Overview
В этом видео мы описываем технику администрирования решения, представляющих интерес в молочный проток кролика и подтверждаем доставку с помощью ультразвуковой визуализации контрастных агентов с высоким разрешением.
Protocol
1. Предоперационная подготовка
- Запись веса тела каждого кролика. Как и во всех доклинических исследованиях, регулярно следите за весом животных, чтобы оценить потенциальную токсичность.
- Перед обезболить кролика заполните коническую трубку 50 мл коммерчески доступным ультразвуковым гелем и вращайся при 500 х г на 30 с; не должно быть видимых пузырьков в геле после завершения центрифугации.
- Администрирование гликотиролата подкожно в дозе 0,1 мг/кг и ацепромазина внутримышечно в дозе 0,75 мг/кг. Подождите 15-20 минут для седативного вступят в силу при мониторинге жизненно важных признаков и поведения.
ПРИМЕЧАНИЕ: Гликопиронат является антихолинергическим агентом, который предотвращает брадикардию и уменьшает выделения дыхательных путей и GI. Ацепромазин является седативным средством, которое служит в качестве предмедицинского для анестезии. - Администрирование 35 мг/кг кетамина и 5 мг/кг ксилазина подкожно в качестве анестезии. Однако, как оператор становится более опытным и может выполнить интрадуктивной доставки быстрее, уменьшить дозировки препарата до 15 мг/кг кетамина и 3 мг/кг ксилазина подкожно; это сократит время анестезии и время, необходимое для восстановления животного после анестезии.
- Проверьте и документировать частоту сердечных сокращений, SPO2, температуру, частоту дыхания и цвет слизистой оболочки каждые 15 минут. Нанесите смазку для глаз на оба глаза.
ПРИМЕЧАНИЕ: Только персонал, прошедший соответствующую подготовку и утвержденный МАКУК своего учреждения, должен проводить или контролировать анестезию. Использование ветеринарной анестезии монитор может помочь в приобретении жизненно важных признаков и рекомендуется. Ветеринарный монитор анестезии, однако, не заменяет необходимость вручную проверять животное каждые 15 минут. Можно посмотреть инструкции производителя по правильному использованию ветеринарного монитора. - Проверить начало анестезии нежным носом щепотку; кролик должен быть неотвеявной, прежде чем продолжить.
- Тщательно побрить хвостовой живот кролика в области вокруг третьей и четвертой пар паховой соты.
- С большинством волос удалены, применять без рецепта крем для удаления волос в бритой области. Удалите крем через 10 минут после нанесения с помощью влажных бумажных полотенец, смочеченных теплой водой.
ПРИМЕЧАНИЕ: Кожа кролика очень хрупкая/чувствительная. Крем для удаления волос следует использовать не более 10 минут. В самом деле, безопаснее попробовать "тест месте" на 5 минут и только оставить на дольше, если тест-пятно указывает на более длительный период времени не требуется. - Протрите область спиртом пропитанной марлей колодки для очистки места инъекции.
- Поместите кролика на спину в v-образном корыте, облицованном циркулирующим теплым водным одеялом и абсорбирующей прокладкой.
2. Подготовка контрастного агента
- Восстановить ненаправленный контрастный реагент в соответствии с инструкциями производителя. Pipette вверх и вниз осторожно перемешать.
ПРИМЕЧАНИЕ: Используемый в этом протоколе контрастный агент стабилен при комнатной температуре 4 - 6 ч после восстановления. Аккуратно раскачивайте флакон между каждым извлечением.
ПРИМЕЧАНИЕ: Объем необходимого решения будет зависеть от количества воздуховодов, которые будут введены. Кролик имеет 4 проток отверстия на соску, и 0,2 мл раствора достаточно, чтобы заполнить один протоковое дерево взрослого новозеландского белого кролика (Oryctolaguscuniculus). Таким образом, общий объем 0,8 мл может быть доставлен в одну молочную железу.
3. Интрадуктивная доставка
- Найдите соответствующие соты для введения; рекомендуется 3-яи 4-я пары паховых соток, так как они легко визуализируются, когда животное расположено на спину.
- Загрузите 0,2 мл стерильного 0,9% солевого раствора в 1 мл шприца-трубоубезволенного с иглой 22 Г. Правильно распоряжаться 22 G иглы, как только солевой раствор находится в шприце и заменить его стерильной иглой 25-го калибра. Аккуратно протрите область 85% изопропиловым спиртом на марлевой площадке.
- С помощью скошенной иглы вверх и шприца параллельно телу животного вставьте скошенную иглу в сторону соты и медленно ввилите 0,1-0,2 мл солевого раствора; это позволит лучше визуализировать протоковые отверстия.
- Загрузите 0,2 мл инъекционного раствора в 1 мл шприца для трубки Luer-lock.
- Держите соку осторожно большим и указательным пальцами и слегка поднимите ее, чтобы распоят ее для внутридукционной инъекции; носимых глазной лупы может помочь в визуализации проток отверстия.
- При сохранении поднял положение соты, тщательно cannulate проток интереса с помощью 25 G тупой кончик иглы.
- После канкуляции, осторожно крутить Luer-замок шприц на концентраторе тупой кончик инфузионные иглы, пока он не заблокирован на месте.
- Поднимите соку и вводите раствор медленно, чтобы свести к минимуму потенциальный ущерб, причиненный быстро перемещающейся жидкостью в протоке; ни разу не должно быть сопротивления при введении раствора.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
Luer Lock 1 mL Syringes | BD | 309628 | |
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
Ketamine HCL 100 mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http:// www.animalhealthinternational.com/ |
Acepromazine 10 mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
Xylazine 20 mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles |
Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html |
Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |