والمتكرر الارتجاج إصابات الرأس النموذجي في الفئران

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Yang, Z., Lin, F., Weissman, A. S., Jaalouk, E., Xue, Q. s., Wang, K. K. A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice. J. Vis. Exp. (116), e54530, doi:10.3791/54530 (2016).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

ارتجاج في المخ، وتسمى أيضا خفيفة إصابات في الدماغ (الارتجاج)، هو وقوع الأكثر شيوعا من إصابات في الدماغ (TBI) ويؤثر على الملايين من الناس في الولايات المتحدة الأمريكية. يمكن هزات تكون صعبة لتشخيص ولا يوجد علاج محدد لارتجاج في المخ. هناك اعتراف متزايد وبعض الأدلة على أن الصدمات الميكانيكية الخفيفة الناتجة عن الإصابات الرياضية، والمعارك العسكرية، وغيرها من الملاحقات جذابة جسديا قد يكون لها عواقب عصبية المتراكمة والمزمنة 1،2. ومع ذلك، لا يزال هناك نقص في المعرفة فيما يتعلق الارتجاج وآثارها. المنهجية الحالية تقيد دراسات في علم الأمراض والعلاج في البشر منذ وتقييم عصبي فقط وتقييم التصوير المتاحة للتشخيص السريري. توفر النماذج الحيوانية وسيلة لدراسة هزات بطريقة فعالة، صارمة، وتسيطر على أمل مزيد من التشخيص والعلاج من الارتجاج.

وقد تكيفت دراسات المصرف التجاري العراقي التقليدينماذج مثل تأثير القشرية للرقابة (CCI)، تأثير السائل قرع (FPI)، انخفاض الوزن إصابة، وإصابة الانفجار لأداء الارتجاج وتحفيز بالقسوة إصابة منخفضة عن طريق تغيير معالم الإصابة. هذه النماذج هي مفيدة للاستخدام بسبب قدرتها على تكرار الصدمة الدماغ مشابهة شكليا إلى الحالة السريرية. ومع ذلك، لديهم أيضا القيود الخاصة بها. شدة الإصابة الناجمة عن إصابة التسارع (انخفاض الوزن) في كثير من الأحيان اختلافا كبيرا. نتائج اثنين من غرفة تجارة وصناعة خفيفة - نزيف تحت العنكبوتية وكدمة التنسيق - لا يمكن مقارنتها مع هزات الإنسان نموذجية. غرفة تجارة وصناعة وFPI تتطلب حج القحف، وهي ليست ذات الصلة سريريا، في حين أن إصابة الانفجار هو نموذج أكثر إثارة للجدل في ما يخص القياسات موقف التعرض وذروة الضغط المختلفة وكذلك الإصابات الثانوية المتغيرة خلال التعرض 3-6. نموذج حيواني الارتجاج تحديثها التي يمكن أن تترجم بحوث ما قبل السريرية في SETTI السريرينانوغرام من الضروري في مجال البحوث.

القضية الرئيسية في نمذجة معتدل TBI هي تحديد شدة الإصابة التجريبية، الذي يعيد الأكثر تطابقا إصابة في عملية إعداد سريرية. في الآونة الأخيرة، وضعت مجموعات بحثية مختلفة لإصابة في الرأس المغلقة أو الارتجاج إصابة في الرأس (CHI) نموذج 7-10. CHI هو تعديل CCI دون حج القحف، ولكنه لا يزال يستخدم نظام التأثير المغناطيسي الإلكترونية التقليدية لتوليد تأثير الرأس. وCHI يمكن أن تحدث ارتجاج تتراوح ما بين خفيفة الى معتدلة عن طريق ضبط المعلمات تأثير. فقدان الوعي (LOC) يمكن ملاحظتها مباشرة بعد الأثر عن طريق الكشف عن انخفاض في معدل التنفس أو إنهاء عابرة في التنفس. يستخدم الفترة من الكونغرس لتحديد شدة الإصابة. هذه الورقة تتضمن نسخة محسنة قليلا وتحديثها لنموذج متكرر CHI (rCHI) في الفئران، جنبا إلى جنب مع بروتوكول مفصلة خطوة بخطوة ونتائج ممثل. وrCHI استراتيجيات البحث نموذج لإعادة مفيد في تحديد الآثار الارتجاج والعلاجات المحتملة، وخاصة منذ وجود نموذج حيواني الفردية قادرة على تقليد كل من التغيرات المرضية التي يسببها ارتجاج.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تم تنفيذ جميع الإجراءات في إطار البروتوكولات # 201207692 افقت عليها لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي من جامعة ولاية فلوريدا وفقا لالمعاهد الوطنية للصحة الدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.

