Upprättande och använda Phantom Lesioner till praktik Fine Biopsier needle aspiration

Published 9/29/2009
5 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology
 

Summary

Öva av fina biopsier nål aspiration (FNAB) av praktikanter är relativt utmanande, på grund av bristen på en lättillgänglig, lämpliga lesion. Beredning av en AV-fantom lesion för att öva FNAB förfarandet och mastering kompetens är relativt lätt.

Cite this Article

Copy Citation

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

Please note that all translations are automatically generated through Google Translate.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

För närvarande har vårdpersonal, inklusive boende och kamrater inte är ett lämpligt fantom modell att öva fin nål aspiration biopsi (FNAB) förfarande. I det förflutna, vi standardiserat en modell som består av latex handske med färskt nöt levern för att öva FNAB. Dock är denna modell svårt att organisera och förbereda med kort varsel, med upphandling av färsk boskap levern är den mest utmanande aspekten. Hantering av levern med förorening problem är också en viktig dra tillbaka. Dessutom passerar handskmaterialet läcker efter ett par nål, med åtföljande röra.

Vi har etablerat en ny enkel metod att bädda in en liten bit korv eller banan i ett kommersiellt tillgängligt silikongummi täta. Denna modell tillåter lagring av vakuum sigill och aspiration av material från de inbäddade exemplaret, som liknar en verklig FNAB förfarande på kliniska massa skador.

Det aspirerade materialet i nålen navet kan bearbetas liknande exemplar upphandlade under en verklig FNAB förfarande underlättar ytterligare färdighet i att smeta beredning och färgning.

Protocol

  1. Beredning av fantom lesion (förbereda fantom ca 38 till 48 timmar innan själva öva session FNA språkfärdighet (Figur 1) eller använda färdiga att använda "AV Phantom" från FNA Källa, USA. The Phantom lesionen (förvaras i kylskåp utan att frysa) kan hållas beredd med 3 till 4 dagar före övning.
  2. Öva FNA språkfärdighet: Trots att vi har visat proceduren med Shidham är THFV (Tissue skördare med Functional Valve) (FNA Källa, USA), kan något annat FNA systemet användas för att öva (figur 2).
  3. Sprida och bearbeta aspirera på glaset bilderna (Figur 3).

Material som behövs

  1. Klart silikongummi täta-finns på många bygg / byggvaruhus. Många varumärken finns tillgängliga, inklusive GETM, DAP, Red Devil, White Lightning, och lokala varumärken kedja. Vi använde Klart silikongummi, White Lightning Products, Cleveland, Ohio, USA, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Fogtätning pistol
  3. En bit plastfolie ark (vi använde Saran Hushållsfolie Plus Wrap, SC Johnson & Son Inc, Racine, WI, USA http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. Latexhandskar
  5. Stor diameter banan eller korv.
  6. Fast och platt bottenplatta (ca 6 inches x 6 inches) gjord av tjock kartong, akryl tallrik, eller andra.
  7. FNA utför utrustning
    • 25 gauge injektionssprutor
    • Shidham är THFV (eller andra komponenter för att utföra FNA)
    • glasskivor
    • färgning kit

Steg-för-steg-information

A. Beredning av fantom lesion (förbereda fantom 1 till 2 dagar innan öva FNA språkfärdighet (Figur 2) eller använda färdiga att använda "AV Phantom" från FNA Källa, USA.

  1. Skär en 6 x 6 tum storlek stödja styrelsen.
  2. Skär en 2,5 tum lång del av "fantom lesion kärna" (banan eller korv).
  3. Utvisa 0,5 cm tjockt lager av täta på bottenplattan.
  4. Tryck på "fantom lesionen kärna" lätt i detta skikt av täta.
  5. Lägg till fler täta över "fantom lesionen kärna" så att den är helt inbäddad i högen av täta, utan att droppa luftbubblor.
  6. Justera och forma täta över "fantom lesion kärna" med handskar på handen.
  7. Ta en 6 x 6 tum stor bit plastfolie och täcka täta högen och justera ytan av högen till en jämn konvex konfiguration med en ren, handskar hand.
  8. Låt täta högen botemedel mot 6-8 timmar längre än bota tid som nämns i produktens instruktioner, (vanligtvis 24 timmar), på varm plats.
  9. Efter härdning bör täta vara fast, och plastfolie kan skäras bort lätt.
  10. Det FNA phantom lesionen är redo att användas för att utöva FNA förfarande efter ca 8 timmar när hela högen av täta helt har härdat till mitten innehåller "fantom lesionen kärna" (banan eller korv).

