Summary

التناضحي في تجنب انواع معينة ايليجانس : وظيفة متشابك من اثنين من الجينات ، Orthologues لحقوق الإنسان NRXN1 و NLGN1 ، كمرشحين للتوحد

Published: December 11, 2009
doi:

Summary

وNeurexins neuroligins هي بروتينات التصاق الأغشية العصبية التي تؤدي أدوارا أساسية في التمايز متشابك والإرسال. المسوخ Neuroligin قصور<em> C. ايليجانس</em> معيبة في الكشف عن قوة ناضح ، ولكن عندما تحتوي أيضا طفرة في الجين الترميز neurexin ، فإنها استعادة النمط الظاهري نوع البرية.

Abstract

وNeurexins neuroligins هي جزيئات التصاق الخلية موجودة في نقاط الاشتباك العصبي مثير والمثبطة ، وكانت مطلوبة لتصحيح أداء الشبكة العصبية 1. وتوجد هذه البروتينات في أغشية قبل المشبكي وبعد المشبكي 2. الدراسات على الفئران تشير إلى أن neurexins وneurologins دورا أساسيا في نقل متشابك 1. وقد أظهرت تقارير حديثة أن الاتصالات العصبية تتغير خلال تطوير النظام العصبي البشري يمكن أن تشكل أساسا لمسببات حالات عديدة من اضطرابات طيف التوحد 3.

ويمكن استخدام انواع معينة ايليجانس كأداة تجريبية لتسهيل الدراسة للعمل العناصر متشابك ، وذلك بسبب بساطتها عن التجارب المختبرية ، ونظرا لأنه تم نظامه العصبي والأسلاك متشابك تتميز بشكل كامل. في سي. ايليجانس nrx – 1 – 1 NLG والجينات هي الجينات لorthologous NRXN1 وNLGN1 الإنسان التي ترميز ألفا neurexin – 1 – 1 neuroligin والبروتينات ، على التوالي. في البشر ، والديدان ، وتنظيم وneurexins neuroligins مشابهة فيما يتعلق المجالات الوظيفية.

رئيس الخيطية تحتوي على amphid ، وهو جهاز الحسية من الديدان الخيطية ، التي تتوسط استجابات لمثيرات مختلفة ، بما في ذلك قوة التناضحي. وأدلى amphid من 12 العصبونات الحسية بين القطبين مع التشعبات مهدبة واحد محوار المحطة قبل المشبكي 4. اثنين من هذه الخلايا العصبية ، ويدعى ASHR ASHL تكتسب أهمية خاصة في وظيفة حسية التناضحي وكشفها للذوبان في الماء مع القوة الطاردة الأوسمي 5. والتشعبات من هذه الخلايا العصبية لإطالة two غيض من الفم ، وتمتد لتشمل محاور الحلقة العصبية ، حيث أنها إجراء اتصالات متشابك مع الخلايا العصبية الأخرى تحديد الاستجابة السلوكية 6.

لتقييم الآثار المترتبة على neurexin وneuroligin في تجنب ارتفاع قوة التناضحي ، نظهر استجابة مختلفة من المسوخ ايليجانس جيم معيبة في nrx – 1 – 1 NLG والجينات ، وذلك باستخدام أسلوب يستند على حلقة الفركتوز 4M 7. وأكد الظواهر السلوكية المحددة باستخدام الحيوانات المستنسخة رني 8. في C. ايليجانس ، يمكن أن تدار الرنا المزدوج الجديلة المطلوبة لتحريك رني عن طريق تغذية 9. تسليم الرنا المزدوج الجديلة عن طريق الغذاء الحث على التدخل رني من الجينات في المصالح مما يتيح تحديد المكونات الجينية ومسارات الشبكة.

Protocol

1 : تنافذي مقايسة الإبطال. حوالي 16-24 ساعة قبل الفحص ، واختيار الحيوانات L4 مرحلة اليرقات من النمط الجيني لكل لوحة NGM الطازجة التي تحتوي على OP50 E. القولونية andincubate إليها في 20 درجة مئوية. وفي اليوم التالي تبدأ التجربة مع…

Discussion

وNeurexins neuroligins أداء أدوار أساسية في انتقال متشابك 11 و تمايز اتصالات متشابك 12. وقد تم تحديد كل من الجزيئات والجينات المرشحة لمرض التوحد 13،14.

في هذا الفيديو نظهر طريقة بسيطة التي تسمح لنا لدراسة تأثير الجينات التي ت?…

Acknowledgements

نود أن يشكر الدكتور أنطونيو ميراندا – Vizuete على مساعدته القيمة. نود أيضا أن نعرب عن امتناننا لBoulayoune سلمى وكاباليرو إيزابيل للحصول على مساعدة تقنية قيمة. وقد تم تمويل هذا العمل من خلال منحة من المجلس العسكري دي الأندلس (BIO – 272). وقد تم تنفيذ هذا البحث في اتفاق مع القوانين الحالية التي تنظم التجارب الجينية في أوروبا.

Materials

Table 1. C. elegans strains.

Strain Gene Allele Source
Bristol N2 aCGC
VC228 nlg-1 ok259 CGC
FX00474 nlg-1 tm474 bNBP-JAPAN
VC1416 nrx-1 ok1649 CGC
FX1961 nrx-1 tm1961 NBP-JAPAN
NL2099 rrf-3 pk1436 CGC
CRR21 nrx-1; nlg-1 ok1649; ok259 This work
CRR22 nrx-1; nlg-1 tm1961;ok259 This work

a. Caenorhabditis Genetic Center, University of Minnesota, USA.

b. National Bioresource Project for the Experimental Animal “Nematode C. elegans“. Tokyo Women’s Medical University, Japan.

References

  1. Sudhof, T. C. . Nature. 455 (7215), 903-903 (2008).
  2. Fabrichny, I. P., Leone, P., Sulzenbacher, G. . Neuron. 56 (6), 979-979 (2007).
  3. Garber, K. . Science. 317 (5835), 190-190 (2007).
  4. Wang, K., Zhang, H., Ma, D. . Nature. 459 (7246), 528-528 (2009).
  5. Ward, S., Thomson, N., White, J. G. . The Journal of comparative neurology. 160 (3), 313-313 (1975).
  6. Bargmann, C. I., Thomas, J. H., Horvitz, H. R. Cold Spring Harbor symposia on quantitative biology. 55, 529-529 (1990).
  7. White, J. G., Southgate, E., Thomsom, J. N., Brenner, S. . Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 314, 1-1 (1986).
  8. Culotti, J. G., Russell, R. L. . Genetics. 90 (2), 243-243 (1978).
  9. Fire, A., Xu, S., Montgomery, M. K. . Nature. 391 (6669), 806-806 (1998).
  10. Timmons, L., Fire, A. . Nature. 395 (6705), 854-854 (1998).
  11. Simmer, F., Tijsterman, M., Parrish, S., Koushika, S. P., Nonet, M. L., Fire, A., Ahringer, J., Plasterk, R. H. . Curr Biol. 12, 1317-1317 (2002).
  12. Missler, M., Zhang, W., Rohlmann, A. . Nature. 423 (6943), 939-939 (2003).
  13. Varoqueaux, F., Aramuni, G., Rawson, R. L. . Neuron. 51 (6), 741-741 (2006).
  14. Graf, E. R., Zhang, X., Jin, S. X., Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. . Cell. 119 (7), 1013-1013 (2004).
  15. Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J. . Cell. 101 (6), 657-657 (2000).
  16. Jamain, S., Quach, H., Betancur, C. . Nature genetics. 34 (1), 27-27 (2003).
  17. Szatmari, P., Paterson, A. D., Zwaigenbaum , L. . Nature genetics. 39 (3), 319-319 (2007).

Play Video

Cite This Article
Calahorro, F., Alejandre, E., Ruiz-Rubio, M. Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism. J. Vis. Exp. (34), e1616, doi:10.3791/1616 (2009).

View Video