1. رعاية الحيوان

  1. استخدام عمرها 3-4 أشهر الذكور C57BL / 6J الفئران. توفير الفراش، ومواد التعشيش، والغذاء، والمياه libitum الإعلانية. الحفاظ على الفئران في درجات الحرارة المحيطة تسيطر على 20-22 درجة مئوية مع 12 ساعة ضوء / 12 ساعة دورات مظلمة ثابتة.

2. قبل الانحشار التحضير

  1. إرفاق سيليكون المغلفة بالمطاط تلميح معدنية مصنوعة خصيصا لجهاز تأثير التجسيمي الكهرومغناطيسي. تأكد من القاع المسطح من طرف موازية للسطح تلميح التحقيق (الشكل 1A).
  2. تخدير الفأر مع 4٪ الأيزوفلورين تليها التخدير الصيانة من 2.5٪ الأيزوفلورين. تحقق التخدير عن طريق تدفق متر. رصد ومراقبةص مستوى التخدير حتى الحيوان يصل إلى مستوى الجراحية التخدير عن طريق إظهار فقدان المنعكس انسحاب دواسة.
  3. ضع الماوس في وضعية الرقود على وسادة التدفئة. استخدام مخروط الأنف على شكل قمع للحفاظ على الماوس تحت التخدير. تماما حلق الرأس باستخدام الانتهازي. استخدام الفازلين مرهم للعين في عيون الماوس، لمنع جفاف بينما تحت التخدير.

3. إعداد المعلمات تأثير

ملاحظة: يتضمن نظام تأثير مربع التحكم لتعيين المعلمات تأثير، وهو المحرك لأداء الانحشار، وإطار المجسم الرقمي مع محاور 3-الحركة.

  1. قبل تعيين سرعة الجهاز الأثر إلى 4 متر / ثانية ومدة بقاء إلى 240 مللي ثانية على السيطرة على المربع.

4. تحديد المواقع مركز الأثر

  1. وضع وسادة التدفئة الناعمة تحت جسم الحيوان للحفاظ على درجة حرارة الجسم قرب 39 درجة مئوية. جبل الماوس في إطار المجسم في ضميرموقف ه مع قضبان الأذن كليلة نهاية.
  2. خفض الحافة تأثير قريب من رأس الفأر عن طريق تحريك سائق Z. ضبط غيض تأثير شقة (9 مم) عن طريق تحريك X- وY السائقين في منتصف الطريق إلى الهدف ينسق فوق الدرز السهمي.
  3. تأكد من حافة واحدة من طرف تأثير موازية عموديا إلى خط أفقي وهمي بين اثنين من آذان (الشكل 1C). مركز تأثير يتوافق مع منتصف الدرز السهمي مركزي بين الغرز بين نصفي العظم الجبهي واللامي (interaural 9 ملم الى interaural 0 مم، الأفقي 4.5 ملم).

5. إعداد عمق الأثر

  1. لضبط عمق تأثير بشكل صحيح، استخدم تلميح التحقيق إضافية لاستبدال السيليكون معزول المغلفة بالمطاط تأثير الحافة.
  2. للتأكد من وجود أي تحول من مركز التأثير بعد التحول نصائح، تعيين X و Y قناة على لوحة التحكم الرقمي التجسيمي إلى الصفر قبل أن ينتقل النصائح.
  3. نقل مشكلهالبريد طرف إلى وسط منطقة التأثير عن طريق تحريك X-Y ومحركات يدويا.
  4. كليب الاتصال استشعار لذيل الفأر.
  5. نقل المسبار (Z محرك الأقراص) لأسفل حتى يلامس طرف المسبار على سطح الموقع تأثير.
  6. تعيين القناة Z على لوحة التحكم التجسيمي إلى الصفر.
  7. نقل معلومات سرية تأثير العودة إلى منطقة التأثير عن طريق تعديل X- وY السائقين (لا أزرار صفر على لوحة التحكم الرقمي التجسيمي) يدويا حتى X- وY السائقين صفر (حيث تم غيض تأثير ضعه سابقا).
  8. التراجع عن المحرك عن طريق تحريك مفتاح تتراجع على السيطرة على المربع. يدويا نقل المسبار أسفل (Z سائق) بنسبة 4 مم.

