Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Encyclopedia of Experiments

Кролик интрадуктивной инъекции: Локализованная доставка решения, представляющих интерес в Кролик Молочная Гланд

Overview

В этом видео мы описываем технику администрирования решения, представляющих интерес в молочный проток кролика и подтверждаем доставку с помощью ультразвуковой визуализации контрастных агентов с высоким разрешением.

Protocol

1. Предоперационная подготовка

  1. Запись веса тела каждого кролика. Как и во всех доклинических исследованиях, регулярно следите за весом животных, чтобы оценить потенциальную токсичность.
  2. Перед обезболить кролика заполните коническую трубку 50 мл коммерчески доступным ультразвуковым гелем и вращайся при 500 х г на 30 с; не должно быть видимых пузырьков в геле после завершения центрифугации.
  3. Администрирование гликотиролата подкожно в дозе 0,1 мг/кг и ацепромазина внутримышечно в дозе 0,75 мг/кг. Подождите 15-20 минут для седативного вступят в силу при мониторинге жизненно важных признаков и поведения.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Гликопиронат является антихолинергическим агентом, который предотвращает брадикардию и уменьшает выделения дыхательных путей и GI. Ацепромазин является седативным средством, которое служит в качестве предмедицинского для анестезии.
  4. Администрирование 35 мг/кг кетамина и 5 мг/кг ксилазина подкожно в качестве анестезии. Однако, как оператор становится более опытным и может выполнить интрадуктивной доставки быстрее, уменьшить дозировки препарата до 15 мг/кг кетамина и 3 мг/кг ксилазина подкожно; это сократит время анестезии и время, необходимое для восстановления животного после анестезии.
  5. Проверьте и документировать частоту сердечных сокращений, SPO2, температуру, частоту дыхания и цвет слизистой оболочки каждые 15 минут. Нанесите смазку для глаз на оба глаза.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Только персонал, прошедший соответствующую подготовку и утвержденный МАКУК своего учреждения, должен проводить или контролировать анестезию. Использование ветеринарной анестезии монитор может помочь в приобретении жизненно важных признаков и рекомендуется. Ветеринарный монитор анестезии, однако, не заменяет необходимость вручную проверять животное каждые 15 минут. Можно посмотреть инструкции производителя по правильному использованию ветеринарного монитора.
  6. Проверить начало анестезии нежным носом щепотку; кролик должен быть неотвеявной, прежде чем продолжить.
  7. Тщательно побрить хвостовой живот кролика в области вокруг третьей и четвертой пар паховой соты.
  8. С большинством волос удалены, применять без рецепта крем для удаления волос в бритой области. Удалите крем через 10 минут после нанесения с помощью влажных бумажных полотенец, смочеченных теплой водой.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Кожа кролика очень хрупкая/чувствительная. Крем для удаления волос следует использовать не более 10 минут. В самом деле, безопаснее попробовать "тест месте" на 5 минут и только оставить на дольше, если тест-пятно указывает на более длительный период времени не требуется.
  9. Протрите область спиртом пропитанной марлей колодки для очистки места инъекции.
  10. Поместите кролика на спину в v-образном корыте, облицованном циркулирующим теплым водным одеялом и абсорбирующей прокладкой.

2. Подготовка контрастного агента

  1. Восстановить ненаправленный контрастный реагент в соответствии с инструкциями производителя. Pipette вверх и вниз осторожно перемешать.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используемый в этом протоколе контрастный агент стабилен при комнатной температуре 4 - 6 ч после восстановления. Аккуратно раскачивайте флакон между каждым извлечением.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Объем необходимого решения будет зависеть от количества воздуховодов, которые будут введены. Кролик имеет 4 проток отверстия на соску, и 0,2 мл раствора достаточно, чтобы заполнить один протоковое дерево взрослого новозеландского белого кролика (Oryctolaguscuniculus). Таким образом, общий объем 0,8 мл может быть доставлен в одну молочную железу.

3. Интрадуктивная доставка

  1. Найдите соответствующие соты для введения; рекомендуется 3-яи 4-я пары паховых соток, так как они легко визуализируются, когда животное расположено на спину.
  2. Загрузите 0,2 мл стерильного 0,9% солевого раствора в 1 мл шприца-трубоубезволенного с иглой 22 Г. Правильно распоряжаться 22 G иглы, как только солевой раствор находится в шприце и заменить его стерильной иглой 25-го калибра. Аккуратно протрите область 85% изопропиловым спиртом на марлевой площадке.
  3. С помощью скошенной иглы вверх и шприца параллельно телу животного вставьте скошенную иглу в сторону соты и медленно ввилите 0,1-0,2 мл солевого раствора; это позволит лучше визуализировать протоковые отверстия.
  4. Загрузите 0,2 мл инъекционного раствора в 1 мл шприца для трубки Luer-lock.
  5. Держите соку осторожно большим и указательным пальцами и слегка поднимите ее, чтобы распоят ее для внутридукционной инъекции; носимых глазной лупы может помочь в визуализации проток отверстия.
  6. При сохранении поднял положение соты, тщательно cannulate проток интереса с помощью 25 G тупой кончик иглы.
  7. После канкуляции, осторожно крутить Luer-замок шприц на концентраторе тупой кончик инфузионные иглы, пока он не заблокирован на месте.
  8. Поднимите соку и вводите раствор медленно, чтобы свести к минимуму потенциальный ущерб, причиненный быстро перемещающейся жидкостью в протоке; ни разу не должно быть сопротивления при введении раствора.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
MicroMarker non-targeted contrast reagent   VisualSonics VS-11694
Luer Lock 1 mL Syringes   BD 309628
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL    Wedgewood Compounding Pharmacy GLYCOP-INJ013VC 6 month shelf life, supply may be limited.
Ketamine HCL 100 mg/mL    Animal Health International 21250699 http:// www.animalhealthinternational.com/
Acepromazine 10 mg/mL  Animal Health International 17640541
Xylazine 20 mg/mL   Animal Health International 20101547
Hair Removing Cream   Veet Sensitive skin solution. Available through local retailers.
Blunt tip infusion needles    Sai Infusion Technology B14-50 http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles
Veterinary Pulse Oximeter   EdanUSA VE-H100B  http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
Warm Water Pump  Gaymar  TP700
Warm Water Blanket    Animal Health International 21232696 Maxi-Therm Lite Warming Pads

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Tags

Пустое значение выпуск
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter