झील ट्राउट के लिए पीसीबी congeners का शुद्ध पोषण से स्थानांतरण क्षमता की प्रयोगशाला आकलन (

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Summary

अपने शिकार से मत्स्यभक्षी मछली को पॉलीक्लोरीनेटेड biphenyl (पीसीबी) congeners का शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता की प्रयोगशाला के आकलन के लिए एक तकनीक प्रस्तुत किया है. क्षेत्र के लिए प्रयोगशाला परिणामों की प्रयोज्यता बढ़ाने के लिए, मत्स्यभक्षी मछली आम तौर पर क्षेत्र में खाया जाता है कि शिकार मछली खिलाया जाना चाहिए.

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Madenjian, C. P., Rediske, R. R., O'Keefe, J. P., David, S. R. Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey. J. Vis. Exp. (90), e51496, doi:10.3791/51496 (2014).

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Abstract

अपने शिकार से मत्स्यभक्षी मछली को पॉलीक्लोरीनेटेड biphenyl (पीसीबी) congeners का शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता (γ) की प्रयोगशाला के आकलन के लिए एक तकनीक के साथ साथ वर्णित है. एक 135 दिन की प्रयोगशाला प्रयोग के दौरान, हम आठ प्रयोगशाला टैंक में रखा bloater झील ट्राउट (Salvelinus namaycush) को लेक मिशिगन में पकड़ा गया था कि (Coregonus hoyi) खिलाया. Bloater झील ट्राउट के लिए एक प्राकृतिक शिकार है. टैंकों की चार में, एक अपेक्षाकृत उच्च प्रवाह की दर एक कम प्रवाह की दर अन्य चार टैंकों में इस्तेमाल किया गया था, जबकि कम झील ट्राउट गतिविधि की अनुमति के लिए, लेक ट्राउट द्वारा अपेक्षाकृत उच्च गतिविधि सुनिश्चित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. एक टैंक से टैंक आधार पर प्रयोग के प्रत्येक दिन पर झील ट्राउट द्वारा खाया भोजन की मात्रा दर्ज की गई थी. प्रत्येक झील ट्राउट प्रयोग के शुरू और अंत में तौला गया. आठ टैंकों में से प्रत्येक से चार से नौ झील ट्राउट प्रयोग के शुरू में बलिदान, और टैंकों में से प्रत्येक में शेष सभी 10 लेक ट्राउट euthan थेप्रयोग के अंत में ized. हम प्रयोग के अंत में झील ट्राउट में, प्रयोग के शुरू में झील ट्राउट में 75 पीसीबी congeners की सांद्रता निर्धारित, और bloaters में प्रयोग के दौरान झील ट्राउट को खिलाया. इन मापों के आधार पर, γ आठ टैंकों में से प्रत्येक में 75 पीसीबी congeners से प्रत्येक के लिए गणना की गई. Γ सक्रिय और निष्क्रिय दोनों झील ट्राउट के लिए 75 पीसीबी congeners से प्रत्येक के लिए गणना की गई मतलब है. प्रयोग आठ टैंकों में दोहराया गया था, के बारे में मानक त्रुटि γ अनुमान लगाया जा सकता है मतलब है. प्रयोग के इस प्रकार के परिणाम से पर्यावरण प्रदूषण के विभिन्न परिदृश्यों के तहत दूषित मछली खाने मानव और वन्य जीवन के लिए भविष्य जोखिम की भविष्यवाणी करने के लिए जोखिम मूल्यांकन मॉडल में उपयोगी होते हैं.