6. تأثير

  1. تحريك تأثير بالضغط على مفتاح التأثير على السيطرة على المربع وتحقيق عمق تشوه 4 مم.

7. بعد الانحشار

  1. قياس الوقت من تأثير حتى أول نفس الماوس، باستخدام جهاز توقيت.
  2. السماح للتعافي قبل أن تعود الحيوان مرة أخرى في قفص نظيفة. لا عودة للحيوان أن الشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما.
  3. مراقبة ووزن الفئران يوميا. إذا أظهرت الفئران علامات الألم، حقن داخل الصفاق لهم ميلوكسيكام في 1-2 ملغ / كغ كل 12-24 ساعة.

8. الانحشار المتكرر

  1. إعطاء الفئران إصابات إضافية في أيام 4 و 7 و 10 بعد الإصابة الأولية (فترة 72 ساعة بين الآثار).

9. المناعية (IHC)

  1. نضح Transcardial
    1. تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق مع 200 م / بنتوباربيتال كغم.
    2. تقييم وضمان التخدير الجراحي الطائرة قرصة أخمص قدميه. ثانيةلدى عودتهم الماوس في موقف ضعيف عن طريق تسجيل بلطف الأرجل الأمامية والكفوف الخلفيتين على سطح العمل الستايروفوم داخل غطاء الدخان الكيميائية.
    3. إجراء شق خلال الجلد على طول خط الوسط الصدري من مجرد تحت عملية الخنجري إلى الترقوة. جعل اثنين من شقوق الجلد إضافية في عملية الخنجري والمضي قدما على طول قاعدة القفص الصدري البطني أفقيا.
    4. فتح التجويف الصدري وكشف القلب من خلال قطع عضلات الصدر والقفص الصدري.
    5. تأمين القلب النابض مع ملقط كليلة وتقديم 1 - ملم شق 2 في البطين الأيسر.
    6. إدراج فورا إبرة فراشة في الأذين الأيمن. بدء ضخ المياه المالحة 20ML عن طريق دفع الحقنة ببطء.
    7. التحول من المياه المالحة إلى 4٪ امتصاص العرق. تواصل نضح مع 20ML من امتصاص العرق.
    8. قطع رأس الماوس وإزالة الجلد مع مقص. عزل الدماغ من الجمجمة باستخدام قطع العظام.
  2. Cryostat باجتزاء
    1. أنسجة المخ تضمينها في درجة الحرارة المثلى القطع (أكتوبر) صياغة وتجميد في -80 درجة مئوية. وضع الدماغ في ناظم البرد في اتجاه السهمي. أقسام الدماغ قطع 5 ميكرون سميكة.
  3. تلطيخ
    1. تجفيف الأجزاء المجمدة في درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة.
    2. احتضان الشرائح مع 100 ميكرولتر من 2٪ مصل الماعز و 0.1٪ تريتون X-100 في الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) لمدة 1 ساعة على RT.
    3. تغسل شرائح 3 مرات مع 300 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني. ثم احتضان الشرائح مع مكافحة GFAP (1: 200) أو الأجسام المضادة لمكافحة فيريتين (1: 200) بشكل منفصل خلال الليل في 4 درجات مئوية.
    4. تغسل شرائح 3 مرات مع 300 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني. ثم احتضان الشرائح لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة مع الأجسام المضادة الثانوية البيوتين مترافق.
    5. تغسل شرائح 3 مرات مع 300 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني. ثم احتضان الشرائح مع مجمع (ABC) حل أفيدين البيوتين (01:50) في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
    6. تغسل شرائح 3 مرات مع 300 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني. ثم احتضان في 3،3'-diaminobenzidine حل (DAB) الركيزة (50 مل برنامج تلفزيوني، 10 ميكرولتر H 2 O 10 ملغ DAB حبوب منع الحمل، والتصفية قبل استخدام) عن 5-8 دقائق. مراقبة الشرائح تحت المجهر حتى تظهر الخلايا إيجابية.
    7. شطف الشرائح في بطء ماء الحنفية لمدة 5 دقائق. شرائح نظيفة مع مختبر مسح. ثم تحميل المقاطع مع تصاعد المتوسطة وساترة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

