थकान के एक माउस मॉडल परिधीय विकिरण से प्रेरित

Cancer Research

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Summary

हम एक विधि लक्षित परिधीय विकिरण का प्रयोग चूहों में थकान की तरह व्यवहार के लिए प्रेरित करने का वर्णन है। चुने गए गैर घातक विकिरण खुराक स्वैच्छिक पहिया चल रहा है गतिविधि में एक सप्ताह तक कमी आती है।

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Wolff, B. S., Renner, M. A., Springer, D. A., Saligan, L. N. A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation. J. Vis. Exp. (121), e55145, doi:10.3791/55145 (2017).

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Abstract

कैंसर से संबंधित थकान (सीआरएफ) एक चिंताजनक है और महंगा शर्त यह है कि अक्सर विकिरण चिकित्सा सहित कैंसर उपचार, प्राप्त रोगियों को प्रभावित करता है। यहाँ हम एक विधि लक्षित परिधीय विकिरण का प्रयोग चूहों में थकान की तरह व्यवहार के लिए प्रेरित करने का वर्णन है। उचित परिरक्षण के साथ, विकिरण माउस के पेट के निचले भाग / श्रोणि क्षेत्र लक्षित करता है, मस्तिष्क बख्शते, श्रोणि के कैंसर के साथ व्यक्तियों द्वारा प्राप्त विकिरण उपचार मॉडल करने के प्रयास में। हम एक विकिरण खुराक है कि चूहों, स्वैच्छिक पहिया चल गतिविधि (VWRA) द्वारा मापा में थकान की तरह व्यवहार के लिए प्रेरित करने के लिए पर्याप्त है, स्पष्ट रुग्णता के कारण के बिना उद्धार। चूंकि पहिया चल चूहों में एक सामान्य, स्वैच्छिक व्यवहार है, इसके उपयोग अन्य व्यवहार परीक्षण या जैविक उपायों पर थोड़ा confounding प्रभाव होना चाहिए। इसलिए, पहिया चल थकान के व्यवहार और जैविक संबंध को समझने में एक व्यवहार्य परिणाम उपाय के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। सीआरएफ अक्सर सह के साथ एक जटिल स्थिति हैरुग्णता, और संभावना कैंसर और इसके विभिन्न उपचार के लिए दोनों से संबंधित कारण है। विधियों के इस पत्र में वर्णित विकिरण प्रेरित परिवर्तन है कि सीआरएफ के विकास के लिए और अधिक आम तौर पर योगदान की जांच, जैविक नेटवर्क है कि विकास और थकान की तरह एक सतही तौर पर ट्रिगर लेकिन केंद्रीय रूप से संचालित व्यवहार के हठ व्याख्या कर सकते हैं का पता लगाने के लिए उपयोगी होते हैं ।

Introduction

कैंसर से संबंधित थकान (सीआरएफ) एक चिंताजनक है और महंगा शर्त यह है कि अक्सर कैंसर के उपचार 1 प्राप्त रोगियों को प्रभावित करता है। थकान न हाल की गतिविधि के लिए आनुपातिक है और न ही बाकी के द्वारा क्रमशः समाप्त होता है, और यह मूड, प्रेरणा, ध्यान से संबंधित गड़बड़ी की एक विस्तृत विविधता के साथ जुड़ा हुआ है, और अनुभूति 2। सीआरएफ के जैविक कारणों, अज्ञात है, हालांकि यह कई मामलों में दिखाया गया है हीमोग्लोबिन का स्तर और विभिन्न हार्मोन प्रणालियों के समारोह के साथ कुछ मामलों में सूजन और साइटोकाइन स्तरों के साथ संबंध स्थापित करने के लिए है, यह भी (देखें Saligan एट अल। 3 जैविक की समीक्षा के लिए सीआरएफ का अध्ययन)।

नियंत्रित पशु मॉडल का उपयोग अध्ययन व्यवहार और इस जटिल शर्त के साथ जुड़े जीव विज्ञान को समझने के लिए जरूरी हैं। जबकि ट्यूमर से संबंधित 4 या कीमोथेरेपी से संबंधित 5, 6 वसाigue कृंतक मॉडल में अध्ययन किया गया है, सीआरएफ के एटियलजि उपचार के लिए विशेष हो सकता है। विकिरण चिकित्सा से संबंधित सीआरएफ की जांच करने के लिए, हमारे समूह ने हाल ही में विकिरण प्रेरित थकान 7 के एक माउस मॉडल विकसित किया है। दिमाग या शरीर के कुल विकिरण 8, 9 से जुड़े मौजूदा सीआरएफ मॉडल के विपरीत, इस मॉडल कैसे केंद्रीय रूप से संचालित व्यवहार में परिवर्तन, थकान की तरह, एक सतही तौर-लक्षित विकिरण प्रक्रिया से शुरू हो सकता पड़ताल।

यहाँ वर्णित प्रक्रिया विकिरण के साथ पेट के निचले भाग / श्रोणि क्षेत्र को लक्षित करने के नेतृत्व परिरक्षण का उपयोग करते हुए विकिरण चिकित्सा श्रोणि कैंसर के रोगियों को दिलाई मॉडल करने के लिए बनाया गया है। हालांकि, सीसा परिरक्षण या प्रयोगात्मक जानवरों के लिए अपनी नियुक्ति के रिश्तेदार को संशोधित करके, इस प्रक्रिया में शरीर के अन्य भागों के विकिरण मॉडल करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। स्वैच्छिक पहिया चल गतिविधि (VWRA) थकान की तरह behavio को मापने के लिए प्रयोग किया जाता हैआर; क्योंकि यह एक स्वैच्छिक और सामान्य व्यवहार में 10 है, यह अन्य व्यवहार और जैविक परीक्षण की समवर्ती उपयोग की अनुमति चाहिए। हमने पाया है कि परिधीय विकिरण प्रकट रुग्णता 7 के कारण के बिना चूहों में VWRA कम करने के लिए पर्याप्त है। इस मॉडल के साथ भविष्य के प्रयोगों के प्रतिरक्षा और अन्य जैविक सिगनल पर परिधीय विकिरण, साथ ही केंद्रीय तंत्रिका प्रणाली है कि सीआरएफ के साथ जुड़े घाटे का उत्पादन कर सकते में नीचे की ओर परिवर्तन के प्रभावों का पता चलता मदद मिल सकती है।

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Protocol

आचार कथन: इस अध्ययन में राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच) पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। जानवर से निपटने और अध्ययन के परिणामों की माप में भाग ले रही सभी जांचकर्ताओं को ठीक से पशु की देखभाल और उपयोग की एनआईएच कार्यालय और राष्ट्रीय हृदय, फेफड़े और रक्त संस्थान Murine phenotyping कोर द्वारा प्रशिक्षित किया गया। पशु परीक्षण, आवास, पर्यावरण और इस अध्ययन में इस्तेमाल की स्थिति के सभी पहलुओं और प्रयोगशाला पशु 11 के उपयोग की देखभाल के लिए गाइड के अनुपालन में थे।

1. आवास और प्रायोगिक पशुओं

नोट: हाउस पुरुष C57BL / 6 चूहों (लगभग पांच सप्ताह के आगमन पर वर्ष) को व्यक्तिगत रूप से प्रयोग के दौरान और भोजन और पानी के लिए जी भरकर पहुँच प्रदान करते हैं। सभी पिंजरों प्रकाश चरण 6 बजे 6 बजे और अंधेरे चरण में शुरुआत के साथ एक 12:12 ज प्रकाश अंधेरे चक्र पर रखा जाता है।

  1. चूहों को पहचानें और उन्हें अलग-अलग मानक हवादार करने के लिए आवंटितडी माउस पिंजरों। 24 घंटे वसूली के लिए पहचान की प्रक्रिया के बाद की अनुमति दें।
    नोट: पूंछ टैटू संभावना है कि एक कान टैग चल रहे एक पहिया में पकड़े सकता है समाप्त करने के लिए पहचान का एक साधन के रूप में सिफारिश की है। प्रत्येक माउस की पूंछ पर एक नंबर टैटू, नंबर माउस के पिंजरे पर लिखा मिलान पूंछ पर संख्या के साथ।
  2. चूहों में कम से कम तीन और दिनों के लिए उनके पिंजरों के लिए acclimate करने की अनुमति दें, प्रति दिन तीन मिनट की अवधि के लिए धीरे प्रत्येक माउस से निपटने।

2. व्हील दशानुकूलन और आधारभूत रनिंग

  1. व्यक्तिगत VWRA पिंजरों, सतत रिकॉर्डिंग के लिए एक इलेक्ट्रॉनिक काउंटर से जुड़ा एक चल पहिया के साथ सुसज्जित प्रत्येक के लिए चूहों का परिचय।
    नोट: सभी पहिया काउंटरों एक भी यूएसबी इंटरफेस के माध्यम से एक कंप्यूटर से कनेक्ट (देखें सामग्री सूची)। कंप्यूटर सॉफ्टवेयर पहिया घुमाव की संख्या की गणना करता है, दूरी की यात्रा की, और निर्दिष्ट कुल duratio के प्रत्येक निर्दिष्ट समय अंतराल के पार औसत गतिएन। एक बार रिकॉर्डिंग बंद हो जाता है, डेटा स्वचालित रूप से दोनों पाठ के रूप में और स्प्रेडशीट के रूप में सहेज कर रहे हैं।
  2. कंप्यूटर सॉफ्टवेयर इंटरफेस के माध्यम से VWRA की रिकॉर्डिंग आरंभ करें। कम से कम पांच दिनों के लिए एक घंटे के लिए अंतराल और अवधि रिकॉर्डिंग सेट करें। कम से कम पांच दिनों के लिए VWRA रिकॉर्डिंग जारी।
    नोट: 2.2 कदम के अंत में, सभी चूहों दैनिक पहिया चल गतिविधि का एक अपेक्षाकृत अनुरूप राशि को प्राप्त करना चाहिए। यदि नहीं, तो पहचान करने और किसी भी outliers बाहर।
  3. बंद करो VWRA सॉफ्टवेयर इंटरफेस के माध्यम से रिकॉर्डिंग, और उनके मानक पिंजरों (पहियों के बिना चल रहे पिंजरों) 1.1 चरण में वर्णित करने के लिए चूहों वापसी।
  4. या तो दिखावा विकिरणित नियंत्रण या किरणित समूहों में चूहों अनियमित करें।

3. विकिरण

नोट: सभी चूहों के लिए निम्नलिखित कदम तीन अनुक्रमिक दिनों के लिए प्रति दिन में एक बार, दोनों समूहों में प्रदर्शन करना। प्रत्येक दिन एक ही क्रम में चूहों को समझो।

  1. की intraperitoneal इंजेक्शन द्वारा प्रत्येक माउस anesthetizeएक ketamine (100 मिलीग्राम / किग्रा) और xylazine (10 मिलीग्राम / किग्रा) मिश्रण।
  2. एक पैर की अंगुली चुटकी के साथ संज्ञाहरण की पुष्टि करें और जब तक संज्ञाहरण के तहत सूखापन को रोकने के लिए आंखों पर मरहम का उपयोग करें।
  3. एक का नेतृत्व परिरक्षण डिवाइस में anesthetized माउस स्थानांतरण। केवल इतना है कि पेट के निचले भाग / श्रोणि क्षेत्र अवगत कराया है परिरक्षण में माउस की व्यवस्था।
    नोट: परिरक्षण "," बक्से में बीच है कि माउस के एक छोटे से, लक्षित क्षेत्र के लिए विकिरण जोखिम की अनुमति देता है एक संकीर्ण खुली जगह के साथ दो नेतृत्व से बना है (चित्रा 1 देखें)।
  4. परिरक्षण के भीतर स्थिति में माउस की पूंछ के आधार सुरक्षित करने के लिए चिकित्सा टेप का प्रयोग करें।
    नोट: 3.4 कदम वैकल्पिक है, लेकिन ऐसा करने से यह सुनिश्चित करें कि माउस की स्थिति निम्न चरण के दौरान कोई बदलाव नहीं होता कर सकते हैं।
  5. irradiator में परिरक्षण डिवाइस परिवहन, यह सुनिश्चित करना है कि परिरक्षण के भीतर पशु स्थिति बनाए रखा है।
  6. माउस विकिरण समूह में है, तो एक डॉस पर 800 cGy देनेई के बारे में 110 cGy / मिनट की दर। माउस दिखावा विकिरण नियंत्रण समूह में है, तो बराबर समय के लिए निष्क्रिय irradiator में माउस छोड़ दें।
    नोट: इष्टतम irradiator सेटिंग्स विशेष डिवाइस पर निर्भर करेगा। 110 cGy / एक 137 सीज़ियम स्रोत से बचाया मिनट की खुराक दर यहां इस्तेमाल irradiator के केंद्रीय खुराक दर है। जोखिम समय 800 cGy के वांछित कुल खुराक तक पहुँचने के लिए समायोजित किया गया।
  7. irradiator और परिरक्षण से माउस निकालें, और फिर अपने मूल, मानक पिंजरे 1.1 चरण में उल्लेख करने के लिए इसे वापस।
  8. लगातार माउस पर नजर रखने के लिए जब तक यह पर्याप्त होश आ गया है स्टर्नल लेटना बनाए रखने के लिए।

4. विकिरण प्रेरित थकान मापन

  1. विकिरण की लगातार तीन दिनों के पूरा होने के बाद दिन, अपनी व्यक्तिगत VWRA 2.1 चरण में वर्णित पिंजरों को चूहों हस्तांतरण।
  2. रिकार्ड VWRA, 2.2 कदम के रूप में वर्णित यहाँ रिकॉर्डिंग की स्थापना को छोड़कर,अधिक से अधिक 15 दिनों की अवधि। 15 दिन के अंत में, मैन्युअल सॉफ्टवेयर इंटरफेस के माध्यम से रिकॉर्डिंग VWRA बंद करो।
    नोट: प्रत्येक रिकॉर्डिंग अवधि से डेटा स्वचालित रूप से स्प्रेडशीट, जिनमें से प्रत्येक रोटेशन, दूरी, और गति सभी जानवरों (कॉलम) और सभी में अंतराल (पंक्तियों) रिकॉर्डिंग की अवधि के दौरान के लिए माप शामिल है के रूप में सहेज कर रहे हैं। पूर्व विकिरण VWRA के लिए एक, और बाद विकिरण VWRA: एक प्रयोग के अंत में, वहाँ दो रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर द्वारा उत्पन्न स्प्रेडशीट हैं।

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Representative Results

चूहों के तीन बैचों प्रोटोकॉल ऊपर वर्णित के माध्यम से चलाए जा रहे थे। 16 दिखावा और 20 किरणित (2,400 cGy, 3 एक्स 800 cGy / दिन) चूहों की कुल रहे थे। विकिरण की लगातार तीन दिनों के बाद, विकिरणित समूह काफी दिखावा की तुलना में कम हो VWRA दिखाया (मिश्रित दोहराया उपायों एनोवा: विकिरण उपचार, एफ 1,13 = 19.233, पी <0.001 का मुख्य प्रभाव)। प्रभाव सबसे कम मतलब VWRA दूरी विकिरण (2A चित्रा) के बाद तीसरे दिन होने वाली के साथ विकिरण (सरल मुख्य प्रभाव, पी <Bonferroni सुधार के साथ 0.05) के बाद पहले सात दिनों के लिए महत्वपूर्ण था। पर दिनों 25 और 26, कोई डेटा अन्य व्यवहार परीक्षण के कारण एकत्र किए गए थे।

चित्रा 2 बी पहले से विकिरण के बाद करने के लिए VWRA में परिवर्तन के वितरण से पता चलता। परीक्षण किया चूहों के बहुमत थकान जैसे लक्षण से पता चला है (एक कमी मैंn पहिया चल गतिविधि), वहाँ चूहों कि थोड़ा परिवर्तन या यहां तक कि VWRA में वृद्धि (चित्रा 2 बी, कम साजिश) से पता चला की एक छोटी संख्या थी। इस परिवर्तनशीलता के कारण, छोटा सा नमूना आकार के साथ प्रयोगों थकान की तरह व्यवहार पर कब्जा नहीं कर सकता है।

आकृति 1
चित्रा 1: लीड बचाते उपकरण। परिरक्षण, जो घर में विकसित किया गया था, दो समान बक्से के रूप में इकट्ठा किया है। चूहे केवल अपने श्रोणि नेतृत्व बक्से के बीच की खाई में उजागर क्षेत्र के साथ रखा जाता है। (ए) इसके कंटेनर में परिरक्षण की एक तस्वीर। नेतृत्व बक्से polystyrene फोम से घिरे हैं उन्हें स्थिति है, जो 10.5 इंच व्यास plexiglass कंटेनर कि irradiator के लिए डिजाइन किया गया था से घिरा हुआ है में धारण करने के लिए। (बी) के नेतृत्व परिरक्षण के योजनाबद्ध। लीड परिरक्षण नेतृत्व की गिरफ्तारी के 1 इंच मोटी ब्लॉकों के शामिल हैदो बक्से के रूप में बताया गया। प्रत्येक बॉक्स में चार टुकड़ों से बना है: ऊपर और नीचे के टुकड़े 4.25 "एक्स 3" एक्स 1 कर रहे हैं ", पक्ष टुकड़े कर रहे हैं ~ 0.5 जबकि" एक्स 3 "x 1"। जब इकट्ठे, प्रत्येक बॉक्स के बाहरी आयामों 4.25 "एक्स 3" एक्स 3 कर रहे हैं ", और वहाँ एक 1" उन दोनों के बीच की खाई। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2: डेली स्वैच्छिक व्हील रनिंग दूरी। (ए) औसत कुल दूरी प्रत्येक दिन चूहों द्वारा चलाए (एन = 16 नियंत्रण, 20 विकिरणित)। 16. दिन 25 और 26 पर चूहों दिन 14, 15 पर किरणित रहे थे, और, कोई डेटा अन्य व्यवहार परीक्षण के कारण एकत्र किए गए थे। त्रुटि सलाखों मतलब की मानक त्रुटि दिखा। * पी <0.05। (बी) VWRA में परिवर्तन की histograms, टी का मतलब के रूप में यहाँ परिभाषितशून्य से तीन दिन का मतलब तुरंत विकिरण के बाद (दिन 17 - 19) - hree दिनों तुरंत विकिरण (13 दिन 11) से पहले। सकारात्मक संख्या VWRA में कमी का संकेत मिलता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

हम एक प्रोटोकॉल को निशाना बनाया परिधीय विकिरण का उपयोग कर रुग्णता या मृत्यु दर confounding बिना चूहों में VWRA की कमी के लिए प्रेरित करने का वर्णन किया है। महत्वपूर्ण बात है, एक सरल परिरक्षण डिवाइस एक वांछित क्षेत्र लगातार निशाना बनाने के लिए, श्रोणि कैंसर के रोगियों द्वारा प्राप्त विकिरण उपचार नकल उतार इस प्रोटोकॉल में विकिरण की अनुमति देता है। दिमाग या शरीर के कुल विकिरण 8, 9 से जुड़े मौजूदा सीआरएफ मॉडल के विपरीत, इस मॉडल कैसे एक सतही तौर-लक्षित विकिरण प्रक्रिया केंद्रीय रूप से संचालित थकान व्यवहार को प्रभावित कर सकते हैं की पड़ताल। हमारे प्रतिनिधि परिणामों में, हम बताते हैं कि इस तरह परिधीय में दिया विकिरण लगभग एक सप्ताह बाद एक पूरी तरह ठीक होने के साथ थकान की तरह व्यवहार का निर्माण करने के लिए पर्याप्त है।

थकान का एक उपाय के रूप में, VWRA न्यूनतम प्रशिक्षण और प्रयोग के समय की आवश्यकता होती है, दूरी और प्रति दिन 24 घंटे के लिए गति की सरल और उद्देश्य मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है। यह करता हैतों अलग-अलग पिंजरों में आवास चूहों की आवश्यकता होती है, सुविधा की जगह एक संभव सीमित कारक बना। व्यक्तिगत आवास माउस व्यवहार को प्रभावित कर सकते हैं, संभवतः चिंता 12 या 13 सक्रियता के लिए अग्रणी, वहाँ सबूत है कि पहिया चल रहे इन नकारात्मक प्रभावों को कम कर सकते हैं 14 है। व्हील चल व्यवहार भी कम इंट्रा-माउस परिवर्तनशीलता और शारीरिक गतिविधि 15 की अन्य आकलन की तुलना में अधिक से अधिक reproducibility है दिखाया गया है। हालांकि, यह संभव है कि शारीरिक थकान अधिक चुनिंदा, स्वैच्छिक गतिविधि के अलावा अन्य तरीकों से कब्जा किया जा सकता है के बाद से स्वैच्छिक गतिविधि प्रेरणा या कड़ाई से शारीरिक थकान 16 के अलावा अन्य कारकों पर निर्भर हो सकता है। आगे के प्रयोगों में इस तरह के एक दृढ़ संकल्प करना आवश्यक होगा।

हालांकि, वहाँ प्रोटोकॉल जो सफलता के लिए महत्वपूर्ण हैं के भीतर कई बातें हैं। यह महत्वपूर्ण है कि चूहों recove के लिए समय अनुमति दी जाती हैके रूप में विख्यात एक नई सुविधा में आगमन, और उस से निपटने पर आर इस अवधि के दौरान किया जा। इन प्रक्रियाओं के तनाव और चिंता है, जो स्वैच्छिक गतिविधि 17 प्रभावित कर सकते हैं कम। सिर्फ इसलिए नहीं कि रिक्त स्थान बंद (लीड परिरक्षण) के भीतर विवश किया जा रहा जानवरों 18 के लिए एक महत्वपूर्ण तनाव हो सकता है, लेकिन यह भी विकिरण के अन्य अंगों / ऊतकों की अनावश्यक जोखिम से बचने के लिए विकिरण की प्रक्रिया के दौरान पूरा संज्ञाहरण बनाए रखने में भी महत्वपूर्ण है। यह सुनिश्चित करने के लिए कि एनेस्थेटिक की खुराक उम्र और चूहों का तनाव इस प्रोटोकॉल के विकिरण भाग शुरू करने से पहले के लिए पर्याप्त है इसलिए महत्वपूर्ण है। इसके अतिरिक्त, पांच दिनों की एक न्यूनतम के लिए पहियों के चलने के लिए चूहों के दशानुकूलन विश्लेषण के लिए विकिरण और उपयुक्त डेटा से पहले स्थिर व्यवहार प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है।

असामान्य VWRA संख्या निवारण के लिए VWRA पिंजरों नियमित रूप से संभावित समस्याओं के लिए निगरानी की जानी चाहिए। examp के लिएle, बिस्तर सामग्री पर या सीधे पहिया के नीचे ढेर हो जाते हैं, या अगर चल पहियों पर्याप्त साफ नहीं कर रहे हैं, इस प्रतिरोध पहिया कताई करने के लिए जोड़ सकते हैं और गतिविधि के स्तर माप कम कर सकते हैं। इसके अतिरिक्त, के बाद से सबसे पहिया चल अंधेरे घंटे 7 के दौरान होता है, VWRA प्रकाश चक्र में उतार-चढ़ाव के प्रति संवेदनशील हो सकता है, और देखभाल प्रकाश चक्र नियमित रूप से और निर्बाध रखने के लिए लिया जाना चाहिए।

इस प्रोटोकॉल विकिरण के विभिन्न स्तरों के उपयोग को समायोजित कर सकते हैं। उदाहरण के लिए, हम इस प्रोटोकॉल में 800 cGy साथ खुराक के तीन दिनों में वर्णित है, लेकिन हम 600 cGy खुराक 7 में से तीन दिनों का उपयोग थकान का थोड़ा निचले स्तर को देखा है। एक विशेष विकिरण खुराक के प्रभाव को चूहों 19 के तनाव पर निर्भर करेगा, irradiator 20 की खुराक दर, कई दिनों से 21 से अधिक विभाजन, और संभावना क्षेत्र विस्तार के आकारपरिरक्षण के नीचे osed। 1,000 cGy पूरे शरीर विकिरण की एकल खुराक में वृद्धि हुई मृत्यु दर 22 बिना C57 / BL6 चूहों में इस्तेमाल किया गया है, लेकिन सावधानियों विकिरण की है कि उच्च खुराक सुनिश्चित करने के लिए रुग्णता के कोई लक्षण पैदा नहीं करते लिया जाना चाहिए।

विकिरण खुराक इसके अलावा, कई अन्य कदम हाथ में प्रयोग के अनुरूप संशोधित किया जा सकता है। लीड परिरक्षण या परिरक्षण के भीतर पशु की नियुक्ति को संशोधित करके, इन तरीकों में विकिरण के साथ शरीर के अन्य क्षेत्रों को लक्षित करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। हालांकि, परिरक्षण डिवाइस में परिवर्तन dosimetry के साथ मान्य किया जाना चाहिए कि विकिरण परिरक्षित क्षेत्र घुसना नहीं करता है सुनिश्चित करने के लिए। इस प्रोटोकॉल भी, व्यवहार उपायों की एक विस्तृत विविधता को शामिल करने के रूप में स्वैच्छिक चल गतिविधि व्यवहार प्रयोगों है कि अधिक शारीरिक या मानसिक रूप से मांग कर रहे हैं रोकता नहीं होगा अनुकूलित किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, सीआरएफ अक्सर संज्ञानात्मक घाटे 3 के साथ होता है; भविष्यप्रयोगों भूमिका जो विकिरण चिकित्सा इस संघ में खेल सकते हैं पता लगाने सकता है। पहिया चल गतिविधि की उपस्थिति, जब अतिरिक्त व्यवहार परीक्षण के प्रदर्शन को ध्यान में रखा जाना चाहिए, क्योंकि VWRA कई मायनों 16 में शरीर विज्ञान और व्यवहार को प्रभावित कर सकते हैं।

800 cGy या उससे कम की विकिरण खुराक के साथ, चूहों संज्ञाहरण से उबरने के बाद विशेष देखभाल की जरूरत नहीं करना चाहिए। हालांकि, विकिरण प्रक्रिया और जिसके परिणामस्वरूप थकान संभवतः इस तरह के अतिरिक्त व्यवहार परीक्षण या दवा उपचार के रूप में अन्य उपायों के साथ बातचीत कर सकते हैं। जानवरों जब भी फेरबदल या इस वर्णित प्रक्रिया को जोड़ने तुरंत विकिरण के बाद दिन पर बारीकी से नजर रखी जानी चाहिए। चूहों के विभिन्न प्रकारों के भी विकिरण से 19 अलग संवेदनशीलता दिखा सकते हैं, इसलिए सावधानी warranted है जब C57BL / 6 से अन्य नस्लों के प्रयोग से।

इस तकनीक विकिरण में प्रतिनिधित्व करने के लिए बनाया गया है, जबकिपेश थकान, यह जटिल सीआरएफ अवधारणा का केवल एक घटक है। सीआरएफ एक शर्त संभावना कई कारण हैं और मरीजों को कैंसर है और अक्सर कई उपचार प्राप्त है कि में होता है। सीआरएफ की समझ इसलिए ट्यूमर असर चूहों के साथ और ऐसे रसायन चिकित्सा या हार्मोन थेरेपी के रूप में अन्य उपचार के साथ प्रयोगों के सेट की आवश्यकता हो सकती है। जैविक और व्यवहार परीक्षण में इन चर शामिल शोधकर्ताओं की अनुमति इस जटिल हालत के लिए उनके योगदान की पहचान करेगा। माउस मॉडल यहाँ वर्णित मदद मिल सकती है सीआरएफ में विकिरण की विशिष्ट भूमिका को समझते हैं और संभावित चिकित्सा विज्ञान का विकास।

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Disclosures

इस शोध अंदर का रिसर्च, नर्सिंग अनुसंधान के राष्ट्रीय संस्थान, राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के प्रभाग द्वारा समर्थित किया गया।

Acknowledgments

लेखकों उदारता murine phenotyping तरीकों में उसकी विशेषज्ञता को साझा करने के लिए और उसके लिए चल रहे तकनीकी सहायता के लिए राष्ट्रीय हृदय, फेफड़े और रक्त संस्थान (NHLBI) के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के (एनआईएच) के मिशेल एलेन का शुक्रिया अदा करने के लिए, के रूप में अच्छी तरह के रूप में चाहते हैं हमें परिरक्षण डिवाइस विकसित करने में मदद के लिए NHLBI के टिमोथी हंट। इस अध्ययन एनआईएच के नर्सिंग अनुसंधान, और सत्यापन के परीक्षण के हिस्से के राष्ट्रीय संस्थान के अंदर का रिसर्च डिवीजन के द्वारा समर्थित है कैंसर विज्ञान से अनुदान सोसायटी फाउंडेशन नर्सिंग द्वारा समर्थित है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
C57BL/6 Mice Charles River Strain code 027 (http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/c57bl-6n-mouse)
Ketamine HCl Putney 100 mg/mL stock solution
Xylazine HCl Lloyd Laboratories 100 mg/mL stock solution
Rodent Tattoo System AIMS ATS-3 http://animalid.com/lab-animal-identification-systems/ats-3-general-rodent-tattoo-system
Lead Shielding Apparatus (custom made) One-inch thick lead shielding arranged as two boxes with a one-inch thick gap between them for targeted irradiation
Plexiglass shielding container (custom made) Plexiglass container filled with styrofoam. Styrofoam cutouts hold the lead shielding in place.
GammaCell 40 Exactor Best Theratronics http://www.theratronics.ca/product_gamma40.html
RAD Disk Ultra Best Theratronics http://www.theratronics.ca/product_rad.html
Mouse Single Activity Wheel Chamber Lafayette Instrument Company #80820 http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=980
Activity Wheel Counter for Computer Monitoring Lafayette Instrument Company #86061 http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1052
Modular Cable for Wheel Counters Lafayette Instrument Company #86051-7 http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1046
USB Computer Interface for Activity Wheel Counters Lafayette Instrument Company #86056A http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1047
Activity Wheel Monitor Software Lafayette Instrument Company #86065 http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1053

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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