Protocol

1 प्रयोगशाला प्रयोग

  1. शिकार मछली प्राप्त प्रयोग के दौरान शिकारी मछली को खिलाया जाए. अधिमानतः इन शिकार मछली क्षेत्र, स्थिर में कब्जा, और के बारे में -30 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहित किया जाना चाहिए. शिकार मछली के लिए एक संभावित स्रोत के रूप में वाणिज्यिक मछली पकड़ने के संचालन पर विचार करें.
  2. प्रयोगशाला टैंक में शिकारी मछली परिचय प्रयोग के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. 15 शिकारी मछली अप करने के लिए 870 एल टैंक में से प्रत्येक में पेश किया गया है, और 30 शिकारी मछली अप करने के लिए पिछले अध्ययनों 16,18 में 2,380 एल टैंकों में से प्रत्येक में पेश किया गया है.
  3. चयनित शिकार मछली के आहार के लिए शिकारी मछली acclimate. आदत एक बार शिकारी मछली प्रयोग शुरू होने से पहले 1-3 महीनों के लिए इस आहार पर रहना चाहिए.
  4. बेतरतीब ढंग से शिकार मछली के बैच से 10 से 20 समग्र नमूने चुनकर शिकार मछली के नमूने अलग निर्धारित करें. एक समग्र नमूना में शिकार मछली की संख्या शिकार के आकार पर निर्भर करता है, 3-100 लेकर सकतामछली. प्रत्येक मिश्रित नमूना जमे हुए, जीता, और के बारे में -30 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत डबल होना चाहिए.
  5. टैंकों में से प्रत्येक में मछली के 30 से 50% का त्याग करके प्रयोग आरंभ करें.
    1. , मछली euthanize एक बड़े प्लास्टिक कंटेनर में पानी की 45 एल के साथ Finquel की 8 ग्राम मिश्रण और फिर Finquel समाधान के साथ कंटेनर में मछली जगह है.
    2. एक बार euthanized, प्रसंस्करण के समय तक के बारे में -30 डिग्री सेल्सियस पर एक बैग, फिर डबल बैग, और दुकान में एक टैंक से बलिदान मछली के सभी जगह है.
    3. टैंकों में से प्रत्येक में शेष मछली में से प्रत्येक का वजन, और वजन रिकॉर्ड; एक संवेदनाहारी संभावना वजन का संचालन करने की जरूरत होगी.
    4. , मछली anesthetize एक बड़े प्लास्टिक कंटेनर में पानी की 45 एल के साथ Finquel की 4.6 ग्राम मिश्रण, और फिर Finquel समाधान के साथ कंटेनर में मछली जगह है.
    5. मछली वजन से पहले प्रभावी करने के लिए संवेदनाहारी के लिए कुछ मिनट तक प्रतीक्षा करें.
  6. प्रयोग के प्रत्येक दिन पर, एक पिघलनाउचित शिकार मछली की राशि, और लगभग 1 ग्राम से 5 वजन टुकड़ों में शिकार मछली काटा. तो, टैंकों में से प्रत्येक में रखा जाना शिकार मछली की मात्रा वजन प्रत्येक टैंक में शिकार मछली टुकड़े ड्रॉप और के बारे में 1 घंटा खिलाने के लिए शिकारी मछली अनुमति देते हैं. फिर, सभी uneaten खाना हटाने के बारे में 20 मिनट के लिए शुष्क हवा के लिए भोजन की अनुमति है, और फिर टैंकों में से प्रत्येक के लिए uneaten खाना तौलना. टैंक में रखा भोजन की मात्रा और प्रत्येक दिन टैंकों में से प्रत्येक के लिए uneaten भोजन की मात्रा रिकॉर्ड.
    नोट: वे एक खिला अवधि में प्रत्येक दिन 18 के दौरान भस्म हो जाएगा के रूप में प्रतिनिधि प्रयोग के लिए, लेक ट्राउट ज्यादा भोजन के रूप में खिलाया गया. हालांकि, शिकारी मछली भी तय राशन 16,19 पर रखा जा सकता है.
  7. टैंकों में से प्रत्येक में शेष शिकारी मछली की सभी त्याग के द्वारा प्रयोग बर्खास्त. , मछली euthanize एक बड़े प्लास्टिक कंटेनर में पानी की 45 एल के साथ Finquel की 8 ग्राम मिश्रण और फिर Finquel समाधान के साथ कंटेनर में मछली जगह है. रिकॉर्ड टीबलिदान मछली में से प्रत्येक की वह वजन. विश्वसनीय परिणामों के लिए, प्रयोग कम से कम 130 दिनों के लिए अधिमानतः, कम से कम 100 दिनों के लिए चलाना आवश्यक है. प्रसंस्करण के समय तक के बारे में -30 डिग्री सेल्सियस पर एक बैग, फिर डबल बैग, और दुकान में एक टैंक से मछली के सभी रखें.

2 मछली Homogenization

  1. शिकारी मछली और / या विगलन के लिए शिकार मछली कंपोजिट का एक सेट का चयन करें. कंपोजिट आंशिक रूप से पिघलना करने की अनुमति दें. प्रत्येक समग्र homogenize 0.5 घंटा 1 करना पड़ सकता है.
  2. उपयुक्त आकार blenders का प्रयोग, कंपोजिट में से प्रत्येक homogenize. प्रत्येक समग्र के लिए, एक, साफ एसीटोन-rinsed, और लेबल जार में homogenate के (50 ग्राम 100 तक) एक नमूना जगह है. फिर जार टोपी और प्रसंस्करण के समय तक के बारे में -30 डिग्री सेल्सियस पर जार की दुकान.
  3. मछली homogenize करने के लिए इस्तेमाल सभी उपकरणों को धो लें, और फिर ठीक से नमूनों के बीच आसुत जल और मेथनॉल, साथ कुल्ला.