في هذا النموذج (الشكل 1 AC)، كانت هناك فترات وجيزة من يلهث والتنفس الضحلة. يتم تعريف فقدان الوعي (اللاوعي)، وانخفاض في معدل التنفس أو إنهاء عابرة في التنفس قبل استئناف التنفس الطبيعي. تسبب لها تأثير على مركز رئيس اللاوعي على المدى القصير (7.5 ± 4.7، 7.8 ± 5.5، 10.2 ± 8.8، 9.5 ± 8.0 ثانية في كل أثر على حدة، 1D الشكل). وأظهرت أدمغة فئران التشكل الطبيعي التي كتبها H & E تلطيخ النسيجية، التي أشارت إلى عدم الآفات الهيكلية أو تلف الأنسجة واضح نتيجة لتأثير (الشكل 2A). وردا على المصرف التجاري العراقي، ومن المعروف أن الخلايا النجمية لتغيرات معينة بما في ذلك تفعيل وانتشار، أو دباق رد الفعل 11،12. زيادة ييفي الدبقية الحمضية بروتين (GFAP) خلايا إيجابية مع أجسام الخلايا الكبيرة ونقاط الاشتباك العصبي سميكة هي الخلايا النجمية تفعيلها. وcorpuوأظهرت الصورة الثفني من أدمغة فئران rCHI علامات واضحة على تنشيط الخلايا النجمية في 7 أيام بعد الأثر الماضي (الشكل 2B).

Microbleeds في الأنسجة شائعة في الارتجاج ويمكن أن تؤدي إلى الإفراج عن الحديد من الهيموجلوبين 13. الحديد الزائد في الدم ويمكن الكشف عن طريق اختبارات الفيرتين في المرافق الصحية 13. تم العثور على الخلايا immunopositive الفيرتين في القشرة الماوس بعد يوم واحد من تأثير الماضي واستمرت سبعة أيام على الأقل، مما يوحي بأن الانحشار متعددة قد يؤدي إلى microbleeds القشرية (الشكل 2C).

شكل 1
الشكل 1. نموذج الفأر من المتكرر الارتجاج إصابات الرأس. (A) من صنع مخصص 1 مم سيليكون سميكة طرف المغلفة بالمطاط قياس 9 ملم في القطر مع تلميح التحقيق. (ب) والماوس مounted في إطار المجسم في وضعية الرقود مع وسادة التدفئة الناعمة تحت الجسم. (C) ومركز التأثير لتحديد المواقع. حافة الحافة تأثير موازية عموديا إلى خط أفقي وهمي بين آذان اثنين. يقابل مركز التأثير على منتصف الطريق بين الغرز بين نصفي العظم الجبهي واللامي (interaural 9 ملم الى interaural 0 مم، الأفقي 4.5 ملم). ويعرف (D) توقف التنفس أثناء كما فترات وجيزة من انتهاء عابرة في التنفس. يعني وتظهر SD في اللوحة السفلى. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الشكل 2. الأنسجة لالمتكرر الارتجاج إصابات الرأس. (A، يسار) تمت إزالة دماغ الفأر بعد نضح مع 4٪ لامتصاص العرق. لم يتم العثور على تلف الأنسجة. (ب) زيادة من علامة البيوكيميائية لدباق (GFAP) في الجسم الثفني بعد 7 أيام من الإصابة الأخيرة. شريط مقياس = 200 ميكرون. (C) حسب المناعية، تم العثور على الفيريتين-H-سلسلة ليتم التعبير عنها في قشرة الدماغ بعد الإصابة. الصور إدراج تمثل تضخيم الخلايا إيجابية. مقياس شريط = 200 ميكرون. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

