Нейронные индукции является первым шагом в формировании мозга. Это механизм, посредством которого узел Гензена (организатор), инструктирует соседних тканей принять нейронных судьба, то есть привести к нервной системе. Это видео демонстрирует тест для нейронных индукции в куриных эмбрионах.
Куриного эмбриона является ценным инструментом для изучения раннего эмбрионального развития. Его прозрачность, доступность и легкость манипуляций, делают его идеальным инструментом для изучения формирования и начального структурирование нервной системы. Это видео демонстрирует, как привить ткани организатор в хозяина, метод, которым узел Хэнсен с (организатором в куриных эмбрионах) прививают на хост компетентных эктодермы. Организатор трансплантата инструктирует вышележащих наивны ткани принять нейронных судьбу через нервные сигналы вызывающих. Этот механизм называется индукции нервной и представляет собой первый шаг в формировании головного и спинного мозга в амниот. Этот метод в основном используется для характеристики предполагаемых нейронных молекул вызывающих у куриных. Это видео демонстрирует различные этапы анализа нейронных индукции; Во-первых, эмбрион является Donnor эксплантированных и возлагали на блюдо. Затем хозяин эмбрион готов к новой культуре. Трансплантат вырезали и пересаживаются на хост маржа области pellucida. Хост культивировали в течение 18-22 часов. Сборка фиксируется и обрабатывается для дальнейшего применения (например, в гибридизация). Этот метод был первоначально разработан Уоддингтон<sup> 1,2</sup> И Gallera<sup> 3,4</sup>.
Это видео демонстрирует различные этапы в проведении анализа нейронных индукции; Этот анализ в основном используется для характеристики предполагаемых нейронных молекул вызывающих у куриных, и таким образом может быть использован для широкого спектра применений, начиная от эмбриол?…
DP является получателем Рут Kirschstein премии 1F32-01A1 DA021977 из Национального института по злоупотреблению наркотиками. Эта работа была поддержана Маргарет М. Alkek Фонда РГНФ.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Eggs | Animal | Charles River Laboratories | Premium Fertile | Fertilized, HH3+ (14 hr) |
Stereomicroscope | Microscope | Leica Microsystems | MZ9.5 or similar | |
Hybridization Incubator | Equipment | Robbins Scientific | M1000 | Use with inverted Pyrex dish and 500 ml ddH2O beaker |
Marsh Automatic Incubator | Equipment | Lyon | RX | |
Pyrex dish | ||||
Watchmaker’s glass 50mm | Tool | VWR | 66112-060 | |
Glass rings | Tool | Physical Plant facility | cut 4 mm thick sections of glass tubing (27 mm outer diam, 25 mm inner diam). Do not fine polish. | |
Curved Forceps (1) | Tool | Electron Microscopy Sciences | 72991-4C | |
Forceps (2) | Tool | Fine Science Tools | 11002-13 | blunt ended using sharpening Stone and 100ul mineral oil |
Fine scissors | Tool | Fine Science Tools | 14161-10 | |
Plastic dishes | Tool | Falcon | 353001 | |
Rubber Bulb | Tool | Electron Microscopy Sciences | 70980 | |
DiI | Reagent | Invitrogen | D-282 | |
Aspirator tube assembly | Tool | Sigma | A5177-5EA | |
Microelectrode puller | Equipment | Sutter Instruments | Sutter Instruments P-97 Flaming/Brown Micropipette | |
Pasteur Capillary Pipette | Tool | Electron Microscopy Sciences | 70950-12 | round edge under flame |
Culture chamber | Tool | Pioneer Plastics | 030C | |
Microcapillary tube | Tool | Sigma | P1049-1PAK | |
Microdissecting knife | Tool | Fine Science Tools | 10056-12 | Use to puncture cavities prior to in situ hybridization |
Minuten pins 0.2mm diam | Tool | Fine Science Tools | 26002-20 | Mix 1 part Curing Agent, 9 parts Base; set O/N at 37C |
Diethylpyrocarbonate (depc) | Reagent | Electron Microscopy Sciences | 15710 | |
Sylgard 184 Silicon Elastomer Curing Agent and Base | Dow Corning | 0001986475 | Mix 1 part Curing Agent, 9 parts Base; set O/N at 37C | |
Diethylpyrocarbonate (depc) | Acros Organics | 10025025 | Add 1ml depc to 1l PBS; shake; autoclave | |
16% PFA | Electron Microscopy Sciences | 15710 |