הזרקת ארנב תוך-ורידי: מסירה מקומית של פתרון עניין לתוך בלוטת החלב ארנב

Overview

בסרטון זה אנו מתארים טכניקה של מתן פתרון עניין לתוך צינור mammary של ארנב ולאשר את המסירה על ידי הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה של סוכני ניגוד.

Protocol

1. הכנה טרום ניתוחית

1. רשום את משקל הגוף של כל ארנב. כמו עם כל המחקרים הפרה-קוליניים, לפקח על משקולות בעלי חיים באופן קבוע כדי להעריך רעילות פוטנציאלית.
2. לפני הרדמת הארנב, למלא צינור חרוט 50 מ"ל עם ג'ל אולטרסאונד זמין מסחרית להסתובב ב 500 x g עבור 30 s; לא אמורות להיות בועות נראות לעין בג'ל עם השלמת הצנטריפוגה.
3. לנהל glycopyrrolate תת עורית במינון של 0.1 מ"ג/ק"ג ו acepromazine תוך שרירית במינון של 0.75 מ"ג/ק"ג. המתן 15-20 דקות עד שסם ההרגעה ייכנס לתוקף תוך ניטור סימנים והתנהגות חיוניים.
   שים לב: Glycopyrrolate הוא סוכן אנטי שימוש המונע ברדיקרדיה ומפחית הפרשות נשימה ו- GI. Acepromazine הוא סם הרגעה המשמש תרופה קדם רפואית להרדמה.
4. יש לתת 35 מ"ג/ק"ג קטמין ו-5 מ"ג/ק"ג של קסילאזין תת עורית כהרדמה. עם זאת, כמו המפעיל הופך להיות מנוסה יותר והוא יכול להשיג את המסירה התוך גופית מהר יותר, להקטין את המינונים התרופה ל 15 מ"ג/ק"ג של קטמין ו 3 מ"ג/ק"ג של xylazine תת עורית; זה יקצר את זמן ההרדמה ואת הזמן הנדרש עבור החיה להתאושש מהרדמה.
5. בדוק ותיעד את הדופק, SPO_2, טמפרטורה, קצב נשימה, צבע קרום ריר כל 15 דקות. יש למרוח חומר סיכה לעיניים על שתי העיניים.
   שים לב: רק אנשי צוות שעברו הכשרה מתאימה ואושרו על ידי IACUC של המוסד שלהם צריכים לנהל או לפקח על הרדמה. השימוש במוניטור הרדמה וטרינרית יכול לסייע בהשגת סימנים חיוניים ומומלץ. עם זאת, צג ההרדמה הווטרינרית אינו מחליף את הצורך לבדוק את החיה באופן ידני כל 15 דקות. עיין בהוראות היצרן לשימוש נכון בצג וטרינרי.
6. לאמת את הופעת ההרדמה על ידי קמצוץ בוהן עדין; הארנב צריך להיות לא מגיב לפני שתמשיך.
7. לגלח בזהירות את הבטן caudal של הארנב באזור סביב הזוג השלישי והרביעי של פטמות מפשעתיות.
8. כאשר רוב השיער מוסר, יש למרוח קרם להסרת שיער ללא מרשם על האזור המגולח. הסר את השמנת 10 דקות לאחר היישום באמצעות מגבות נייר לחות רטובות במים חמים.
   שים לב: עור הארנב שברירי מאוד/רגיש. קרם הסרת שיער יש להשתמש במשך לא יותר מ 10 דקות. למעשה, בטוח יותר לנסות "נקודת בדיקה" ב 5 דקות ולהשאיר רק על זמן רב יותר אם נקודת הבדיקה מצביעה על פרק זמן ארוך יותר יש צורך.
9. נגב את האזור עם רפידות גזה ספוגות אלכוהול כדי לנקות את אתר ההזרקה.
10. מניחים את הארנב על דורסום שלו בשוקת בצורת V מרופדת בשמיכת מים חמים מפנקת ופנקס סופג.

2. הכנת סוכן הניגודיות

1. לשקם את מגיב ניגודיות לא ממוקד על פי הוראות היצרן. פיפטה למעלה ולמטה בעדינות לערבב.
   שים לב: סוכן הניגודיות המשמש בפרוטוקול זה יציב בטמפרטורת החדר למשך 4 - 6 שעות לאחר השבתו. בעדינות לנענע את הבקבוקון בין כל אחזור.
   הערה: נפח הפתרון הנדרש יהיה תלוי במספר התעלות שיוזרקו. הארנב יש 4 פתחי צינור לכל פטמה, ו 0.2 מ"ל של פתרון מספיק כדי למלא עץ צינור אחד של ארנב לבן ניו זילנדי בוגר(Oryctolaguscuniculus). לכן, נפח כולל של 0.8 מ"ל עשוי להיות מועבר בלוטת החלב אחת.

3. מסירה תוך-ורידית

1. אתר את הפטמות המתאימות להזרקה; מומלץ לזוגות^{3 ו-4} של פטמות מפשעתיות, שכן הן מוצגות בקלות כאשר החיה ממוקמת על הגב שלה.
2. טען 0.2 מ"ל של מלוחים סטריליים 0.9% למזרק פקעת 1 מ"ל לואר-לוק עם מחט 22 G. כראוי להיפטר מחט 22 G פעם מלוחים הוא במזרק ולהחליף אותו עם מחט סטרילית 25-מד. יש לנגב בעדינות את האזור עם 85% אלכוהול איזופרופיל על כרית גזה.
3. עם השיפוע של המחט למעלה ואת המזרק המקביל לגוף החיה, להכניס את השיפוע של המחט לתוך הצד של הפטמה לאט להזריק 0.1-0.2 מ"ל של מלוחים; זה יאפשר הדמיה טובה יותר של פתחי צינור.
4. טען 0.2 מ"ל של פתרון הזרקה לתוך מזרק 1 מ"ל לואר-לוק tuberculin.
5. החזק את הפטמה בעדינות עם האגודל והאצבע המורה והרם אותו מעט כדי למקם אותו להזרקה תוך-ורידית; זכוכית מגדלת עינית לבישה עשויה לסייע בהדמיית פתחי הצינורות.
6. תוך שמירה על המיקום הרים של הפטמה, בזהירות cannulate צינור העניין באמצעות מחט 25 G קהה קצה.
7. לאחר הקינול, סובבו בעדינות את מזרק המנעול לואר על רכזת מחט העירוי הקהה עד שהוא נעול במקום.
8. להרים את הפטמה ולהזריק את הפתרון לאט כדי למזער את הנזק הפוטנציאלי שנגרם על ידי נוזל נע במהירות בתוך הצינור; בשום שלב לא צריכה להיות התנגדות בעת הזרקת הפתרון.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MicroMarker non-targeted contrast reagent	VisualSonics	VS-11694
Luer Lock 1 mL Syringes	BD	309628
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL	Wedgewood Compounding Pharmacy	GLYCOP-INJ013VC	6 month shelf life, supply may be limited.
Ketamine HCL 100 mg/mL	Animal Health International	21250699	http:// www.animalhealthinternational.com/
Acepromazine 10 mg/mL	Animal Health International	17640541
Xylazine 20 mg/mL	Animal Health International	20101547
Hair Removing Cream	Veet		Sensitive skin solution. Available through local retailers.
Blunt tip infusion needles	Sai Infusion Technology	B14-50	http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles
Veterinary Pulse Oximeter	EdanUSA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
Warm Water Pump	Gaymar	TP700
Warm Water Blanket	Animal Health International	21232696	Maxi-Therm Lite Warming Pads