لتقليد إصابات الدماغ مشابهة شكليا إلى الحالة السريرية، ومن المتوقع أعراض ما بعد الارتجاج. وتشمل أعراض ما بعد الارتجاج عادة الصداع، والدوخة، والدوار، والتعب، والذاكرة والنوم المشاكل، صعوبة في التركيز، وكذلك القلق والمزاج المكتئب. منذ أعراض جسدية قد لا تكون قابلة للقياس بعد في النماذج الحيوانية، وتستخدم التغييرات المحرك وظيفة الادراك والسلوك العاطفي كمعايير لتقييم عقلاني ارتجاج في النماذج الحيوانية. في دراسة نشرت السابقة، فقد تبين أن نموذج الفأر rCHI يدفع العجز في التعلم المكاني، والذاكرة، والقلق 8. الأهم من ذلك، فإن النموذج rCHI المستخدمة في هذا البروتوكول يمثل إعداد سريرية دون وقوع إصابات الدماغ الغازية أو كسر بنية الدماغ، وكلاهما قد يؤدي إلى النزيف، نزيف، وذمة، أو فقدان الخلية الموت / الأنسجة الحادة.

وفيما يلي نصائح أساسية لنمذجة concussio يتفق بنجاحن / الارتجاج باستخدام نظام تأثير المغناطيس الإلكتروني:

تجنب إصابات الدماغ الثانية مباشرة بعد اصابة الدماغ الأولى التي يمكن أن تسببها الحركة خلال التأثير. أن يقترح رئيس الماوس لأسفل قليلا خلال التأثير. لتجنب كدمة الدماغ الناجم عن حركة سريعة ضد أرض صلبة أو رئيس وتمتد، ويجب وضع وسادة التدفئة الناعمة تحت جسم الفأر. يجب أيضا أن تبقى على الرأس والجسم الأفقي. وبالإضافة إلى ذلك، استخدام القضبان الأذن حادة نهاية لإصلاح رأس فأر في إطار المجسم، وعدم إدراجها داخل قناة الأذن. هذا يحمي الماوس من الضرر الناجم عن نهايات حادة أثناء الحركة.

وضع بشكل صحيح مركز الأثر وتحديد الصفر. وخلافا لإصابة في الرأس مفتوحة، وتحديد المواقع تأثير غيض من الصعب نسبيا. حجم غيض تأثير ومركز تأثير تؤثر على شدة الإصابة والآفات. وبناء على الماوس تشريح الدماغ، تم تصميم مركز تأثير لتتوافق مع منتصف الطريقبين خيوط بين نصفي العظم الجبهي واللامي (interaural 9 ملم الى interaural 0 مم، الأفقي 4.5 ملم). وبالتالي، مطلوب الأمثل غيض 9 ملم. ويجب تعديلها لهدف طرف تأثير ينسق فوق منتصف الدرز السهمي، وحافة واحدة من طرف التأثير يجب أن تكون موازية عموديا إلى خط أفقي وهمي بين اثنين من آذان (الشكل 1C). غيض تأثير معزول مع مطاط السيليكون كتل طلاء استشعار الاتصال ويمنع الإعداد عمق التأثير. وهناك حاجة إلى معلومات سرية التحقيق ويجب أن يكون موازيا لسطح زر على الطرف التأثير. يتم ضبط مركز للتأثير على الموقع لمس التحقيق غيض من خلال تشغيل أداة التجسيمي. تنقية الرأس بمحلول ملحي يزيد من الحساسية الكهربائية. وبالإضافة إلى ذلك، وهذا التحقيق هو قابل للإزالة أو تصميم لا تؤذي الدماغ خلال التأثير. طريقة بديلة هي لبناء اثنين من نصائح مع نفس الطول؛ سوف طرف واحد المغلفة بالمطاط سيليكون والطرف الآخر يكون المعدنية، والتي سوف تكوناستخدام معلومات سرية التحقيق. يجب أن تنتقل النصائح اثنين من بين المواقع، وتؤثر.

