (PAAF) por estagiários é relativamente difícil, devido à falta de uma lesão facilmente disponível, apropriado. Preparação de uma lesão phantom AV para a prática do procedimento de PAAF e proficiência masterização é relativamente fácil.

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Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

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Abstract

Atualmente, os trabalhadores de saúde, incluindo os residentes e os companheiros não têm um modelo adequado para a prática do fantasma aspirativa por agulha fina procedimento de biópsia (PAAF). No passado, padronizamos um modelo composto por luvas de látex contendo fígado bovino fresco para a prática de PAAF. No entanto, este modelo é difícil de organizar e preparar a curto prazo, com a aquisição de fígado bovino fresco sendo o aspecto mais desafiador. Manipulação de fígado com problemas de contaminação relacionados com um empate também é significativa para trás. Além disso, os vazamentos luva de material após uma agulha poucos passes, com a resultante confusão.

Nós estabelecemos um novo método simples de incorporar um pequeno pedaço de salsicha ou banana em uma calafetar comercialmente disponíveis silicone de borracha. Este modelo permite a retenção do selo de vácuo e aspiração de material da amostra de embutidos, assemelhando-se um procedimento de PAAF real sobre lesões de massa clínico.

O material aspirado no canhão da agulha pode ser processado semelhante ao das amostras obtidas durante um procedimento de PAAF real, facilitando a proficiência adicional em preparação esfregaço e coloração.

Protocol

  1. Preparação de lesão fantasma (phantom preparar cerca de 38 a 48 horas antes da sessão prática real da FNA proficiência (Figura 1) ou utilizar pronto para usar 'AV Fantasma "da FNA Fonte, EUA. A lesão fantasma (armazenadas sob refrigeração sem congelar) pode ser mantido, mesmo preparado 3-4 dias antes da prática da sessão.
  2. Praticando FNA proficiência: Embora tenhamos demonstrado o procedimento usando THFV Shidham do (Tissue Harvester com válvula Funcional) (FNA Fonte, EUA), qualquer sistema FNA podem ser utilizados outros para a prática (Figura 2).
  3. Divulgação e processamento do aspirado em lâmina de vidro (Figura 3).

Material necessário

  1. Claro silicone para calafetar disponível em muitas lojas de construção / home melhoria. Muitas marcas estão disponíveis, incluindo DAP GETM, Red Devil, White Lightning, e as marcas da cadeia local. Usamos borracha de silicone transparente, Produtos White Lightning, Cleveland, Ohio, EUA, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Pistola de calafetagem
  3. Um pedaço de folha de plástico (usamos Saran Cling Além disso Wrap, SC Johnson & Son Inc, Racine, WI, EUA http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. Luvas de látex
  5. Bananeira diâmetro largo ou salsicha.
  6. Firme e liso placa de base (cerca de 6 polegadas X 6 polegadas) feitas de tábua de cartão de espessura, placa de acrílico, ou outros.
  7. FNA realizando equipamentos
    • 25 agulhas hipodérmicas
    • THFV Shidham (ou outros componentes para a realização de FNA)
    • lâminas de vidro
    • kits de coloração

Passo-a-passo os detalhes

A. Preparação de lesão fantasma (phantom preparar 1-2 dias antes de praticar FNA proficiência (Figura 2) ou utilizar pronto para usar 'AV Fantasma "da FNA Fonte, EUA.

  1. Cortar uma 6 X 6 polegadas de tamanho apoio bordo.
  2. Corte um segmento de 2,5 polegada de comprimento de 'core lesão fantasma' (banana ou salsicha).
  3. Expulsar 0,5 polegada de espessura da camada de calafetar na placa de base.
  4. Pressione o 'fantasma lesão core' levemente para esta camada de calafetar.
  5. Adicione mais caulk sobre o "núcleo lesão fantasma 'de modo que é totalmente incorporado no monte de calafetar, sem bolhas de interceptação.
  6. Ajustar e moldar a calafetação mais "núcleo lesão fantasma 'com a mão enluvada.
  7. Dê uma 6 X 6 polegadas de tamanho pedaço filme plástico e cobrir o monte de calafetar e ajustar a superfície do monte em uma configuração convexa lisa com uma mão, limpa enluvadas.
  8. Deixe a cura monte calafetar por 6-8 horas a mais do que o tempo de cura mencionados sob as instruções do produto, (geralmente 24 horas), em local aquecido.
  9. Após a cura, a calafetação deve ser firme, eo filme plástico pode ser retirada facilmente.
  10. A FNA lesão fantasma está pronto para ser usado para praticar o procedimento FNA após cerca de 8 horas, quando o monte inteiro de calafetar estar completamente curado do centro contendo o "núcleo lesão fantasma '(banana ou salsicha).

B. Praticar FNA proficiência na AV lesão Phantom.

Qualquer abordagem na obtenção de alta qualidade, aspirados adequados FNA com boa qualidade esfregaços citológicos direta devem seguinte endereço pontos críticos de-

  1. O medidor de-agulha como implícita no título do procedimento, as agulhas mais finas (número maior calibre) aspirados rendimento melhor com diluição do sangue mínima. Para balanço crítico dos benefícios e limitações, 22-25 agulhas são preferidos para ótima estabilidade mecânica da agulha sem afetar a qualidade aspirar FNA.
  2. Controlar sequências apropriadas na aplicação de vácuo e solte durante a FNA procedimento Isso é fundamental para avançar as células da amostra em cada curso da agulha, em direção ao centro da agulha. No entanto, o material aspirado não deve ser permitido chegar até a área do conjunto de punção aspirativa por agulha com seringa. Se isso não for evitado, o material pode ser difícil de recuperar para a tomada de esfregaços (este material pode, no entanto, ser usado para a preparação de blocos de células ou de métodos de concentração, como Cytospin, métodos de filtro, ou recentes líquido preparações de citologia based).
  3. Desenvolver habilidade apropriada no processamento do espécime aspirado, incluindo a preparação do exame direto e on-site de avaliação de adequação, com triagem adequada para exames complementares, tais como células-bloco preparação para imunocitoquímica eletivo, citometria de fluxo eletivo para imunofenotipagem de lesões linfoproliferativas, submetendo passes estéreis para microbiologia estudos, mate erial para testes molecular (citogenética, etc.)

Ba Performing FNA procedimento (mostrado com THFV Shidham [1] (FNA Fonte, EUA), no entanto, qualquer sistema FNA podem ser utilizados outros para a prática). (Figura 3,4,5).

  1. Prepare a montagem FNA com a válvula fechada.
  2. Localizar a lesão e inserir a ponta da agulha na lesão.
  3. Abrir a válvula para ligar o vácuo, através da agulha até a sua ponta, para aspirar representante componentes celulares da lesão em cada lado para o outro curso na lesão.
  4. Manter as áreas de vácuo e amostras diferentes da lesão através da inserção da agulha na lesão em diferentes direções.
  5. Fechar a válvula para desligar o vácuo no lúmen da agulha.
  6. Equalizar a pressão com condições ambientais (por exemplo, desligar o Seringa válvula da agulha por um breve momento e reconectar. Se o dispositivo especial com passos inbuilt, como 'THFV' é usado, este e outros passos de Ba1 através BA6 estão concertados automaticamente seguindo diferentes etapas do sistema de válvulas) [1].
  7. Retire a agulha da lesão com a válvula fechada, a fim de evitar a perda da amostra por ação capilar na lesão a menos que haja pressão ligeiramente negativa no final hub.
  8. Desalojar o conteúdo aspirado para a lâmina de vidro para preparar esfregaço direto (veja abaixo) (figura 6).

Bb Processing. Da amostra aspirado com triagem adequada
Espalhando a aspirar a lâminas de vidro e preparar esfregaço de boa qualidade direto (Figura 6), seguido de coloração adequada e triagem (Figura 7,8).

  1. Uma gota de aspirado de desalojados na lâmina de vidro é transmitida por uma variedade de abordagens, como mostrado na (Figura 6) [2]. A abordagem usual é 'a'. No entanto, se a amostra é sangue diluído com alguns microfragmentos, o excesso de sangue é drenada inclinando a lâmina, ea microfragmentos então estão espalhados entre este slide e lâmina de vidro segundo semelhante a 'a'. Se a aspiração é predominantemente uma suspensão sem microfragmentos, como de lesões linfoproliferativas, é semelhante a se espalhar 'b' ou 'c'.
  2. As manchas podem ser processados ​​e fixo em uma variedade de maneiras para diferentes métodos de coloração no local durante a avaliação da adequação. No entanto, a melhor abordagem é secar todos os esfregaços. Os esfregaços secos ao ar pode ser manchado com manchas Romanowski (como Difff-Quik mancha, mancha Wright) após a fixação com metanol ou Pap mancha após a reidratação-salina e pós-fixação (em etanol 95% ou, de preferência em etanol 95% com 5 % de ácido acético) [3]. Eliminação da interferência devido ao sangue obscurecendo é um benefício significativo [3].
  3. Dependendo dos resultados iniciais cytomorphologic no local durante a avaliação da adequação, triagem adicionais (como bloco de celas eletivo, microscopia eletrônica, as culturas de microbiologia, citometria de fluxo, citogenética molecular-testes, etc) é recomendada, como indicado.

Resultados representativos:

figura 1
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 1 .
Figura 1. Material necessário para a preparação AV Fantasma para a prática de FNA proficiência (* Usamos Saran plástico que não aderir ao calafetar no final, durante a remoção após a cura completa da calafetar.)


figura 2
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 2.
Figura 2. Preparando AV lesão Fantasma


figura 3
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 3.
Figura 3. Etapas críticas no processo de FNA.


figura 4
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 4.
Figura 4. EUS-FNA Resumo dos passos críticos * (ver Fig. 3)


figura 5
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 5.
Figura 5. Armadilhas relacionadas com as etapas críticas na FNA procedure.


figura 6
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 6.
Figura 6. Preparação de esfregaços diretos de FNA espécime entre dois slides.


figura 7
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 7.
Figura 7. Wet manchas fixo versus Air-dried.


figura 8
Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 8.
Figura 8. Wet manchas fixo versus Air-dried.

Discussion

Biópsias com agulha fina de aspiração (PAAF) são amplamente realizada como econômica, técnica segura, rápida e minimamente invasiva para o diagnóstico de tecido de tumores e lesões diversas. Neste procedimento uma agulha de calibre 18-27 é inserido na lesão, mudou-se frente e para trás várias vezes em diferentes áreas da lesão, sob vácuo, controlada (sucção) de intensidade variável que variam de um mínimo sob a forma de ação capilar apenas a cerca de 10 ml vácuo na seringa para obter material de tecido de diagnóstico. A agulha de calibre fino com maior número é o preferido para recuperar material de citologia boa para preparar esfregaços diretos. Agulha de maior calibre de 18G recupera mais amostra adequada para o bloco de células, citometria de fluxo, microscopia eletrônica, citogenética, etc microbiologia culturas Embora o procedimento é simples, controlando várias etapas com a aplicação adequada e liberação de vácuo a medidas apropriadas de maneira concertada é extremamente crucial para os melhores resultados.

Devido à não disponibilidade de especialmente concebidos alto rendimento agulhas, agulhas hipodérmicas convencional ou suas modificações são usados ​​para executar este procedimento. No entanto, as agulhas hipodérmicas têm muitas limitações levando a um baixo rendimento da amostra se for utilizado de maneira convencional. A exigência de apertos seringa especial geralmente aumenta a complexidade do procedimento. Assim, devido à falta de dispositivo adequado disponível comercialmente agulha PAAF, este procedimento altamente versátil sofre um problema freqüente de recuperação de espécime inadequada. Recentemente, um dispositivo de aumentar o rendimento com reprodutibilidade tem sido relatada [1].

Além disso, atualmente há uma falta de modelo adequado para a prática de proficiência na realização de PAAF por pessoal de saúde em formação, incluindo residentes e especializandos. Nós tínhamos um modelo padronizado com um pedaço de fígado bovino fresco recheado de luvas de látex para a prática de PAAF de proficiência. No entanto, este modelo é difícil organizar em um curto espaço de tempo. Aquisição de fígado bovino fresco é geralmente a situação limitante. Além disso, a manipulação do fígado pode introduzir contaminação fatores relacionados com um empate importante para trás. A tendência para a luva de látex para depois de um vazamento de picadas de agulha poucos leva à confusão potencial durante a sessão prática.

Relatamos e descrever um romance, mas simples método de incorporação de um pequeno pedaço de banana (ou salsicha) em um calafetar comercialmente disponíveis de borracha de silicone e materiais facilmente disponíveis outras. O fantasma PAAF mantém selo de vácuo permitindo assim a aspiração de material da amostra de embutidos, equivalente ao procedimento PAAF real sobre uma lesão no ambiente clínico. Neste vídeo, demonstramos o procedimento de fazer PAAF lesão fantasma e praticar procedimento PAAF. Ele também demonstra no processamento do espécime breve recuperada, incluindo a preparação esfregaço e coloração [2,3].

Porque a calafetação leva tempo para curar a lesão fantasma deve ser preparado com antecedência de cerca de 24 a 48 horas antes da sessão de prática. Comparáveis ​​pronto para usar lesão fantasma pode ser obtido a partir de uma fonte comercial (FNA Fonte, EUA).

A lesão fantasma para a prática de PAAF de proficiência podem ser usados ​​para a formação de moradores e companheiros antes do início do desempenho PAAF em pacientes na clínica.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7, (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Comments

5 Comments

  1. thank you for this outstanding presentation, it is very simple and comprehensive,

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 26, 2009 - 2:13 PM
  2. Thank you the comments.
    We are glad you liked the presentation and found it useful. (Rply by the Authors Shidham & Varsegi).

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    October 27, 2009 - 1:49 PM
  3. This is great! I look forward to trying it with my students!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2011 - 8:41 PM
  4. For more information visit this website http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19893483

    Reply
    Posted by: seth g.
    January 14, 2015 - 5:04 AM


  5. Prototyping and mounting medical devices is very critical and competitive too. Most innovation recently occurs from smaller niche companies. Prototyping has come a long way since traditionally they were just for observation and then function, but now with the innovation of 3D printing process there is no requirement of further assembly. As you can read at http://www.gurufocus.com/news/295253/hologic-produces-the-first-fdaapproved-3d-mammography-platform Hologic was the first company which introduced 3D mammography system to overcome the flaws of traditional mammogram and increase the detection rate of breast cancer. 3D printing technique has brought great capabilities to customize wide variety of applications in the medical field.

    Reply
    Posted by: Brock E.
    May 4, 2015 - 7:34 AM

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