Name: DNA的稳定同位素探测（DNA的SIP） (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-08-02T17:25:00.000+00:00
Duration: 14 min 57 s
Description: 学习DNA稳定同位素探测技术，通过密度梯度超速离心分离重同位素标记DNA，用于鉴定环境中活跃微生物群落并研究其代谢功能。该方法无需培养即可揭示未培养微生物的代谢特性。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

本工作获得了加拿大自然科学与工程研究理事会（NSERC）向 J.D.N. 提供的战略项目资助和发现基金。

<ol><li>Neufeld, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+stable-isotope+probing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protocols%22%5BJournal%5D)">DNA stable-isotope probing.</a> Nat. Protocols. 2, 860-866 (2007).</li>
<li>Neufeld, J. D., Boden, R., Moussard, H., Schäfer, H., Murrell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrate-specific+clades+of+active+marine+methylotrophs+associated+with+a+phytoplankton+bloom+in+a+temperate+coastal+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Substrate-specific clades of active marine methylotrophs associated with a phytoplankton bloom in a temperate coastal environment.</a> Appl. Environ. Microbiol. 74, 7321-7328 (2009).</li>
<li>Nercessian, O., Noyes, E., Kalyuzhnaya, M. G., Lidstrom, M. E., Chistoserdova, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+populations+active+in+metabolism+of+C1+compounds+in+the+sediment+of+Lake+Washington%2C+a+freshwater+lake%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Bacterial populations active in metabolism of C1 compounds in the sediment of Lake Washington, a freshwater lake.</a> Appl. Environ. Microbiol. 71, 6885-6899 (2005).</li>
<li>Padmanabhan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiration+of+13C-labelled+substrates+added+to+soil+in+the+field+and+subsequent+16S+rRNA+gene+analysis+of+13C-labelled+soil+DNA%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Respiration of 13C-labelled substrates added to soil in the field and subsequent 16S rRNA gene analysis of 13C-labelled soil DNA.</a> Appl. Environ. Microbiol. 69, 1614-1622 (2003).</li>
<li>Bernard, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+and+identification+of+soil+microbial+populations+actively+assimilating+carbon+from+13C-labelled+wheat+residue+as+estimated+by+DNA-+and+RNA-SIP+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Dynamics and identification of soil microbial populations actively assimilating carbon from 13C-labelled wheat residue as estimated by DNA- and RNA-SIP techniques.</a> Environ. Microbiol. 9, 752-764 (2007).</li>
<li>Haichar, elZ. ahar, F, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+cellulolytic+bacteria+in+soil+by+stable+isotope+probing%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Identification of cellulolytic bacteria in soil by stable isotope probing.</a> Environ. Microbiol. 9, 625-634 (2007).</li>
<li>Addison, S., McDonald, I., Lloyd-Jones, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+isotope+probing%3A+Technical+considerations+when+resolving+15N-labelled+RNA+in+gradients%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Microbiol.+Meth%22%5BJournal%5D)">Stable isotope probing: Technical considerations when resolving 15N-labelled RNA in gradients.</a> J. Microbiol. Meth. 80, 70-75 (2009).</li>
<li>Buckley, D. H., Huangyutitham, V., Hsu, S. -F., Nelson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+isotope+probing+with+15N+achieved+by+disentangling+the+effects+of+genome+G+%2B+C+content+and+isotope+enrichment+on+DNA+density%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Stable isotope probing with 15N achieved by disentangling the effects of genome G + C content and isotope enrichment on DNA density.</a> Appl. Environ. Microbiol. 73, 3189-3195 (2007).</li>
<li>Schwartz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+growing+microorganisms+in+soil+by+stable+isotope+probing+with+H218O%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of growing microorganisms in soil by stable isotope probing with H218O.</a> Appl. Environ. Microbiol. 73, 2541-2546 (2007).</li>
<li>Neufeld, J. D., Dumont, M. G., Vohra, J., Murrell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methodological+considerations+for+the+use+of+stable+isotope+probing+in+microbial+ecology%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Ecol%22%5BJournal%5D)">Methodological considerations for the use of stable isotope probing in microbial ecology.</a> Microb. Ecol. 53, 435-442 (2007).</li>
<li>Martineau, C., Whyte, L., Greer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+SYBR+safe+technique+for+the+sensitive+detection+of+DNA+in+cesium+chloride+density+gradients+for+stable+isotope+probing+assays%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Microbiol.+Meth%22%5BJournal%5D)">Development of a SYBR safe technique for the sensitive detection of DNA in cesium chloride density gradients for stable isotope probing assays.</a> J. Microbiol. Meth. 73, 199-202 (2008).</li>
<li>Bartram, A. K., Poon, C., Neufeld, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleic+acid+contamination+of+glycogen+used+in+nucleic+acid+precipitation+and+assessment+of+linear+polyacrylamide+as+an+alternative+co-precipitant%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Nucleic acid contamination of glycogen used in nucleic acid precipitation and assessment of linear polyacrylamide as an alternative co-precipitant.</a> Biotechniques. 47, 1019-1022 (2009).</li>
<li>Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revealing+the+uncultivated+majority%3A+combining+DNA+stable-isotope+probing%2C+multiple+displacement+amplification+and+metagenomic+analyses+of+uncultivated+Methylocystis+in+acidic+peatlands%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Revealing the uncultivated majority: combining DNA stable-isotope probing, multiple displacement amplification and metagenomic analyses of uncultivated Methylocystis in acidic peatlands.</a> Environ. Microbiol. 10, 2609-2622 (2008).</li>
<li>Neufeld, J. D., Chen, Y., Dumont, M. G., Murrell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marine+methylotrophs+revealed+by+stable-isotope+probing%2C+multiple+displacement+amplification+and+metagenomics%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Marine methylotrophs revealed by stable-isotope probing, multiple displacement amplification and metagenomics.</a> Environ. Microbiol. 10, 1526-1535 (2008).</li>
<li>Kalyuzhnaya, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+metagenomics+targets+specific+functional+types+in+complex+microbial+communities%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">High-resolution metagenomics targets specific functional types in complex microbial communities.</a> Nat. Biotechnol. 26, 1029-1034 (2008).</li>
<li>Binga, E. K., Lasken, R. S., Neufeld, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Something+from+%28almost%29+nothing%3A+the+impact+of+multiple+displacement+amplification+on+microbial+ecology%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+J%22%5BJournal%5D)">Something from (almost) nothing: the impact of multiple displacement amplification on microbial ecology.</a> ISME J. 2, 233-241 (2008).</li>
<li>Green, S. J., Leigh, M. B., Neufeld, J. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGreen%2C+SJ+%22Microbiology+of+Hydrocarbon+and+Lipid+Microbiology%22">Microbiology of Hydrocarbon and Lipid Microbiology</a>. Timmis, K. N. , Springer-Verlag. Berlin Heidelberg. 4137-4158 (2010).</li>
<li>Neufeld, J. D., Wagner, M., Murrell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Who+eats+what%2C+where+and+when%3F+Isotope-labelling+experiments+are+coming+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22ISME+J%22%5BJournal%5D)">Who eats what, where and when? Isotope-labelling experiments are coming of age.</a> ISME J. 1, 103-110 (2007).</li>
<li>Gallagher, E., McGuinness, L., Phelps, C., Young, L. Y., Kerkhof, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+shortens+the+incubation+time+needed+to+detect+benzoate-utilizing+denitrifying+bacteria+by+stable-isotope+probing%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">DNA shortens the incubation time needed to detect benzoate-utilizing denitrifying bacteria by stable-isotope probing.</a> Appl. Environ. Microbiol. 71, 5192-5196 Forthcoming.</li>
</ol>

未声明任何利益冲突。

稳定同位素探针（SIP）实验的合理设计对于获得高于背景未标记群落的标记DNA至关重要。有关样品孵育时间、底物浓度、孵育条件（如营养物、土壤含水量）、交叉喂养及重复设置等方面的考虑已在其他文献中讨论过10,18，我们建议读者在设计SIP孵育实验时参考这些出版物。与本实验方案相关的是，还需特别关注SIP密度梯度数据分析中的一些额外注意事项。由于超速离心过程本身的特性，必须设置适当的对照，例如纯培养物和天然底物孵育的样品，以确保在特定组分中出现或消失的条带并非实验流程本身所导致的人为假象。例如，DNA在超速离心梯度中可能在琼脂糖凝胶上不可见（图2A），但仍可能污染整个梯度的所有组分（图2B）。尽管M. capsulatus的条带在图2B所示凝胶的高密度组分（5–7）中最明显，但在最轻的组分（12）中仍观察到了相同的DGGE图谱。通过周密设计的对照实验，可以对SIP梯度组分数据进行准确解读。
由于某些设计良好的SIP实验的特性（例如接近原位的底物浓度、较短的孵育时间），同位素掺入量可能非常低10。此外，与实验...

<table><tbody><tr><td>溴酚蓝</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>BP115-25</td><td></td></tr><tr><td>氯化铯</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>BP210-500</td><td></td></tr><tr><td>乙醇，试剂级</td><td>试剂</td><td>西格玛-奥德里奇公司</td><td>652261</td><td></td></tr><tr><td>溴化乙锭</td><td>试剂</td><td>西格玛-奥德里奇公司</td><td>E1510</td><td></td></tr><tr><td>盐酸</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>351285212</td><td></td></tr><tr><td>线性聚丙烯酰胺</td><td>试剂</td><td>Applichem公司</td><td>A6587</td><td></td></tr><tr><td>聚乙二醇 6000</td><td>试剂</td><td>VWR国际公司</td><td>CAPX1286L-4</td><td></td></tr><tr><td>氯化钾</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>AC42409-0010</td><td></td></tr><tr><td>氯化钠</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>S2711</td><td></td></tr><tr><td>氢氧化钠颗粒</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>S3181</td><td></td></tr><tr><td>Tris碱</td><td>试剂</td><td>费舍尔科技公司</td><td>BP1521</td><td></td></tr><tr><td>暗读仪</td><td>设备</td><td>克莱尔化学公司</td><td>DR46B</td><td></td></tr><tr><td>微量离心机</td><td>设备</td><td>艾本德公司</td><td>5424 000.410</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop 2000</td><td>设备</td><td>费舍尔科技公司</td><td>361013650</td><td></td></tr><tr><td>输液泵</td><td>设备</td><td>布雷恩特里科学公司</td><td>N/A</td><td>型号：BSP&lt;br/&gt;订购详情请见 &lt;a href=&quot;http://www.braintreesci.com">www.braintreesci.com&lt;/a&gt;。</td></tr><tr><td>管路封口机</td><td>设备</td><td>贝克曼库尔特公司</td><td>358312</td><td></td></tr><tr><td>超速离心机</td><td>设备</td><td>贝克曼库尔特公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>超速离心机转子</td><td>设备</td><td>贝克曼库尔特公司</td><td>362754</td><td></td></tr><tr><td>紫外光源</td><td>设备</td><td>UVP公司</td><td>95-0017-09</td><td>任何紫外光源均可使用</td></tr><tr><td>紫外光防护面罩</td><td>设备</td><td>费舍尔科技公司</td><td>114051C</td><td></td></tr><tr><td>丁基橡胶塞，灰色</td><td>材料</td><td>西格玛-奥德里奇公司</td><td>27232</td><td></td></tr><tr><td>离心管</td><td>材料</td><td>贝克曼库尔特公司</td><td>342412</td><td></td></tr><tr><td>皮下注射针头，23号，2&amp;#8221;长度</td><td>材料</td><td>BD生物科学公司</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>微量离心管，1.5 mL</td><td>材料</td><td>DiaMed公司</td><td>AD151-N500</td><td></td></tr><tr><td>开放式中心密封圈，直径20 mm</td><td>材料</td><td>西格玛-奥德里奇公司</td><td>27230-U</td><td></td></tr><tr><td>巴斯德吸管，玻璃</td><td>材料</td><td>费舍尔科技公司</td><td>13-678-6C</td><td></td></tr><tr><td>移液器吸头</td><td>材料</td><td>DiaMed公司</td><td>BPS340-1000</td><td>目录号适用于200 &amp;#x03BC;L吸头。10或20 &amp;#x03BC;L吸头可从同一供应商处购买</td></tr><tr><td>泵用管路，内径1.5 mm × 壁厚1.5 mm</td><td>材料</td><td>Appleton Woods公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>螺口管，15 mL</td><td>材料</td><td>DiaMed公司</td><td>AD15MLP-S</td><td></td></tr><tr><td>血清瓶，125 mL容量</td><td>材料</td><td>西格玛-奥德里奇公司</td><td>Z114014</td><td></td></tr><tr><td>注射器，60 mL</td><td>材料</td><td>BD生物科学公司</td><td>309653</td><td></td></tr></tbody></table>

dna稳定同位素示踪（dna-sip）

DNA Stable-Isotope Probing (DNA-SIP)

DNA稳定同位素探针技术（DNA-SIP）是一种用于鉴定能够将特定碳源和营养物质同化为细胞生物量的活性微生物的强有力方法。因此，这种无需培养的技术已成为将代谢功能归因于广泛存在于各类陆地和水生环境中的复杂微生物群落的重要手段。在将环境样品与稳定同位素标记的化合物共同孵育后，提取的核酸需经过密度梯度超速离心及后续的梯度分段收集，以分离不同密度的核酸。通过从氯化铯中纯化DNA，可获得标记与未标记的DNA，用于后续分子表征分析（如指纹图谱、微阵列、克隆文库、宏基因组学等）。本JoVE视频实验方案以可视化方式逐步讲解密度梯度超速离心、梯度分段收集及标记DNA回收的完整操作流程。该方案还包括典型的SIP实验数据，并强调了确保DNA-SIP分析成功所必须注意的关键提示与注意事项。

关键词：DNA稳定同位素探针技术，DNA-SIP，密度梯度超速离心，梯度分段收集，标记DNA回收，分子表征，环境微生物学，代谢功能分析

DNA稳定同位素示踪是一种不依赖培养的方法，用于鉴定和表征能够利用特定底物的活性微生物群落。底物中富集的重同位素被微生物同化后，标记的原子被整合到微生物生物量中。通过密度梯度超速离心分离标记的DNA，用于后续分子分析。

DNA稳定同位素示踪（DNA-SIP）

DNA稳定同位素示踪（DNA-SIP）是一种用于鉴定能够同化特定碳底物的活性微生物的强有力技术。

本实验的总体目标是从已消耗特定生长底物的活性微生物中回收DNA，且无需在实验室进行培养。该方法首先在与原始环境条件相似的情况下，将环境样品与稳定同位素标记的目标底物共同孵育。实验的第二步是从该同位素标记的样品中提取总DNA。该实验步骤的第三步是将此DNA在氯化铯中进行密度梯度超速离心。实验的最后一步是分段收集密度梯度，以获得重链和轻链DNA，用于后续的分子表征。最终，可通过多种可能的分子技术（包括指纹图谱分析、微阵列、杂交、克隆文库分析以及宏基因组学）获得结果，从而揭示参与特定底物代谢但尚未培养的活性微生物的身份。大家好，我是来自滑铁卢大学生物学系的 Josh Neufeld。这位是 Eric Dunford，Newfeld 实验室的一名研究生。今天我们将向您展示一种名为 DNA 稳定同位素示踪（DNAS isotope probing），或简称 DNA-SIP 的实验方法。该技术已被广泛用于将未知且可能尚未培养的微生物的分类身份与其利用特定目标生长底物的能力关联起来。我们在Newfeld实验室使用该方法研究多种陆地和水生环境中碳源的代谢。今天，我们将向您展示将特定碳底物13C葡萄糖应用于土壤样品的操作过程。但需要指出的是，自该方法最初由华威大学Colin Merle研究组开发以来，研究人员已对该方案进行了拓展，使其可应用于多种不同环境，并可使用多种不同的标记同位素，如氮和氧。今天我们将重点关注碳元素，但该实验方案本身可适用于不同的实验设计。现在让我们开始。在本实验开始之前，按照本方案书面部分所述，准备好所有DNA稳定同位素探针（DNA SIP）或DNA CYP试剂。DNAC 从样品孵育开始。孵育条件因样品和底物特性的不同而有较大差异。一旦通过实验确定了合适的孵育条件，向环境样品中加入适当的底物改良剂。如果根据测试培养结果需要促进微生物生长，您也可以选择添加补充营养物质。样品培养设置完成后，盖紧并密封样品，然后对含有标记底物的环境样品进行培养。此处展示的示例是在土壤样品中加入碳13标记的葡萄糖溶液。接下来，设置一个对照孵育组，作为后续步骤中观察到的核酸标记现象的比较依据。除使用未标记的碳作为底物外，其余条件均保持一致：将环境样品用未标记的底物进行封口并孵育。孵育结束后，采用适用于后续实验应用的提取方法，从微宇宙体系中提取DNA。然后使用琼脂糖凝胶和分光光度计对提取的DNA进行定量，以用于后续的超速离心步骤。使用垂直或接近垂直的转子进行超速离心，以确保轻链和重链 DNA 实现最大程度的分离。贝克曼库尔特 VTI 65.2 转子具有 16 个孔，用于容纳 5.1 毫升快速密封聚合物管，以制备超速离心样品。首先，计算所需加入超速离心管的提取 DNA 体积，使 DNA 用量达到 0.5 至 5 微克。根据先前测定的DNA浓度，使用数字折射仪准确测定氯化铯储备溶液的密

Research

科研

JoVE Journal

Biology

生物学

DNA的稳定同位素探测（DNA的SIP）

我们描述了一种利用直接标记的荧光探针，通过三维DNA荧光原位杂交（3D DNA...

使用直接标记探针的稳定3D DNA FISH方法

通过稳定同位素示踪（SIP）结合焦磷酸测序技术，确定了与埃及棉铃虫（Spodoptera...

通过使用 13C-葡萄糖的DNA稳定同位素示踪法鉴定广食性昆虫Spodoptera littoralis肠道中具有代谢活性的细菌

采用高分辨率基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）结合单核苷酸延伸策略，建立了一种无需标记和放射性同位素的DNA聚合酶校对及DNA修复检测方法。该检测方法在检测长度短于9个核苷酸的校对和修复片段时，表现出高度特异性、操作简便、快速且易于实施的特点。...

使用单核苷酸延伸与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析进行校对与DNA修复检测

本文介绍了一种小环状DNA分子的T4连接与变性聚丙烯酰胺凝胶纯化、环状瓦片的退火与非变性聚丙烯酰胺凝胶分析、一维和二维DNA纳米结构的组装与原子力显微镜成像，以及有限DNA纳米结构的琼脂糖凝胶电泳与离心纯化等详细实验方案。...

由小型环状DNA分子构建的稳定DNA序列基序、一维和二维纳米结构

本文介绍了一种利用基于DNA的张力探针成像免疫细胞受体受力的详细实验方案。该方法可绘制受体受力图谱 &gt;4.7 pN...

用于绘制免疫细胞瞬时皮牛顿受体力的DNA张力探针

D-环捕获（DLC）和D-环延伸（DLE）实验利用邻近连接原理结合定量PCR，用于定量检测酿酒酵母（Saccharomyces...

同源重组中间体的检测 通过 邻近连接与定量 PCR 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）

该方案提供了使用二甲基硫酸酯对RNA进行修饰以开展突变谱分析实验的操作指导。内容包括 体外 和 体内...

利用二甲基硫酸盐突变谱结合测序技术探究RNA结构 体外 以及在细胞中

蛋白相关新生DNA富集与测序技术（eSPAN）旨在检测染色质相关蛋白在两条复制DNA链上的相对丰度，从而揭示染色质复制及其偶联过程的分子机制。本实验方案描述了在酵母和小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中进行eSPAN的操作步骤。...

通过富集和测序蛋白质相关新生DNA方法对复制DNA链上蛋白质进行链特异性分析

本方案介绍了一种基于荧光显微镜的单分子DNA复制检测方法，可实现实时观察DNA聚合酶与G-四链体结构等障碍物之间的相互作用。...

单分子荧光成像观察DNA聚合酶在G-四链体上的动态行为

在本视频中，我们将向您展示如何利用凝胶内活性检测方法分析人类胚胎干细胞线粒体呼吸链复合物。...

检测人类胚胎干细胞中线粒体复合物的活性

学习DNA稳定同位素探测技术，通过密度梯度超速离心分离重同位素标记DNA，用于鉴定环境中活跃微生物群落并研究其代谢功能。该方法无需培养即可揭示未培养微生物的代谢特性。

DNA稳定同位素示踪（DNA-SIP）

探索更多视频