斑马鱼避免和硫化物分析：一种高通量方法，以检查拉瓦尔行为，以响应逆向视觉刺激

- 首先，将五只幼虫放在一个六车道的长板的每个车道上。添加额外的鸡蛋水，但不要过度填充车道。鸡蛋水含有甲基蓝，可防止霉菌生长。 让幼虫适应至少10分钟，以减轻它们的压力。

现在把井板放在笔记本电脑屏幕上的成像室里，把相机对焦在井板上， 用鸡蛋水完全填满车道。

接下来，通过拍摄延时图像来记录放置在空白背景上的幼虫的行为。在笔记本电脑屏幕上显示一个移动的红色条形图，并根据移动的红色条形图拍摄幼虫的延时图像。

红色形状被视为一种威胁，一种逆向刺激，并导致幼虫应激。 作为回应，他们避开酒吧，表现出积极的硫化物。积极的硫化物是鱼对刺激的反应，寻求与墙壁接触，并在车道边缘游泳。

在示例协议中，我们将分析用药物化合物或环境毒素治疗的斑马鱼幼虫的避免和硫化反应。

- 要开始图像捕捉，请小心地将幼虫从培养皿移到高玫瑰巷，以帮助减轻幼虫的压力。 每个车道最多可放置 20 个幼虫，但每个车道最多可放置5个幼虫，通常用于最准确地跟踪游泳速度，并减少每个实验所需的幼虫数量。

根据实验情况，用或不含药物或毒剂的蛋水填充车道。不要一直填满车道，直到它们被放置在成像柜中以防止溢出。 给幼虫10分钟来适应。 适应期结束后，用手将四个板直接放置在笔记本电脑屏幕顶部。

此时，车道可以加上蛋水或化学处理，使其与车道顶部平起平放，以消除图像中车道边缘的阴影。

为电脑编程延时摄影，每六秒拍摄一次，每个实验共拍摄300张图像。将相机设置在较低的分辨率，以视频速度成像。虽然分辨率较低，但记录限于单个多井板，但录像适合成像快速游泳事件。

使用 PowerPoint 演示文稿作为幼虫的逆向刺激。 在此演示中，PowerPoint 以空白的白色背景开始 15 分钟，然后在板的上半部分使用移动的红色条形 15 分钟。 为了避免液体在高玫瑰车道内蒸发，请将最大成像时间保持在 1小时以下。