مراقبة الأعراض فاقدا للوعي وجيزة الماوس على الفور بعد أثر. وكما ذكر أعلاه، فإن معظم أعراض ما بعد الارتجاج من الصعب أن نلاحظ على الفور في نموذج حيواني مختبر الفار. المرضى الارتجاج قد تواجه انقطاع وجيز للوعي بعد الاصابة. لإنشاء المعلمات إصابات ظاهرة، وكانت خسارة وجيزة من وعيه من أعراض المستخدمة لتقييم صحة هذا النموذج المصرف التجاري العراقي الارتجاج. يستخدم فقدان الوعي (LOC) عادة كمعايير لتصنيف شدة الإصابة في المرضى المصرف التجاري العراقي. في معظم هزات الرياضية ذات الصلة، ومدة الكونغرس هي أقل من دقيقة واحدة (14). عن طريق تحسين الظروف التجريبية، مثل سرعة تأثير ويسكن الوقت، والكونغرس هو أقل من 10 ثانية بعد أثر. في حالة تأثير الأمثل هو تأثير عمق 4 مم، 240 ميللي ثانية تسكن الوقت، و 4 م / ث سرعة التأثير. زيادة سرعة التأثير ويسكنالوقت قد يسبب الحاد زيادة الضغط داخل الجمجمة على كمية كبيرة من الوقت، مما قد يؤدي إلى وقوع إصابات الدماغ الحادة أو الموت فورا من الاكتئاب في الجهاز التنفسي. سوف الفئران تفقد وزن الجسم بعد كل تأثير، ولكن سوف تستعيد الوزن بعد 72 ساعة من الانتعاش. ويتم اختيار فترات متكررة 72 ساعة لتقليد فترة نقاهة للرياضيين المصابين قبل ان يعود الى الرياضة.

بجانب فقدان الوعي بالقضايا والجهاز التنفسي، ويمكن للأعراض عيادة ارتجاج تشمل التشنجات والصداع، والدوخة، والغثيان والقيء. في النموذج، قد يكون الألم في الدماغ ومعظم أعراض غير مريحة للحيوانات. الجسم درجة حالة والألم وصف الفئة يجب أن تستخدم نقاط النهاية إنسانية. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي النظر الأخرى النهاية عصبية معينة مثل الاستيلاء غير المنضبط، والسلوك تدور من تلقاء أنفسهم، وفقدان التوازن وعدم القدرة على المشي أو الوقوف صفا والنهاية إنسانية rCHI محددة. لأن هذا هو نموذج إصابة خفيفة، وعادة لا جوهريولوحظت علامات ficant من الألم بعد كل تأثير. المسكنات ليست ضرورية عادة في هذا المستوى من إصابات الدماغ. يوفر هذا البروتوكول خطوات رئيسية مفصلة لنمذجة TBI معتدل الارتجاج المتكرر. ويمكن تعديل سرعة وعمق كل أثر اعتمادا على شدة المطلوب من الاصابة. يستخدم هذا النموذج نظام تأثير المغناطيس الإلكترونية لتقديم الآثار. أنها مستقرة مع سرعة تسيطر على وجه التحديد، زمن السكون، وعمق التشوه. ومع ذلك، لأنها لإصابة في الرأس المغلقة دون حج القحف، فإنه من المستحيل بالضبط موقف أثر مخ الفأر باستخدام الإحداثيات التجسيمي. أيضا تبديل نصائح تأثير / التحقيق قد يؤدي إلى تحول موقع التأثير، وهو السبب الرئيسي للإصابات غير متناسقة. وبالنظر إلى إصابة منتشر وارتجاج اتضح كما هو متوقع، لا يزال هذا النموذج الدقيق والسهل السيطرة عليها.