3 निकालना

  1. 20.0 ग्राम वजनकी एक 200 मिलीलीटर बीकर में homogenized मछली ऊतक thawed.
  2. सोडियम सल्फेट का लगभग 40 ग्राम जोड़ें और रंग के साथ अच्छी तरह से मिश्रण.
  3. निकालने में 20 एनजी / एमएल के एक अंतिम एकाग्रता कि पैदावार एक एकाग्रता में congeners 30, 61, 161, और 166. स्पाइक युक्त किराए की कील समाधान जोड़ें.
  4. हर 20 मिनट जबकि मिश्रण नमूना आरटी पर सूखे की अनुमति दें.
  5. नमूना नमूना निकासी के लिए तैयार है, जो बिंदु पर सूखी रेत की स्थिरता, तक पहुँचने के लिए अनुमति देते हैं.
  6. Teflon फोड़ा चिप्स, Soxhlet, और कंडेनसर युक्त 500 मिलीलीटर कुप्पी साथ Soxhlet निकासी तंत्र की स्थापना की.
  7. एक मोटे fritted डिस्क नीचे या कागज नोक के साथ एक गिलास नोक के लिए सूखी मछली मिश्रण जोड़ें.
  8. नमूने के लिए इस्तेमाल किया बीकर को 50% हेक्सेन और 50% dichloromethane के 150 मिलीलीटर जोड़ें और एक रंग के साथ बीकर की दीवारों scraping जबकि हलचल.
  9. Soxhlet के माध्यम से और में चक्र से जुड़ी कुप्पी साथ Soxhlet के ऊपर से विलायक स्थानांतरण और यह अनुमतिफ्लास्क.
  10. फिर 150 मिलीलीटर के साथ दूसरी बार दोहराएँ.
  11. हीटिंग तत्व पर संलग्न कुप्पी साथ Soxhlet प्लेस और कंडेनसर देते हैं.
  12. हीटिंग तत्व पर मुड़ें और एक सौम्य उबाल विलायक लाने, तो 16 घंटे ठंडे पानी condensers लिए आपूर्ति की है यह सुनिश्चित करने के लिए एक न्यूनतम के लिए निकाल सकते हैं.
  13. विलायक शांत करने के लिए अनुमति के बाद, नमूना बोतल के किसी भी पानी रोकने देखने की जांच. पानी युक्त उन बोतल के लिए, सोडियम सल्फेट जोड़ने और पानी सोडियम सल्फेट द्वारा अवशोषित हो जाती है जब तक ज़ुल्फ़.
  14. एक नाइट्रोजन नमूना concentrator या एक गर्म पानी से स्नान के साथ एक Kaderna डैनिश (केडी) कांच के बने पदार्थ स्थापना का उपयोग नमूना ध्यान लगाओ.
  15. नमूना कम से कम 2 मिलीलीटर की एक मात्रा के लिए लुप्त हो जाना, और उसके बाद एक 5 मिलीलीटर बड़ा फ्लास्क के लिए इस्तेमाल किया कांच के बने पदार्थ से नमूना हस्तांतरण करने के लिए हेक्सेन के छोटे धोने का उपयोग करके 5 मिलीलीटर की एक अंतिम मात्रा को लाने के लिए अनुमति.
  16. एक 10 मिलीलीटर शीशी पर स्थानांतरण और नमूना जानकारी के साथ लेबल.

  1. सक्रिय सिलिका जेल की 100 ग्राम केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड के 44 ग्राम जोड़कर acidified सिलिका जेल तैयार करें.
  2. तल पर कांच ऊन का एक छोटा सा प्लग युक्त एक छोटे क्रोमैटोग्राफी स्तंभ में acidified सिलिका जेल के 10 ग्राम जोड़ें.
  3. हेक्सेन के 10 एमएल के साथ स्तंभ पूर्व सफाई के बाद स्तंभ के लिए नमूना निकालने के 1 मिलीलीटर जोड़ें.
  4. हेक्सेन के 20 मिलीलीटर के साथ स्तंभ elute और पतला 20 एमएल ग्लास ट्यूब में इकट्ठा.
  5. नाइट्रोजन की एक धारा के तहत नाइट्रोजन बाष्पीकरण (एन Vap) तंत्र पर ग्लास ट्यूब प्लेस और गर्म पानी में डूबे.
  6. कम से कम 1 मिलीलीटर के लिए लुप्त हो लेकिन सूखापन के लिए नहीं.
  7. एन Vap तंत्र से निकालें और हेक्सेन के छोटे धोने के साथ 1 मिलीलीटर बड़ा फ्लास्क को हस्तांतरण.
  8. एक 1.8 मिलीलीटर autosampler शीशी नमूना जानकारी के साथ लेबल पर स्थानांतरण.
  9. शीशी में आंतरिक मानक के 4 μl स्पाइक. नमूना अब विश्लेषण के लिए तैयार है.

5 गुदागैस क्रोमैटोग्राफी द्वारा ysis - मास स्पेक्ट्रोमेट्री नकारात्मक रासायनिक आयनीकरण का उपयोग

  1. साधन जांचना मानकों का प्रयोग करें: मानकों अच्छी तरह से अलग congeners के समूहों से मिलकर मिश्रण में उपलब्ध हैं. घोला जा सकता है 1-5 लगभग Arochlors 1016, 1221, 1232, 1242, 1248, 1254 में पाया congeners का सब से मिलकर बनता है, और 1260 मिक्स 1 एक बहु स्तरीय अंशांकन मिश्रण के रूप में प्रयोग किया जाता है, और इस प्रणाली linearity कम से कम तैयारी की पुष्टि होती है 2 और 100 एनजी / एमएल के बीच सांद्रता में पांच अंशांकन स्तरों. घोला जा सकता है 2-5 प्रत्येक congener के लिए एकल बिंदु calibrations के रूप में उपयोग किया जाता है.
  2. अभिकर्मक गैस के रूप में वाहक गैस (1 मिलीग्राम / मिनट) और मीथेन के रूप में हाइड्रोजन के साथ नकारात्मक रासायनिक आयनीकरण मोड में मास स्पेक्ट्रोमेट्री प्रणाली - क्रोमैटोग्राफी सेट करें.
  3. अलग होने के लिए 0.25 माइक्रोन मोटाई फिल्म में DB-XLB साथ लेपित एक दूसरे से जुड़ने सिलिका, केशिका स्तंभ (0.25 मिमी भीतरी व्यास × 60 मीटर) का प्रयोग करें. 26 को फिर 25 डिग्री सेल्सियस / मिनट में 60 से 212 डिग्री सेल्सियस के लिए कार्यक्रम ओवन तापमान,0 ° 1 डिग्री सेल्सियस / मिनट पर सी, और फिर 4 मिनट की एक अंतिम पकड़ समय के साथ, 4 डिग्री सेल्सियस / मिनट पर 280 डिग्री सेल्सियस के लिए. इंजेक्टर और हस्तांतरण लाइन तापमान 280 डिग्री सेल्सियस पर सेट किया जाना चाहिए. Splitless इंजेक्शन मोड का उपयोग कर नमूने के 1 से 2 μl इंजेक्षन.
  4. 13 सी लेबल decachlorobiphenyl का उपयोग आंतरिक मानक विधि द्वारा सभी मानकों और नमूनों का विश्लेषण करें.
  5. एक दूसरा स्रोत मानक और Aroclors 1242 और 1260 चलाकर प्रारंभिक अंशांकन पर एक जांच करने के लिए, और फिर यह जाँच प्रक्रिया से मनाया मात्रा के साथ Aroclor congeners के लिए भविष्यवाणी मूल्यों की तुलना करें.
  6. सभी नमूनों की प्रारंभिक अंशांकन प्रक्रिया को सफलतापूर्वक पूरा किया गया है एक बार, पूरा विश्लेषण. एक अंशांकन प्रारंभिक अंशांकन से अंशांकन मिश्रण में से किसी का उपयोग कर, हर दस नमूनों की जांच करें.

नेट पोषण से स्थानांतरण क्षमता की 6 गणना

  1. प्रत्येक संयोजन ओ के लिए, γ, शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता की गणनानिम्न समीकरण का उपयोग च टैंक और पीसीबी congener:
    समीकरण 1 [पीसीबी एफ] प्रयोग के अंत में टैंक में शिकारी मछली की औसत पीसीबी congener एकाग्रता है, जहां, डब्ल्यू एफ, प्रयोग के अंत में टैंक में शिकारी मछली की औसत वजन है [पीसीबी मैं] मैं प्रयोग के शुरू में शिकारी मछली की औसत वजन है, और किया जाता पीसीबी congener की राशि का वजन करने के लिए संदर्भित करता डब्ल्यू प्रयोग के शुरू में टैंक में शिकारी मछली की औसत पीसीबी congener एकाग्रता है, पीसीबी congener प्रयोग के दौरान टैंक में प्रत्येक झील ट्राउट द्वारा औसतन किया जाता.
  2. टैंक dur में शिकारी मछली प्रति खाया शिकार मछली की औसत राशि (वजन) द्वारा शिकार मछली कंपोजिट में पीसीबी congener की औसत एकाग्रता गुणा करके उपरोक्त समीकरण में विभाजक की गणनाप्रयोग के पूरे पाठ्यक्रम आईएनजी.

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Representative Results

प्रारंभिक झील ट्राउट अंतिम झील ट्राउट वजन 853 से 1566 ग्राम (1 टेबल) को लेकर मतलब है, जबकि वजन 694 से 907 ग्राम तक बताया मतलब के रूप में लेक ट्राउट, प्रयोग के दौरान विकास की एक पर्याप्त राशि दिखाया. 135 दिन के प्रयोग के दौरान एक झील ट्राउट द्वारा खपत भोजन की औसत राशि 641 से 2649 ग्राम तक बताया गया. मतलब पीसीबी congener सांद्रता लेकर ही मतलब पीसीबी congener सांद्रता 0.03 से लेकर, जबकि झील ट्राउट में पीसीबी congener सांद्रता मतलब से 29.31 तक प्रयोग के शुरू में 0.01 से 7.14 एनजी / छ (गीला वजन के आधार) के लिए, प्रयोग के दौरान वृद्धि हुई प्रयोग (तालिका 2) के समापन. सितंबर से पकड़ा bloater के 10 समग्र नमूने भर में औसतन पीसीबी congener सांद्रता 0.03 से 26.56 एनजी / जी को बताया गया. मई पकड़ा bloater के 10 समग्र नमूने भर में औसतन पीसीबी congener सांद्रता 0.03 से 23.52 एनजी / जी (तालिका 2) को लेकर. का संदर्भ लेंप्रयोग में इस्तेमाल bloater बारे में अधिक जानकारी के लिए Madenjian एट अल. 21.

Γ का मतलब अनुमान सभी आठ टैंक (तालिका 3) भर में औसत के आधार पर, 0.309-0.988 बताया गया. इन मतलब अनुमान के लिए मानक त्रुटियों 0.029-0.227 बताया गया. पीसीबी congeners के सभी 75 के लिए, काफी निष्क्रिय झील ट्राउट के लिए मतलब γ से अलग नहीं किया था सक्रिय झील ट्राउट के लिए γ मतलब. इस प्रकार, सक्रिय झील ट्राउट वे निष्क्रिय झील ट्राउट के रूप में लगभग एक ही दक्षता के साथ सेवन कि भोजन से पीसीबी congeners बनाए रखा.

अणु प्रति 5 से 10 क्लोरीन परमाणु से बढ़ाकर क्लोरीनीकरण की डिग्री के रूप में, γ का अनुमान मामूली कमी (चित्रा 1) से पता चला है. हालांकि, γ पीसीबी congeners का क्लोरीनीकरण की डिग्री के साथ काफी भिन्न नहीं था (एक तरह से एनोवा: एफ = 2.16, स्वतंत्रता की डिग्री [DF] = 6, 67, पी = 0.0579). भर γ औसतन सभी 75 congeners, मतलब मूल्य 0.664 था.

लॉग कश्मीर के रूप में ओउ 6.0-8.2 वृद्धि हुई, γ तेजी (चित्रा 2) मना कर दिया. गिरावट की यह दर शून्य (टी टेस्ट:; DF = 64, टी = -4.09 पी = 0.0001) से काफी अलग था, लेकिन लॉग कश्मीर ओउ की प्रति यूनिट सिर्फ 7% के बराबर था. सज्जित वक्र के आधार पर, γ कश्मीर ओउ = 6 पर 0.70 के बराबर था, और γ ओउ = 8 (चित्रा 2) कश्मीर पर 0.61 के बराबर था.

75 पीसीबी congeners के 66 के लिए, γ का मतलब अनुमान के बारे में मानक त्रुटि (तालिका 3) (0.05 ≤) छोटा था. नौ अन्य पीसीबी congeners के छह, γ का मतलब अनुमान के बारे में मानक त्रुटियों (0.10 ≤) काफी कम थे. उच्च मानक त्रुटियों क्लोरीनीकरण की एक डिग्री कम (अणु प्रति 3-5 क्लोरीन परमाणु) के साथ जुड़े थे.

हमेशा ">:" रखने together.within पृष्ठ = के लिए "तम्बू चित्रा 1
चित्रा पीसीबी congener के अणु प्रति क्लोरीन परमाणुओं की संख्या के एक समारोह के रूप में दर्शाया गया है अपने शिकार से झील ट्राउट के लिए पीसीबी congeners का शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता (γ) के 1 प्राक्कलन. अनुमान bloaters थे, जिसके दौरान एक प्रयोगशाला में प्रयोग करने पर आधारित थे झील ट्राउट को खिलाया. चित्रा Madenjian एट अल. 18 से अनुमति के साथ reproduced.

चित्रा 2
पीसीबी congener की ओउ लॉग कश्मीर के एक समारोह के रूप में दर्शाया गया है अपने शिकार से झील ट्राउट के लिए पीसीबी congeners का शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता (γ) के 2 अनुमान चित्रा. अनुमान bloaters झील को खिलाया गया, जिसके दौरान एक प्रयोगशाला में प्रयोग करने पर आधारित थे ट्राउट. फिट Rअधिक से अधिक 6 ओउ लॉग कश्मीर के साथ congeners के लिए निकास लाइन भी प्रदर्शित किया जाता है. सज्जित प्रतिगमन लाइन के लिए आर 2 मूल्य लॉग कश्मीर ओउ से समझाया लॉग γ में भिन्नता की राशि का प्रतिनिधित्व करता है. चित्रा Madenjian एट अल. 18 से अनुमति के साथ reproduced.

तालिका 1 प्रारंभिक औसत वजन और 135 दिन की प्रयोगशाला प्रयोग में इस्तेमाल झील ट्राउट के अंतिम औसत वजन. Bloaters झील ट्राउट को खिलाया गया. इसके अलावा प्रयोग के पूरे पाठ्यक्रम के दौरान एक झील ट्राउट द्वारा खाया भोजन की औसत राशि शामिल है. टेबल Madenjian एट अल. 18 से अनुमति के साथ reproduced.

टैंक संख्या झील ट्राउट की प्रारंभिक मतलब वजन (छ) झील ट्राउट के अंतिम मतलब वजन (छ) खपत (G)
1 907 1,345 1734
2 860 1,339 1,999
3 890 1,518 2,344
4 817 1566 2649
5 694 1,242 1,870
6 729 853 641
7 754 1,050 1,203
8 729 1,092 1,336

झील ट्राउट में तालिका 2 प्रारंभिक और अंतिम पीसीबी congener सांद्रता, 135 दिन की प्रयोगशाला प्रयोग के दौरान इस्तेमाल किया आठ टैंक भर में औसत. टूटने पीसीबी congener सांद्रता प्रयोग के दौरान झील ट्राउट को खिलाया सितंबर पकड़ा और मई पकड़ा bloaters में कर रहे हैं यह भी दिखाया गया है. टेबल reprMadenjian एट अल. 18 से अनुमति के साथ oduced. पीसीबी congeners Ballschmiter एट अल. 20 के अनुसार गिने गए.

पीसीबी congener प्रारंभिक झील ट्राउट पीसीबी congener (एनजी / छ) एकाग्रता का मतलब अंतिम झील ट्राउट पीसीबी congener (एनजी / छ) एकाग्रता का मतलब Bloater पीसीबी congener एकाग्रता का मतलब सितंबर पकड़ा (एनजी / छ) Bloater पीसीबी congener एकाग्रता मतलब पकड़ा मई (एनजी / छ)
19 1.62 3.41 3.27 2.01
22 0.41 0.66 0.36 0.32
28 1.22 2.24 1.27 0.82
31 1.19 1.97 1.13 0.67
44 1.10 2.08 1.09 </ TD> 0.84
45 0.66 1.74 2.25 1.71
46 0.81 2.51 5.23 3.73
47 1.88 5.72 9.10 5.81
52 2.11 3.76 2.05 1.66
60 0.59 2.04 2.10 1.50
63 0.19 0.68 0.74 0.52
70 3.05 10.25 9.43 6.62
74 0.76 2.76 2.35 1.79
82 0.26 0.91 0.80 0.75
83 0.45 1.60 1.62 1.28
85 1.70 6.63 6.38 5.15
87 1.12 3.47 3.09 2.46
92 1.17 4.16 3.91 3.06
95 2.22 5.06 3.09 2.59
97 1.04 3.37 3.08 2.45
99 3.19 12.38 11.95 9.59
101 3.33 10.25 8.90 7.37
105 2.88 11.35 10.80 9.28
110 4.53 15.78 15.55 12.31
115 0.20 1.03 0.69 0.54 117 0.25 1.24 1.19 0.98
118 6.20 24.17 22.94 19.35
124 0.22 0.79 0.77 0.63
128 1.58 6.26 6.03 5.37
130 0.85 3.26 3.24 2.85
131 0.77 2.97 2.89 2.52
134 0.14 0.44 0.42 0.36
135 0.84 3.19 3.16 2.62
137 0.46 1.77 1.67 1.49
138 7.14 28.31 26.56 23.52
141 0.71 2.50 2.45 2.17
144 0.08 0.22 0.19 0.18
146 2.34 9.10 8.96 7.86
149 2.38 8.18 8.25 6.72
151 0.47 1.53 1.43 1.27
156 0.68 2.65 2.31 1.96
158 0.64 2.42 2.36 1.99
163 2.92 10.24 10.07 8.94
164 0.47 1.81 1.79 1.58
167 0.43 1.65 1.64 1.43
170 1.03 3.94 3.71 3.47
171 0.39 1.46 1.43 1.26
172 0.38 1.45 1.41 1.30
174 0.48 1.83 1.84 1.67
175 0.11 0.42 0.42 0.37
176 0.03 0.09 0.09 0.09
177 0.72 2.67 2.65 2.45
178 0.61 2.33 2.26 2.03
179 0.17 0.60 0.58 0.55
180 3.35 12.84 11.97 10.73
183 1.18 4.44 4.32 3.79
185 0.04 0.14 0.14 0.14
187 3.12 12.07 11.65 10.67
190 0.27 1.02 1.18 1.02
191 0.05 0.20 0.20 0.17
193 0.27 1.03 0.94 0.87
194 0.46 1.73 1.66 1.55
195 0.14 0.54 0.53 0.49
196 0.30 1.12 1.15 1.03
197 0.06 0.23 0.23 0.20
199 0.67 2.44 2.17 2.12
200 0.01 0.03 0.03 0.03
201 0.14 0.53 0.52 0.48
202 0.31 1.14 1.12 1.02
203 0.48 1.83 1.83 1.61
205 0.02 0.09 0.09 0.08
206 0.19 0.70 0.70 0.65
207 0.07 0.25 0.26 0.24
208 0.11 0.41 0.43 0.40
209 0.11 0.36 0.38 0.36

टेबल अपने शिकार से झील ट्राउट के लिए पीसीबी congeners का शुद्ध पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता (γ) के 3 मीन अनुमान. अनुमान झील ट्राउट bloaters खिलाया गया, जिसके दौरान एक 135 दिन की प्रयोगशाला में प्रयोग करने पर आधारित थे. प्रत्येक congener के लिए, सभी आठ टैंकों से γ अनुमान मतलब अनुमान उपज औसत थे. मतलब की मानक त्रुटि कोष्ठक में संलग्न है. टेबल Madenjian एट अल. 18 से अनुमति के साथ reproduced. पीसीबी congeners Ballschmiter एट अल. 20 के अनुसार गिने गए.

पीसीबी congener Γ मीन मतलब की मानक त्रुटि
19 0.563 0.046
22 0.813 0.127
28 0.900 0.086
31 0.848 0.065
44 0.988 0.058
45 0.474 0.058
46 0.309 0.035
47 0.401 0.029
52 0.911 0.059
60 0.625 0.034
63 0.596 0.036
70 0.702 0.039
74 0.753 0.050
82 0.700 0.038
83 0.644 0.039
85 0.677 0.037
87 0.699 0.038
92 0.681 0.032
95 0.887 0.102
97 0.683 0.032
99 0.675 0.035
101 0.705 0.035
105 0.678 0.035
110 0.647 0.037
115 0.957 0.227
117 0.704 0.050
118 0.680 0.035
124 0.655 0.037
128 0.666 0.035
130 0.644 0.034
131 0.659 0.037
134 0.646 0.032
135 0.653 0.034
137 0.675 0.035
138 0.686 0.033
141 0.639 0.037
144 0.680 0.050
146 0.650 0.034
149 0.628 0.036
151 0.653 0.034
156 0.733 0.051
158 0.657 0.032
163 0.632 0.042
164 0.648 0.035
167 0.642 0.033
170 0.668 0.039
171 0.649 0.038
172 0.649 0.035
174 0.646 0.037
175 0.632 0.038
176 0.636 0.046
177 0.636 0.031
178 0.654 0.040
179 0.647 0.034
180 0.681 0.036
183 0.654 0.038
185 0.611 0.036
187 0.659 0.036
190 0.549 0.031
191 0.629 0.032
193 0.693 0.037
194 0.654 0.035
195 0.643 0.039
196 0.614
197 0.640 0.040
199 0.696 0.036
200 0.543 0.042
201 0.634 0.040
202 0.639 0.036
203 0.631 0.036
205 0.645 0.038
206 0.617 0.036
207 0.606 0.039
208 0.592 0.038
209 0.570 0.037

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Discussion

Γ की सबसे सटीक अनुमान के लिए, प्रयोगकर्ता सही ढंग से प्रयोग के दौरान टैंक और टैंक में से प्रत्येक में uneaten भोजन की राशि में से प्रत्येक में रखा भोजन की राशि दोनों ट्रैक करने में सक्षम होना चाहिए. इसे पूरा करने के प्रयोगकर्ता के टैंक से uneaten भोजन के सभी दूर है और इसे सही अपने वजन का निर्धारण करने में सक्षम होना चाहिए. वास्तव में शिकारी मछली द्वारा खाया भोजन की सटीक ट्रैकिंग के अलावा, γ का सही आकलन भी प्रयोग की पर्याप्त अवधि पर निर्भर हो सकता है. व्यापक रूप से उद्धृत प्रयोगशाला अध्ययन विशेष रूप से अपने भोजन अवधि 22,23 में 105 में 224 दिनों से लेकर से मछली के लिए PCBs के पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता का अनुमान लगाने के लिए बनाया गया यह देखते हुए कि, एक कम से कम 100 दिनों की अवधि, और अधिमानतः कम से कम 130 दिनों की सिफारिश की है. इसके अलावा, पूर्वाग्रह विस्तार के शुरू में पीसीबी निर्धारण के लिए नमूना शिकारी मछली की एक अपर्याप्त संख्या से γ के आकलन में पेश किया जा सकता हैeriment 14. नमूने का आकार घटने के साथ टैंक बढ़ जाती है में शिकारी मछली की सभी के लिए औसत पीसीबी एकाग्रता का प्रतिनिधि नहीं पीसीबी सांद्रता के साथ शिकारी मछली का एक नमूना प्राप्त करने की संभावना. आदर्श रूप में, टैंक में मछली का आधा प्रयोग के शुरू में पीसीबी निर्धारण के लिए बलिदान किया जाना चाहिए.

प्रासंगिकता और क्षेत्र के लिए प्रयोगशाला में प्रयोग के परिणाम की प्रयोज्यता बढ़ाने के लिए, आम तौर पर क्षेत्र में शिकारी मछली द्वारा खाया जाता है कि एक शिकार मछली प्रयोगशाला प्रयोग के दौरान शिकारी मछली को खिलाया जाना चाहिए. नेट पौष्टिकता स्थानांतरण क्षमता पीसीबी congeners 11,24 युक्त भोजन मैट्रिक्स की प्रकृति पर निर्भर हो सकता है. पिछले अध्ययनों से सबूत एक वाणिज्यिक गोली आहार पर आधारित γ का अनुमान वास्तविक शिकार मछली 17 पर शिकारी मछली खिलाने पर आधारित γ अनुमान की तुलना में काफी कम हो सकता है कि सुझाव दिया गया है. बल्कि एक संसाधित या एसवाई से शिकार मछली की इसलिए, एक आहारnthesized आहार की सिफारिश की है.

Γ के अनुमानों में अनिश्चितता को कम करने के लिए, शिकारी मछली और शिकार मछली कंपोजिट दोनों अच्छी तरह से homogenized होना चाहिए. homogenization की डिग्री blenders और मिक्सर के उपलब्ध सेट पर, भाग में, निर्भर करता है. बड़े शिकारी मछली के लिए, एक बड़े मिक्सर homogenization प्रक्रिया आरंभ करने के लिए आवश्यक हो सकता है. बड़े मिक्सर से homogenate की एक subsample तो homogenization के एक उच्च डिग्री हासिल की जा सकती है जहां एक छोटे मिक्सर, को हस्तांतरित किया जा सकता है.

Homogenized मछली ऊतकों के नमूनों में पीसीबी congener सांद्रता का सही निर्धारण सही ढंग से विभिन्न पीसीबी congeners के लिए γ आकलन की प्रक्रिया का एक महत्वपूर्ण घटक है. नमूने ठीक से मैट्रिक्स हस्तक्षेप को दूर करने और पीसीबी congeners के लिए पता लगाने के एक निम्न स्तर को प्राप्त करने के लिए निकालने की प्रक्रिया के लिए अनुवर्ती के दौरान साफ ​​किया जाना चाहिए. एक गैस क्रोमैटोग्राफी का प्रयोग करें - एक नकारात्मक के साथ मास स्पेक्ट्रोमेट्री प्रणालीकम क्लोरीनयुक्त पीसीबी congeners के लिए सीमा का पता लगाने इस मूल्य 25 की तुलना में काफी अधिक होगा, हालांकि एकल आयन मोड में संचालित रासायनिक आयनीकरण स्रोत, अधिक उच्च क्लोरीनयुक्त पीसीबी congeners के लिए निकालने में 0.02 एनजी / एमएल के रूप में कम पता लगाने के स्तर के लिए नेतृत्व कर सकते हैं . एक इलेक्ट्रॉन कब्जा डिटेक्टर नकारात्मक रासायनिक आयनीकरण साधन के लिए प्रतिस्थापित किया जा सकता है और इस दृष्टिकोण निम्न स्तर का पता लगाने प्रदान करेगा, लेकिन यह भी मैट्रिक्स हस्तक्षेप करने के लिए अतिसंवेदनशील हो जाएगा. अधिक उपयुक्त जो दृष्टिकोण (नकारात्मक रासायनिक आयनीकरण या इलेक्ट्रॉन कब्जा) है के रूप में homogenized मछली ऊतकों के नमूनों में पीसीबी congener सांद्रता पर निर्भर करता है, शोधकर्ता फैसला करना होगा. बहुत कम पीसीबी congener सांद्रता के लिए, इलेक्ट्रॉन कब्जा दृष्टिकोण का इस्तेमाल किया जा सकता है. यह कारण विश्लेषणात्मक त्रुटि 26 तक सीमा का पता लगाने के निकट माप अक्सर अपेक्षाकृत कम सटीक और सटीकता है कि कहा जाना चाहिए.

इस अध्ययन में विस्तृत कार्यप्रणाली आसानी से मछली में पीसीबी संचय के क्षेत्र में नए अनुसंधान सवालों का पता करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है. उपरोक्त के रूप में उदाहरण के लिए, γ दर खिलाने से प्रभावित हो सकता है. पिछला काम γ खाद्य खपत 14,17 की बढ़ती दर के साथ कम हो जाती है कि सुझाव दिया गया है. बिल्कुल सही कैसे γ दर खिला बढ़ाने के साथ बदल जाता है? मछली खिलाया यथेच्छ के लिए इस अध्ययन में स्पष्ट किया गया है जो γ और क्लोरीनीकरण की डिग्री के बीच संबंधों या γ के बीच और ओउ कश्मीर लॉग ऑन करते हैं, कम खिला दरों में लगातार बने हुए हैं? निम्नलिखित दो कारकों में से कौन सा γ पर एक बड़ा प्रभाव है: भोजन की राशि प्रत्येक दिन या खिलाने की आवृत्ति भस्म (यानी, हर दो या तीन दिन में एक बार खिला बनाम एक बार हर दिन खिला)? निम्नलिखित दो कारकों में से कौन सा γ पर एक बड़ा प्रभाव है: भोजन का वजन एक दिन या एक दिन का सेवन भोजन में ऊर्जा की मात्रा का सेवन किया? methदोनों खिला दर और खाद्य प्रकार प्रयोगशाला में नियंत्रित किया जा सकता है क्योंकि इस अध्ययन में विस्तृत odology, इन सवालों के जवाब देने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
870-L fiberglass tanks Frigid Units RT-430-1
2,380-L fiberglass tanks Frigid Units RT-630-1
Tricaine methanesulfonate (Finquel) Argent Chemical Laboratories, Inc. C-FINQ-UE-100G Eugenol could also be used as an anesthetic.
Ashland chef knife Chicago Cutlery SKU 1106336
Cutting board Williams-Sonoma 3863586
Hobart verical mixer (40 quart) Hobart Corporation
1.9-L food processor Robot Coupe, Inc. RSI 2Y1 
Polyethylene bags (various sizes) Arcan Inc.
I-Chem jars I-Chem 220-0125
Top-load electronic balance Mettler Toledo Mettler PM 6000 
Sodium sulfate, anhydrous - granular EMD SX0760E-3
Glass extraction thimbles (45 mm x 130 mm) Wilmad-Lab Glass LG-7070-114
Teflon boiling chips Chemware 919120
Rapid Vap nitrogen sample concentrator Labconco 7910000
N-Vap nitrogen concentrator Organomation 112
Soxhlet extraction glassware (500 ml) Wilmad-Lab Glass  LG-6900-104
Hexane Burdick & Jackson  Cat. 211-4
Dichloromethane Burdick & Jackson  Cat. 300-4
Silica gel BDH Cat. BDH9004-1KG
Labl Line 5000 mult-unit extraction heater Lab Line Instruments
Agilent 5973 GC/MS with chemical ionization Agilent 5973N
Internal standard solution  Cambridge Isotope Laboratories EC-1410-1.2
PCB congener calibration standards Accustandard C-CSQ-SET
DB-XLB column (60 m x 0.25 mm, 0.25 micron) Agilent/ J&W 122-1262

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References

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