B. Öva FNA färdighet på AV Phantom lesion.

Varje strategi för att få hög kvalitet, bör lämpliga FNA aspirat med god kvalitet direkt cytologi utstryk adress följande kritiska punkter-

  1. Nålen gauge-som antyds i titeln på det förfarande, finare nålar (högre gauge nummer) ger bättre aspirat med minimal blod utspädning. För kritiska balansen mellan fördelar och begränsningar, är 22 till 25 gauge nålar föredra för optimal mekanisk stabilitet av nålen utan att påverka FNA aspirera kvalitet.
  2. Styra lämpliga sekvenser i vakuum ansökan och släpp under FNA förfarande-Det här är avgörande för att komma vidare i urvalet cellerna med varje slag av nålen, mot nålen nav. Bör dock aspirerade materialet inte tillåtas att komma in i området av needle aspiration montering med spruta. Om detta inte är förhindrad, skall materialet vara svårt att hämta för att göra utstryk (detta material kan dock användas för Cell Block förberedelser eller för koncentration metoder som Cytospin, filter metoder eller senare flytande preparat cytologi).
  3. Utveckla lämpliga färdigheter i bearbetning av aspirerade exemplar, inklusive direkt smeta förberedelser och på plats adekvat utvärdering med lämpliga triaging för kompletterande tester såsom cell-block inför elektiv immuncytokemi, elektiva flödescytometri för immunfenotypning för lymfoproliferativ lesioner, skicka sterila passerar för mikrobiologi studier, och mateterial för molekylära tester (cytogenetik, etc.).

Ba Utföra FNA förfarande (visas med Shidham är THFV [1] (FNA Källa, USA), men kan någon annan FNA system användas för att öva). (Figur 3,4,5).

  1. Förbered FNA församling med ventilen stängd.
  2. Leta reda på lesionen och stick in nålen spets i lesionen.
  3. Öppna ventilen för att ansluta vakuum, genom nålen till dess spets, att aspirera representant cellulära komponenterna i lesionen med varandra fram och tillbaka stroke in i lesionen.
  4. Bibehålla vakuum och prova olika delar av skada genom att sätta nålen in i lesionen i olika riktningar.
  5. Stäng ventilen för att koppla bort vakuum i nålen lumen.
  6. Utjämna trycket med omgivande tillstånd (t ex genom att koppla sprutan-ventilen från nålen för en kort stund och koppla. Om den särskilda utrustningen med inbyggd steg, såsom "THFV" används, denna och andra åtgärder från Ba1 genom Ba6 är samordnade automatiskt genom att följa olika steg i ventilen systemet) [1].
  7. Ta bort nålen ur öppningen med stängd ventil, för att undvika förlust av prov genom kapillärkraften in i lesionen om det inte är något undertryck i navet slutet.
  8. Lösgöra aspirerade innehåll på glaset bilden för att förbereda direkt smeta (se nedan) (bild 6).

BB. Bearbetning av aspirerade provet med lämpliga triage
Sprida aspirera på glaset bilderna och förbereda god kvalitet direkt utstryk (Figur 6) följt av ordentlig färgning och triage (Figur 7,8).

  1. En droppe aspirera rubbas på glaset bilden sprids av olika metoder som visas i (Figur 6) [2]. Det vanliga tillvägagångssättet är "a". Om provet är blod späds med några microfragments, är den överskjutande blodet dräneras bort genom att luta bilden, och microfragments sedan sprids mellan denna bild och andra glasskiva liknar "a". Om aspirera är främst en avstängning utan microfragments, t.ex. från lymfoproliferativa lesioner är det sprids liknar "B" eller "C".
  2. Den kladdar får behandlas och fastställas i olika sätt för olika färgning metoder under på plats tillräcklighet utvärdering. Dock är det bästa sättet att lufttorka alla utstryk. Den lufttorkade utstryk kan färgas med Romanowski fläckar (såsom Difff-Quik fläcken, Wright fläck) efter metanol fixering eller med Pap fläck efter salt-rehydrering och efter fixering (i 95% etanol eller helst i 95% etanol med 5 % ättiksyra) [3]. Eliminering av störningar på grund av skymmande blod är en betydande fördel [3].
  3. Beroende på de första cytomorphologic fynd under på plats tillräcklighet utvärdering, är ytterligare triage (t.ex. valbar cell block, elektronmikroskopi, mikrobiologi kulturer, flödescytometri, molekylär test-cytogenetik etc.) rekommenderas som anges.

Representativa resultat:

Figur 1
Klicka här för att se en större version av figur 1 .
Figur 1. Material som behövs för att förbereda AV-Phantom för att öva FNA språkfärdighet (* Vi använder Saran plastfolie som inte fastnar på täta i slutet, när du tar bort efter fullständig härdning av täta.)


Figur 2
Klicka här för att se en större version av figur 2.
Figur 2. Förberedelser AV Phantom lesion


Figur 3
Klicka här för att se en större version av figur 3.
Figur 3. Kritiska steg i FNA förfarande.


Figur 4
Klicka här för att se en större version av figur 4.
Figur 4. EUS-FNA-Sammanfattning av kritiska moment * (se figur 3)


Figur 5
Klicka här för att se en större version av figur 5.
Figur 5. Fallgropar relaterade till de kritiska stegen i FNA procedure.


