Name: 창자 허혈 - 재관류 손상의 쥐 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: 학습하세요 쥐에서 상장간막동맥 폐쇄를 이용한 창자 허혈-재관류 손상 유도 방법을. 이 기술은 위장병학 및 면역학 연구에서 조직 손상과 재생 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

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러시아어 과학 재단의 지원이 작품은, 아니 부여합니다. 14-50-00060 및 LLC RUSCHEMBIO. 이 작품은 또한 (CJ에) 294083 (AVT에), 그리고 NIH 부여 RO1 DK47700에 의해 부여 미국의 크론과 대장염 재단에 의해 지원되었다.

동물 연구는 건강 지침의 국립 연구소에 따라 수행하고, 기관 동물 관리의 승인을하고, 트뤼도 학회의위원회를 사용합니다. 8~12주 오래 C57BL / 6 마​​우스를이 연구에 사용 하였다. 수술 1. 준비 <ol><li> 준비 및 수술 도구를 소독. </li><li> 코 콘, 가열 패드 이소 플루 란 기반 마취 시스템을 준비합니다. 확인 가열 패드가 과열되지 않는다 (&lt;39 ° C). </li><li> 이소 플루 란 가스 소기 용기가 차단되거나 어떤 식 으로든 폐색되지 않은 용기의 하단에 배기구를 보장하기 위해 올바르게 배치되어 있는지 확인합니다. 캐니스터 절차 및 문서의 무게에 앞서 가스 소기 용기의 무게를. 캐니스터 중량 누적 중량 (~ 12 시간) 50 g을 초과하면 캐니스터 버린다. </li></ol> 2. 마취 <ol><li> 유도 챔버에 3 % 이소 플루 란 마취 마우스 (1 L / 분O 2). <ol><li> 똑바로 유지하기 위해 무능력에 의해 마취 깊이를 평가, 목적이 자발적인 움직임, 깜박임 반사 손실, 근육 이완 및 응답의 손실의 손실 (회사의 압력과 발가락 또는 꼬리 핀치) 자극을 리플렉스합니다. </li><li> 가슴 벽과 복부의 움직임을 관찰하여 호흡 패턴을 평가합니다. 최적의 마취에서 호흡 속도는 분당 ~ 55-65 호흡해야한다. </li><li> 유도 챔버에서 마우스를 제거하고 빠르게 마우스의 복부 영역을 면도. </li></ol></li><li> 각막 탈수를 방지하기 위해 눈에 개성 안과 연고를 배치합니다. </li><li> 가열 패드에 마우스를 놓고 마취 시스템에 코 콘을 통해 연결합니다. 확인 라텍스 코 콘 막 단단히 마우스의 머리에 맞는 이소 플루 란의 아무 누수가 없다. </li><li> 피하 고통 폭포의 바람을 방지하기 위해 1.5 %로 이소 플루 란 속도를 줄이고, 부 프레 노르 핀 (0.1 ㎎ / ㎏)과 케타민 (10 ㎎ / ㎏)을 주입. </li><li> 일을 닦아70 % 에탄올 다음 Betadine 수술 용액으로 적신 멸균 면봉으로 작업 영역의 전자 피부. </li></ol> 3. 수술 <ol><li> 운영 가위로 중간 선 3-5cm의 개복술을 확인합니다. 식염수에 적신 멸균 비 접착 패드 커버 작업 영역입니다. 맹장과​​ 회장을 분리하고 식염수에 적신 면봉을 사용하여 장간막 동맥을 노출. </li><li> , 적용 클립을 용이하게이 작업을 수행 scissors.To 미세 조리개를 사용하여 장간막 동맥 주위의 장간막에 작은 흠을하려면 부드럽게 드레싱 집게로 장을 마련하고 (원하는 클립 위치에 그림을 장간막 동맥의 양쪽에 장간막을 잘라 1A). 그런 다음 클립을 적용하기 전에 원하는 클립 위치의 영역에 멸균 생리 식염수를 몇 방울을 추가합니다. 참고 : 가짜 수술을 3.2 단계로 수술을 따르십시오. 클립을 적용하지 마십시오. 대신, 추가 따뜻한들에 의해 습기가 조직을 유지알린 같이 1 시간 동안 3.6에 기재. 그 후, 4.1 단계로 진행, </li><li> 맹장 (도 1B)에 인접하는 허혈성 회장의 5-7 센티미터 영역을 생성하기 위해 클립 부착기를 이용하여 미세 혈관 클립 (70g 력)과 장간막 동맥 1 차 분기 폐색. 선박의 위치가 보수적이지만, 마우스 사이에 약간의 차이 (그림 1의 예 참조)가있을 수 있습니다. 따라서, 2 또는 3 클립은 일반적으로 (도 1A, D, E, 검은 색 화살표에있는 클립의 위치 참조)를 요구한다. 참고 : 높은 품질의 선박 클립을 사용합니다. 고압 클립 혈관 손상을 완전히 혈액 흐름을 차단할 수 저압 클립 (&lt;30g) 반면 재생을 방지 할 수있다. </li><li> 허혈성 부위의 영역 (도 1) demarking 선박간에 개의 미세 혈관 클립을 사용하여 창자 (40g 포스)을 통해 측부 혈류 차단. 측부 혈관의 폐색에 필요인접한 혈관으로부터 혈액 공급이되지 않도록 (도 1a, D, E, 녹색 화살표의 클립의 위치 참조). </li><li> 옵션 : 혈액 응고를 방지하기 위해 헤파린 용액 (6 USP 단위 / ㎖)을 추가합니다. 단리 된 부위에 헤파린 용액 0.5ml를 추가 적가 하였다. </li><li> 식염수 젖은 멸균 비 접착 패드 섬세한 와이프는 37 ° C로 미리 예열 및 수술 영역에 적용됩니다. 와이프는 전체 절차를 수행하는 동안 젖은 남아 있는지 확인합니다. </li><li> 전체에서 1.5 % 이소 플루 란 마취를 사용하여 60 분 동안 허혈을 유지한다. 허혈 절차가 제대로 수행되면, 허혈성 지역은 약 30 분에서 색상 와인 레드로 변경됩니다. 성공적인 폐쇄를 나타내는 허혈 (그림 1, 오른쪽 패널) 동안 확대 된 클립의 위치로 말초 혈액 혈관을합니다. </li><li> 밀접하게 허혈 단계에서 마우스를 모니터링 할 수 있습니다. 수술 부위를 덮는 비 접착 패드에 식염수를 계속 적용. </li><li> 표조직에 Gill`s 3 헤 마톡 실린 20 μl를 피펫 팅에 의한 허혈 영역의 가장자리 (그림 1E, 오른쪽 패널) 비교를 위해 동일한 마우스에서 허혈성 조직과 인접한 건강한 조직을 수확 용이합니다. </li></ol> 4. 재관류 단계 <ol><li> 허혈 끝에 클립 영역에 식염수를 몇 방울을 가하여 부드럽게 클립 적용자와 미세 혈관 클립을 제거한다. 그런 다음, 부드럽게 식염수를 적신 코튼 팁을 사용하여 다시 복강에 소장을 밀어 넣습니다. 비 접착 패드를 분리 9mm 스테인레스 스틸 상처 클립을 사용하여 복벽 및 피부를 닫는다. 재관류 3 시간보다 오래 수행되면, 피부 창상 클립을 적용하기 전에 복벽을 닫 vicryl 흡수성 봉합사를 사용한다. </li><li> 재관류 단계에 대한 시간의 원하는 금액 (30 분, 60 분, 120 분, 180 분)에 대한 가열 깨끗한 케이지에 마우스를 유지한다. </li><li> 매 30 분 안정성을 보장하기 위해 적어도 동물을 확인합니다. </li></ol><p클래스 = &quot;jove_title&quot;&gt; 5. 부검 및 소장의 수확 <ol><li> CO에 의해 재관류 다음 원하는 시간에 자궁 경부 전위 다음이 과다 복용을 쥐를 안락사. </li><li> 복강을 열고 추가 분석을 위해 허혈성 장 조직을 수집합니다. 부상에 대한 전신 반응 계정에 대한 내부 통제로 손상된 조직에 인접 수확 건강한 정상 조직. 참고 :이 컨트롤은 가짜 운영 마우스 IR-유도 부상에 대한 전신 반응을받지 않기 때문에 가짜 제어 마우스를 운영하는 것보다 더 적합하다. </li><li> 길이 방향으로 다음 생리 식염수로 채워진 및 장착 된 위관 바늘로 장을 30 ML의 주사기를 잘라 사용하여 장 내용을 세척 할 것. 소장의 샘플의 유전자 발현 분석을 위해 필요한 경우, 종 방향으로 1.5 mm 절편을 절단하고, 조직 학적 분석을 위해 나머지 부분을 사용한다. </li><li> 조직 학적 분석을 위해, intest 롤 쌍의 집게를 이용하여 스위스 롤을 제조오프라인. </li><li> , 롤 형태를 유지 조직 카세트에서 조직 검사 폼 패드 (그림 2) 사이에 대장의 조각을 배치합니다. 10 % 포르말린에 카세트를 놓습니다. </li><li> 최소 24 시간 동안 포르말린에 조직을 수정합니다. 추가로 24 시간 동안 70 %의 에탄올과 포르말린을 교체합니다. 실온에서 무기한 70 % 에탄올에 보관 조직. </li><li> 파라핀에 포함, 5 μm의 섹션을 절단하고 헤 마톡 실린 및 에오신 표준 프로토콜 (그림 3)를 사용하여와 얼룩. </li></ol> 6. 점수 <ol><li> 표 2에 요약되어있다. 쥐의 허혈 - 재관류 손상 점수 적절한 채점 방법을 선택합니다. </li><li> 선택 사항 : 부상의 심각성이 섹션에 걸쳐 변화 때문에 네 개의 섹션으로 시야를 나눈다. </li><li> 맹목적으로 얻은 점수에서 각 섹션의 평균 등급을 계산합니다. </li><li> 케이스 및 컨트롤 사이의 손상된 조직의 성적을 비교뿐만 아니라 토륨하기전자는 던의 다중 비교 테스트에 이어 크루스 칼 - 월리스 테스트를 사용하여 조직을 손상되지 않은. </li></ol>

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</ol>

저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.

장내 IR 부상의 마우스 모델의 개발이 크게 조직 손상의 메카니즘에 대한 이해를 향상 7,9,11,34 조직 손상을 최소화하기 위해 잠재적 인 치료 전략의 개발에 도움을했다. 이 프로토콜의 중요한 단계는 미세 혈관 클립의 적절한 위치, IR 부상의 허혈 및 적절한 조직 학적 평가의 정확한 타이밍이다. 허혈 시간은 후속 상피 손상에 대해 매우 중요하다. 이환율과 실험 쥐의 사망률없이 재현 IR 부상을 유도하는 데 필요한 일반적인 시간은 2 ~ 3 시간 재관류 다음 45 ~ 60 분이다. 허혈의 장기간 수도 상피 및 사망률 증가의 완전한 손실이 발생합니다. 120 분 동안 폐쇄는 융모 상피 (35)의 전체 손실을 주도하는 반면 예를 들어, jejunal 허혈의 돼지 모델에서, 60 분 폐색은 빌라 상피의 일부 손실이 발생했습니다. 나는mportantly, 무균 및 유전자 조작 마우스는 예비 실험에서 최적화 될 필요가있다 ...

소장은 허혈 및 상피 손상의 원인 혈액 흐름의 중단에 매우 민감하다. 허혈 후 재관류는 조직의 재 산소를 제공하고, 더 병리학을 홍보 할 수 있습니다. 따라서, 장 허혈 재관류 손상은 괴사 성 장염, 소장 이식의 이식 거부, 복부 대 동맥류 수술, 심폐 바이 패스, 및 염증성 장 질환의 1,2- 합병증 포함 병리의 넓은 범위와 관련된다. 장 IR 부상, 특히 급성 장간막 허혈는 이환율과 사망률 3의 결과로 생명을 위협하는 상태이다. 잘 이해되지 않지만, 장 허혈 재관류 (IR) 상처는 장내 미생물의 변화뿐만 아니라, 반응성 산소 종 및 염증성 사이토 카인 및 케모카인 1,4-6의 생산과 관련된 것으로 생각된다. 이 둘의 활성화에 리드네이트 및 염증과 조직 손상 -1,7,8,8-을 촉진 적응 면역 메커니즘. 그들은 쉽게 이득 - 및 기능 상실 유전자 실험을 허용하는 동물 모델은 IR 손상의 메카니즘을 이해하는 데 중요하다. IR의 여러 동물 모델은 전체 혈관 폐색, 저 유량 허혈을 포함하는 개발 및 (최근의 종합적인 검토 9에 요약) 혈관 폐색을 분할하고있다. 장간막 동맥 (SMA)의 완전한 혈관 폐색에 의한 장 허혈 큰 동물과 설치류 9-11에서 IR의 쉽고 일반적으로 사용되는 모델입니다. 그러나, 창자의 다른 영역은 부상에 서로 다른 감수성이있다. 또한, 부상의 변수도에서 허혈 손상 및 복구 결과의 기간에 다양한 마취제, 진통제, 동맥 폐쇄 기술의 범위뿐만 아니라 불일치 여러 STUDIE에서 IR의 생물학에 대한 우리의 이해를 교란의. 표 1은 쥐의 IR 연구에서 이러한 불일치를 보여줍니다. 짧은 허혈 시간 (30-45 분)을 사용하는 가장 큰 단점은 케이스 및 컨트롤 간의 뚜렷한 차이가 관찰 될 수있는 복구 창을 대상으로한다. 상피에 가벼운 부상 따라서, 재관류 후 시간을 해결 병리학 적 지표가 상피 손해 배상의 차이를 발견해야 할 수 있습니다 전문 될 수있다. 반대로, 과도한 손상, 허혈성 손상을 100 분으로 본 사망률의 속도 및 복구 시간을 증가 반발이 더 이상 가능하지 않다 상피의 완전한 denudement 초래할 수있다. 따라서, 우리가 우리의 분야에서이 기술의 표준화를 장려하기 위해 사망률없이 재현 부상 결과 생쥐의 장내 IR의 상세 절차를 설명합니다. 장내 IR 손상이 모델은 부상 및 재생의 세포 및 분자 기전을 연구하기 위해 이용 될 수있다.

<table><tbody><tr><td>가열 패드</td><td>Sunbeam</td><td>E12107-819</td><td>대안: Braintree Scientific 가열 패드</td></tr><tr><td>탁상용 연구 마취 기계</td><td>Vasco</td><td>UCAP 0001-0000171</td><td>대안: Parkland Scientific, V3000PS</td></tr><tr><td>노즈 콘</td><td>Parkland Scientific</td><td>ARES500</td><td></td></tr><tr><td>청소부 캐니스터 및 교체 카트리지</td><td>Parkland Scientific</td><td>80000, 80120</td><td></td></tr><tr><td>인덕션 챔버</td><td>서지벳</td><td>V711802</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NDC 66794-013-10</td><td>규제 물질, IACUC</td></tr><tr><td>Animal clipper&nbsp에</td> 연락;<td>오스터&nbsp;</td><td>Oster Golden A5 078005-050-003</td><td></td></tr><tr><td>안과 연고</td><td>Webster</td><td>8804604</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>McKesson</td><td>562766</td><td>규제 물질, IACUC</td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamine HCl)</td><td>Pfizer</td><td>NADA 45-290</td><td>규제 물질, IACUC</td></tr><tr><td>Cotton tips</td><td>Puritan medical products</td><td>806-WC</td><td>Autoclave 사용 전에</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Purdue 제품</td><td>67618-150-17</td><td>10% Povidone-Iodine</td></tr><tr><td>멸균 식염수</td><td>Aspen</td><td>46066-807-60</td><td>사용 전에 실온에 조정</td></tr><tr><td>IR 설치류 온도계</td><td>BIOSEB</td><td>BIO-IRB153</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 혈관 클립, 70 g</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS5424, RS5435</td><td>대안: WPI 14121, SMA 폐색</td></tr><tr><td>마이크로 혈관 클립, 40 g</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS6472</td><td>대안: WPI 14120, 담보 혈관 폐색</td></tr><tr><td>클립 적용 펜치</td><td>World Precision Instruments</td><td>14189</td><td>대안: Roboz #RS-5410 또는&nbsp; #RS-5440</td></tr><tr><td>Gill's 3 hematoxylin</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-390-17</td><td></td></tr><tr><td>수술용 스테이플, Reflex 9 mm</td><td>Cell Point Scientific</td><td>201-1000</td><td></td></tr><tr><td>Autoclip applier</td><td>Beckton Dickinson</td><td>427630</td><td></td></tr><tr><td>Byopsy 폼 패드</td><td>Simport</td><td>M476-1</td><td></td></tr><tr><td>조직 카세트</td><td>Fisher Healthcare</td><td>15182701A</td><td>Histosette II 조합 뚜껑 및 베이스</td></tr><tr><td>10% 완충 포르말린</td><td>Fisher Scientific</td><td>245-684</td><td></td></tr><tr><td>수술용 홍채 가위</td><td>World Precision Instruments</td><td>501263-G SC</td><td>대안: Roboz RS6816</td></tr><tr><td>운영 가위</td><td>World Precision Instruments</td><td>501219-G</td><td>대안: Roboz RS6814</td></tr><tr><td>드레싱 펜치</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS-5228, RS-8122</td><td>대안: World Precision Instruments 1519-G</td></tr><tr><td>Heparin, endotoxin free, 300 USP 단위/바이알, 50 mg</td><td>Sigma</td><td>2106</td><td></td></tr><tr><td>Reflex 상처 클립 제거 펜치</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS-9263</td><td>대안: 세계 정밀 기기: 500347</td></tr><tr><td>마우스 C57BL/6J 마우스&nbsp;</td><td>Jackson Laboratory</td><td>재고 번호 0664</td><td></td></tr><tr><td>Telfa 비접착성 드레싱, 3 x 4, 멸균</td><td>Coviden</td><td>1050</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand 이송 피펫</td><td>Fischer Scientific</td><td>13-711-5AM</td><td>피펫을 사용하여 식염수를 적가합니다</td></tr></tbody></table>.

창자 허혈 - 재관류 손상의 쥐 모델

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

장 허혈은 동맥 경화증, 혈전증, 저혈압, 괴사 성 장염, 장 이식, 외상 및 만성 염증을 포함하여 임상 조건의 넓은 범위와 관련된 생명을 위협하는 상태이다. 창자 허혈 재관류 (IR) 부상 장내 손상 얻어진 장간막 혈관 통해 불충분 한 혈류로 인한 급성 장간막 허혈 결과적이다. 재관류 다음 허혈은 또한 소장의 손상을 악화시킬 수 있습니다. IR 손상 메커니즘은 복잡하고 잘못 이해된다. 따라서, 작은 동물 실험 모델 IR 손상의 병태 생리학 및 신규 한 치료제의 개발을 이해하는데 중요하다. 여기에서 우리는 사망하지 않고 소장의 재현성 부상을 제공 급성 장 IR 부상의 마우스 모델에 대해 설명합니다. 이것은 시간적으로 occludin은 원위 회장의 영역 허혈 유도함으로써 달성된다g 미세 혈관 클립을 사용하여 60 분 동안 상 장간막 동맥 및 주변 단자 담보 가지. 1 시간, 또는 조직 학적 분석에 의해 조사 된 소장의 재현 상해에서 상해 결과 후 2 시간 동안 재관류. 미세 혈관 클립의 적절한 위치는 프로 시저에 대한 중요하다. 따라서, 동화상이 기술의 상세한 시각 단계별 설명을 제공한다. 장내 IR 손상이 모델은 부상 및 재생의 세포 및 분자 기전을 연구하기 위해 이용 될 수있다.

우리는 쥐의 회장의 재현 IR 유도 부상을 얻기 위해 IR 수술의 실험 프로토콜을 최적화. 대표 결과이 절에서 설명한다. 도 1은 회장의 허혈을 유도하는 미세 혈관 클립 위치의 예를 도시한다. 검은 색 화살표는 장간막 동맥의 첫 번째 순서 가지를 폐색 메인 클립의 위치를​​ 보여줍니다. 녹색 화살표 담보 혈관으로부터 혈액 공급을 차단하기 위해 추가 클립의 위치를​​ 나타낸다. 클립의 위치와 intestinte의 허혈 영역의 색상 변화에 원위부 폐색 된 혈관의 증가 크기를합니다. 허혈 혈관의 단부에서 클립을 제거한 후 혈류를 회복 정상 크기로 복귀. 도 2는 콘로부터 제조 스위스 롤을 포함하는...

여기에서 우리는 들판을 가로 질러이 기술의 표준화를 장려하기 위해 사망률없이 재현 부상 결과 생쥐의 장 허혈 - 재관류의 상세 절차를 설명합니다. 창자 허혈 재관류 손상이 모델은 부상 및 재생의 세포 및 분자 기전을 연구하기 위해 이용 될 수있다.

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

이 절차의 전반적인 목표는 상장간막동맥의 말초 및 말단 측부 분지를 일시적으로 폐쇄함으로써 마우스의 원위 회장 부위에 재현 가능한 장 허혈 재관류 유도 손상을 일으키는 것입니다. 이 방법은 손상 및 재생 기전을 이해하는 것과 같이 위장관학 및 면역학 분야의 기초적인 방법론을 이해하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 장점은 실험실에서 교육받은 사람이라면 누구나 수행할 수 있다는 점입니다.또 다른 장점은 해당 절차가 마우스에게 치사율을 유발하지 않는다는 점입니다. 텍스트 프로토콜에 명시된 대로 수술 부위를 준비하십시오. 다음으로, 수술용 가위를 사용하여 정중선 방향으로 3~5 cm 길이의 개복술을 실시합니다.그런 다음 생리식염수로 적신 멸균 비고착성 패드로 수술 부위를 덮습니다. 맹장과 회장을 분리하고, 생리식염수를 적신 면봉을 사용하여 상장간막동맥을 노출시킵니다. 그다지 클립 적용을 용이하게 하기 위해 스트레싱 포셉으로 장을 조심스럽게 들어 올리고, 아이리스 가위를 사용하여 원하는 클립 위치에서 상장간막동맥 양측의 장간막을 절개합니다.창자를 들어 올린 상태에서, 다른 한 손으로 클립 어플라이어를 부드럽게 눌러 고품질 70 G-Force 미세혈관 혈관 클립의 죠(jaw)를 엽니다. 그다음 혈관에 클립을 위치시키고 죠를 부드럽게 놓아 혈관을 폐쇄합니다. 상장간막동맥의 1차 분지들을 폐쇄하여 맹장 인접 부위의 허혈성 회장 영역이 5~7 cm가 될 때까지 동일한 방식으로 미세혈관 클립을 1~2개 더 배치합니다.이제 두 개의 40 G-Force 미세혈관 클립을 장에 걸쳐 배치하여 측부 혈류를 차단하고, 허혈성 장 부위를 표시합니다. 모든 클립이 배치되면 37 °C 식염수를 적신 멸균 정밀 와이프를 수술 부위에 적용하고, 면밀히 모니터링하며 60분 동안 허혈 상태를 유지합니다. 허혈 절차가 올바르게 수행되었다면, 약 30분 후에 해당 부위가 와인색으로 변하고 클립 위치보다 원위부의 혈관이 확장되어 폐쇄가 성공적으로 이루어졌음을 나타냅니다.허혈 단계가 끝나면, 허혈 부위와 인접한 건강한 조직의 채취를 용이하게 하기 위해 허혈 영역의 경계에 10 µL의 Gill's Hematoxylin을 표시합니다. 허혈 단계 종료 후, 클립 부위에 식염수를 몇 방울 가하고 클립 제거기를 사용하여 미세혈관 클립을 조심스럽게 제거합니다. 그런 다음, 식염수를 적신 면봉을 사용하여 장을 복강 내로 조심스럽게 밀어 넣습니다.비유착성 패드를

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

외과 외상은 염증 반응을 유도합니다. 크린 시토킨 및 내생 리간드는 국소 빈혈과 reperfusion에 따라 심근 경색 크기를 조절하는 것으로 알려져 있습니다. 우리는 thoracotomy의 영향을 최소화하기 위해 매달려 가중치를 사용하여 murine 국소 빈혈과 reperfusion의 수정된 폐쇄 가슴 모델을 제시.

심근 국소 빈혈 및 Reperfusion의 Murine 폐쇄 가슴 모델

우리는 재현성을 높이기 위해 좌전 하행 동맥 (LAD)에 결찰의 위치에서 더 명확 수 있습니다 마우스 모델에서 심근 경색 (MI)을 시뮬레이션하기 위해 실험 허혈 / 재관류 (I / R) 손상을 유발하는 수술 방법을 소개합니다 마우스에있는 MI 실험.

왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델

이 프로토콜에는 단편 장 허 혈의 돼지 모델을 성공적으로 설정 하 고 이후 격리 하 고 상피 수리 부상 다음의 연구에 대 한 장 줄기 세포 문화 독자 수 있게 됩니다.

단편 작은 장 허 혈의 돼지 모델에서 문화와 장 줄기 세포 격리

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 마우스 모델 선의 이상 조사를 설립 하다. 우리는 distally 오른쪽 중간 대뇌 동맥과 바로 일반적인 경 동맥 선 하 고 국 소 빈 혈의 10 또는 40 분 후 혈액 흐름을 복원.

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

여기서 우리는 마우스에서 좌측 전방 의 관상 동맥의 영구적 인 결찰을 달성하는 방법을 보여주는 외과 적 절차를 설명합니다. 이 모형은 심근 경색의 병리생리학 및 수반되는 생물학 프로세스를 조사하기 위하여 높은 관련성입니다.

왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰을 사용하는 뮤린 심근 경색 모델

우리는 임상적으로 관련된 대장암 간 전이(CRLM) 종양 모델과 종양 성장 및 전이에서 간 허혈 재관류(I/R)의 영향을 상세히 기술한다. 이 모델은 간 전이성 성장의 수술 유발 승진의 근본적인 기계장치를 더 잘 이해하는 것을 도울 수 있습니다.

허혈 재관류 손상의 설정에서 전이성 간 종양의 뮤린 모델

신장 허혈-재관류 손상은 입원 환자의 높은 이환률 및 사망률과 관련이 있다. 여기에서, 우리는 일방적 인 신장 허혈 재관류 손상의 간단하고 효과적인 마우스 모델을 제시하고 신장에서 관찰 된 대표적인 병리학 적 변화에 대한 순차적 인 개요를 제공합니다.

일방적 인 신장 허혈 - 재관류 손상의 효과적인 마우스 모델

여기서는 미세 조작을 통해 좌측 전방 하행 관상동맥의 정밀 결찰에 의해 마우스에서 심근경색 또는 심근 허혈 재관류 손상을 유도할 수 있는 간단하고 재현 가능한 방법을 설명합니다.

마우스의 심근경색 및 심근 허혈-재관류 손상 유도

설치류에서 널리 사용되는 장 허혈 재관류 손상(IRI) 수술 모델을 생성하는 방법을 설명합니다. 이 시술은 상장간막 동맥의 폐색과 혈류의 회복을 포함합니다. 이 모델은 수의학 및 인간 의학 모두에서 장내 IRI의 폐색 원인을 조사하는 연구에 유용합니다.

상장간막 동맥의 폐색을 통한 장 허혈-재관류 손상의 설치류 모델

이 프로토콜은 마우스 모델에서 폐 허혈 재관류 손상을 연구하는 데 사용할 수 있는 실현 가능하고 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 좌폐 고막 클램핑 방법을 설명합니다.

Murine Left Pulmonary Hilar Clamp 폐 허혈 재관류 손상 모델

이 프로토콜은 장간막 허혈-재관류 손상을 유도하고 생체 내 현미경을 사용하여 장간막 정맥의 호중구 세포 외 트랩(NET)을 시각화하는 방법을 제시합니다. 상장간막동맥의 혈류를 1시간 동안 제한한 후 재관류를 수행하여 백혈구 유착 및 NETosis를 직접 정량화할 수 있었습니다.

Visualization of Neutrophil Extracellular Traps in Mesenteric Venules after Mesenteric Ischemia-Reperfusion Injury via Intravital Microscopy(생체 내 현미경을 통한 장간막 허혈-재관류 손상 후 장간막 정맥의 호중구 세포 외 트랩(Neutrophil extracellular traps in mesenteric venules after Mesenteric Ischemia-reperfusion injury)

학습하세요 쥐에서 상장간막동맥 폐쇄를 이용한 창자 허혈-재관류 손상 유도 방법을. 이 기술은 위장병학 및 면역학 연구에서 조직 손상과 재생 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

창자 허혈 - 재관류 손상의 쥐 모델

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