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DOI: 10.3791/55992-v
Lauren A. Biwer1,2, Christophe Lechauve3, Sheri Vanhoose4, Mitchell J. Weiss3, Brant E. Isakson1,2
1Department of Molecular Physiology and Biophysics,University of Virginia School of Medicine, 2Robert M. Berne Cardiovascular Research Center,University of Virginia School of Medicine, 3Department of Hematology,St. Jude Children's Research Hospital, 4Research Histology Core,University of Virginia School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
É descrito um modelo de cultura celular de artérias de resistência, permitindo a dissecção da sinalização de caminhos no endotélio, músculo liso, ou entre o endotélio e músculo liso (a junção de myoendothelial). A aplicação selectiva de agonistas ou isolamento da proteína, microscopia eletrônica ou imunofluorescência pode ser utilizada usando esse modelo de cultura celular.
O objetivo geral desta técnica é cultivar células endoteliais e musculares lisas juntas in vitro para criar junções mioendoteliais que ocorrem em artérias de resistência de pequeno diâmetro. Este método pode ajudar a responder questões-chave no campo cardiovascular, como localização de proteínas e ativação de cascatas de sinalização na parede arterial. A principal vantagem dessa técnica é que você pode isolar especificamente as frações da junção mioendotelial do endotélio e do músculo liso, o que é impossível de fazer usando uma artéria real.
A demonstração visual de uma incorporação de parafina é particularmente crítica, pois as etapas de incorporação podem ser difíceis de aprender sem ver o processo. Comece a construção da co-cultura de células vasculares ou VCCC, borrifando placas de Petri de 150 milímetros e tampas com desinfetante e, em seguida, limpando com uma toalha de papel ou lenços umedecidos sem fiapos. Em seguida, borrife as placas de Petri com etanol 70% e coloque-as no capô para secar ao ar.
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