Figur 6
Klicka här för att se en större version av figur 6.
Figur 6. Förberedelse av direkt utstryk av FNA exemplar mellan två bilder.


Figur 7
Klicka här för att se en större version av figur 7.
Figur 7. Wet fast kontra Lufttorkad utstryk.


Siffran 8
Klicka här för att se en större version av figur 8.
Figur 8. Wet fast kontra Lufttorkad utstryk.

Discussion

Fine-needle aspiration biopsier (FNAB) i stor utsträckning utförs som ett ekonomiskt, säkert och snabb minimalinvasiv teknik för vävnad diagnos av olika tumörer och skador. I detta förfarande, 18 till 27 gauge nål sätts in i lesionen, flyttade fram och tillbaka flera gånger i olika delar av den skada under kontrollerade vakuum (sug) av varierande intensitet alltifrån minimal i form av endast kapillärkraften till ca 10 ml vakuum i sprutan för att hämta diagnostiska vävnadsmaterial. En finare nål med högre nummer är att föredra för att hämta goda cytologi material för att förbereda direkt utstryk. Bredare nål på 18G hämtar fler prov lämpar sig för cell block, flödescytometri, elektronmikroskopi, cytogenetik, mikrobiologi kulturer etc. Även om förfarandet är enkelt, styra olika stegen med rätt tillämpning och frisättning av vakuum vid lämpliga åtgärder samordnat sätt är oerhört viktigt för optimalt resultat.

På grund av bristande tillgång på särskilt utformade med hög avkastning nålar, konventionella injektionssprutor eller modifikationer används för att utföra den här proceduren. Men injektionssprutor har många begränsningar som leder till en låg avkastning av prov om den används på konventionellt sätt. Kravet på särskild spruta grepp lägger oftast till komplexiteten i förfarandet. Således, på grund av avsaknaden av kommersiellt tillgängliga lämplig FNAB nål enhet, lider denna mångsidiga förfarande ett vanligt problem med otillräcklig exemplar hämtning. Nyligen har en enhet att öka avkastningen med reproducerbarhet har rapporterats [1].

Dessutom närvarande finns en brist på lämplig modell för att öva färdigheter i att utföra FNAB av vårdpersonal i utbildning, inklusive boende och medmänniskor. Vi hade standardiserad en modell med en bit färsk boskap lever stoppade i latex handske för att öva FNAB färdighet. Dock är denna modell svårt att organisera på ett kort varsel. Upphandling av färskt nöt levern är oftast den begränsande predikament. Dessutom kan hantering av lever införa förorening-relaterade faktorer som en betydande dra tillbaka. Tendensen för latex handske att läcka efter några nål sticker leder till potentiella oreda under övning.

Vi rapport och beskriva en ny men enkel metod att bädda in en liten bit av banan (eller korv) i en kommersiellt tillgänglig silikongummi täta och annat lätt tillgängligt material. Den FNAB fantom behåller vakuum sigill vilket tillåter aspiration av material från de inbäddade provet, motsvarande den faktiska FNAB proceduren på en lesion i klinisk miljö. I denna video visar vi rutin när man gör FNAB fantom lesion och öva FNAB förfarande. Det visar också i korthet behandlar hämtas exemplar inklusive smear beredning och färgning [2,3].

Eftersom täta tar tid att bota bör fantom lesionen beredas i förväg om 24 till 48 timmar före öva session. Jämförbara redo att använda fantom lesionen kan erhållas från en kommersiell källa (FNA Source, USA).

The Phantom lesion för att öva FNAB kunskaper kan användas för utbildning de boende och stipendiaterna före början av FNAB resultat på patienter i den kliniska miljö.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7, (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Comments

5 Comments

  1. thank you for this outstanding presentation, it is very simple and comprehensive,

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 26, 2009 - 2:13 PM
  2. Thank you the comments.
    We are glad you liked the presentation and found it useful. (Rply by the Authors Shidham & Varsegi).

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    October 27, 2009 - 1:49 PM
  3. This is great! I look forward to trying it with my students!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2011 - 8:41 PM
  4. For more information visit this website http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19893483

    Reply
    Posted by: seth g.
    January 14, 2015 - 5:04 AM


  5. Prototyping and mounting medical devices is very critical and competitive too. Most innovation recently occurs from smaller niche companies. Prototyping has come a long way since traditionally they were just for observation and then function, but now with the innovation of 3D printing process there is no requirement of further assembly. As you can read at http://www.gurufocus.com/news/295253/hologic-produces-the-first-fdaapproved-3d-mammography-platform Hologic was the first company which introduced 3D mammography system to overcome the flaws of traditional mammogram and increase the detection rate of breast cancer. 3D printing technique has brought great capabilities to customize wide variety of applications in the medical field.

    Reply
    Posted by: Brock E.
    May 4, 2015 - 7:34 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Video Stats