هذا النموذج هو مفيد لاستخدامها لدقتها والبساطة في تحديد الآثار المترتبة على الأثرإصابة خفيفة في الدماغ ذات الصلة ب، لا سيما ارتجاج الرياضية ذات الصلة. وهو بمثابة منصة للالدراسات قبل السريرية مثل استكشاف المؤشرات الحيوية التشخيصية والتنبؤية وكذلك اختبار الأجهزة الطبية والأدوية والعلاج الجيني الحل. ويمكن أيضا أن هذا النموذج أن تستخدم للدراسات اعتلال الدماغ الصدمة المزمن (كوت)، والذي هو حاليا تشخيصها إلا من خلال امتحان عصبية مرضية بعد الوفاة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
anesthesia machine Eagle Eye Anesthesia, Inc Model 150  anesthesia
Electromagnetic Impactor LeicaBiosystems Impact One Stereotaxic Impactor perform impaction
Digital Stereotaxic instrument LeicaBiosystems 39462501 mount mouse and positioning tips
Sicilone rubber-coated metal tip Precision Tool & Engineering, Gainesvill FL custom-made impact tip
Lithium Ion All-in-One Trimmer WAHL Home Products 9854-600 shave mouse hair
paper clips custom-made probe tip
Cotton tipped applicators MEDLINE MDS202055 scrub head with saline
Tissue Tek O.C.T. ASKURA FINETEK USA INC 4583 tissue embedding
anti-GFAP Dako CA93013 antibody for IHC
anti Ferritin Sigma F6136 antibody for IHC
VECTASTAIN Elite ABC  kit Vector laboratories PK-6100 IHC detection system
Permount Mounting Medium Fisher Scientific SP15-100
Aperio XT ScanScope scanner Leica Microsystems Inc, slides scanning
Leica AutoStainer XL Leica the pathology Company ST2010 H&E staining
DAB  sigma D3939 IHC detection system

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Baugh, C. M., et al. Chronic traumatic encephalopathy: neurodegeneration following repetitive concussive and subconcussive brain trauma. Brain Imaging Behav. 6, (2), 244-254 (2012).
  2. McKee, A. C., et al. Chronic traumatic encephalopathy in athletes: progressive tauopathy after repetitive head injury. J. Neuropathol Exp Neurol. 68, (7), 709-735 (2009).
  3. Petraglia, A. L., Dashnaw, M. L., Turner, R. C., Bailes, J. E. Models of mild traumatic brain injury: translation of physiological and anatomic injury. Neurosurgery. 75 Suppl, (4), S34-S49 (2014).
  4. Goldstein, L. E., McKee, A. C., Stanton, P. K. Considerations for animal models of blast-related traumatic brain injury and chronic traumatic encephalopathy. Alzheimers Res Ther. 6, (5), 64 (2014).
  5. Gold, E. M., et al. Functional assessment of long-term deficits in rodent models of traumatic brain injury. RegenMed. 8, (4), 483-516 (2013).
  6. Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. Animal models of traumatic brain injury. Nat Rev Neurosci. 14, (2), 128-142 (2013).
  7. Luo, J., et al. Long-term cognitive impairments and pathological alterations in a mouse model of repetitive mild traumatic brain injury. Front Neurol. 5-12 (2014).
  8. Yang, Z., et al. Temporal MRI characterization, neurobiochemical and neurobehavioral changes in a mouse repetitive concussive head injury model. Sci Rep. 10, (5), 11178 (2015).
  9. Zhang, J., et al. Inhibition of monoacylglycerol lipase prevents chronic traumatic encephalopathy-like neuropathology in a mouse model of repetitive mild closed head injury. J Cereb Blood Flow Metab. 35, (3), 443-453 (2015).
  10. Petraglia, A. L., et al. The spectrum of neurobehavioral sequelae after repetitive mild traumatic brain injury: a novel mouse model of chronic traumatic encephalopathy. J Neurotrauma. 31, (13), 1211-1224 (2014).
  11. Lumpkins, K. M., Bochicchio, G. V., Keledjian, K., Simard, J. M., McCunn, M., Scalea, T. Glial fibrillary acidic protein is highly correlated with brain injury. J Trauma. 65, (4), 778-782 (2008).
  12. Yang, Z., Wang, K. K. Glial fibrillary acidic protein: from intermediate filament assembly and gliosis to neurobiomarker. Trends Neurosci. 38, (6), 364-374 (2015).
  13. Liu, H., et al. Increased expression of ferritin in cerebral cortex after human traumatic brain injury. Neurol Sci. 34, (7), 1173-1180 (2013).
  14. Jordan, B. D., et al. The clinical spectrum of sport-related traumatic brain injury. Nat Rev Neurol. 9, (4), 222-230 (2013).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics