Entrevista: El VIH-1 La escisión del ADN proviral uso de una recombinasa evolucionado

Biology

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Summary

Actual del VIH-1 estrategias de actuar para suprimir el ciclo de vida del virus, pero no efectiva erradicación de la infección. Aquí, se demuestra que una recombinasa diseñado de manera eficiente los impuestos especiales integrados de VIH-1 proviral del ADN del genoma de las células infectadas.

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Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

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Abstract

VIH-1 se integra en el cromosoma huésped de las células infectadas y persiste como un provirus flanqueado por repeticiones terminales largas. Las actuales estrategias de tratamiento dirigidas principalmente a las enzimas del virus o de fusión virus-célula, la supresión del ciclo de vida viral sin la erradicación de la infección. Dado que el provirus integrado no es víctima de estos enfoques, nuevas cepas resistentes del VIH-1 pueden surgir. Aquí, nos informan de que la ingeniería recombinasa Tre (ver evolución molecular de la recombinasa Tre, Buchholz, F., Instituto Max Planck de Biología Celular y Genética de Dresde) de manera eficiente los impuestos especiales del ADN integrado el VIH-1 proviral en el genoma de las células infectadas. Hemos producido loxLTR contiene pseudotipos viral y las células infectadas HeLa examinar si Tre recombinasa puede extirpar el provirus del genoma del VIH-1 las células humanas infectadas. Un virus de partículas de liberación de la línea celular fue clonado y transfectadas con un plásmido que expresa Tre o con un vector de control parental. Actividad recombinasa y la producción de virus fueron monitoreados. Todos los ensayos demostraron la eliminación eficiente de los provirus de las células infectadas sin visibles efectos citotóxicos. Estos resultados sirven como prueba de principio de que es posible desarrollar una recombinasa para dirigirse específicamente a un LTR del VIH-1 y que esta recombinación es capaz de extirpar el provirus VIH-1 del genoma del VIH-1-las células humanas infectadas.

Antes de una recombinación de ingeniería podría entrar en el campo terapéutico, sin embargo, importantes obstáculos que superar. Entre los temas más críticos, los que nos enfrentamos, es una entrega eficiente y segura a las células diana y la ausencia de efectos secundarios.

Protocol

Por favor, ver vídeos relacionados con el derecho de los Principios recombinasa específica de sitio (RSS) Tecnología y Evolución Molecular de la recombinasa Tre para obtener más información acerca de recombinación específica de sitio y la ingeniería del sitio de la especificidad de las enzimas recombinasa.

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Comments

10 Comments

  1. Please this must be in clinical trials asap..  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 24, 2008 - 7:26 PM
  2. Moving faster with recombinase. To tell the truth i don' t trust completely in the results of the research, any kind of research, humans trial included. Kp-1461 has been halted almost at the end of phase ² humans trial.. and now seems that kp-1461 can not work in vitro too.. The koronispharma managers have to pay for this.. A LOT OF MONEY.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2008 - 8:56 AM
  3. how can I download a video protocol in my flash disc?  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 20, 2008 - 4:36 PM
  4. Dear Anonymous, please feel free to contact us at support@jove.com and we could discuss your problem.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2008 - 6:34 PM
  5. How can I get in touch with doctor Joachim Hauber? I am HIV positive, there isn´t a single day ever since I was diagnosed this disease that I don´t feel like my life just ended. I would do anything to get cured.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 20, 2008 - 1:37 PM
  6. Reply
    Posted by: Anonymous
    November 3, 2008 - 8:41 AM
  7. Interesting presentation on remarkable research. Worthy of further discussion

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 23, 2009 - 1:48 PM
  8. Have you sequenced the host cell genome in the wild type control vs. the HIV-1 infected vs Tre recombinase cells to
    definitively show where the HIV-1 genome is inserting, and that it is removed?

    Reply
    Posted by: Douglas C.
    October 21, 2009 - 9:41 AM
  9. why can't i get an update on this work?? i have looked everywhere. it has gotten so little publicity..i dont get it

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2010 - 1:04 AM
  10. hi
    i need full text this article
    plz
    tanx

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2010 - 4:23 PM

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