Kanin intraductal injektion: Lokaliseret levering af løsning af interesse i kaninen Mammary Gland

Overview

I denne video beskriver vi en teknik til at administrere en løsning af interesse i brystkanalen af en kanin og bekræfte leveringen af ultralydsscanning af kontraststoffer med høj opløsning.

Protocol

1. Præoperativ forberedelse

1. Optag kropsvægten af hver kanin. Som med alle prækliniske undersøgelser skal du regelmæssigt overvåge dyrets vægt for at vurdere potentiel toksicitet.
2. Før bedøvelse af kaninen fyldes et 50 mL konisk rør med kommercielt tilgængelig ultralydgel og spin ved 500 x g i 30 s; der bør ikke være synlige bobler i gelen, når centrifugeringen er afsluttet.
3. Glycopyrrolat gives subkutivt ved en dosis på 0,1 mg/kg og acepromazin intramuskulært ved en dosis på 0,75 mg/kg. Vent 15-20 minutter for beroligende at træde i kraft, mens overvågning vitale tegn og adfærd.
   BEMÆRK: Glycopyrrolate er et anti-cholinrgisk middel, der forhindrer bradykardi og reducerer åndedræts- og GI-sekreter. Acepromazine er et beroligende middel, der tjener som en præmedicinering for anæstesi.
4. Der gives 35 mg ketamin og 5 mg xylazin subkutan som bedøvelsesmiddel. Men efterhånden som operatøren bliver mere erfaren og kan udføre intraductal levering hurtigere, skal du reducere lægemiddeldoserne til 15 mg/kg ketamin og 3 mg/kg xylazin subkutan; dette vil forkorte anæstesitiden og den tid, det tager for dyret at komme sig efter anæstesi.
5. Kontroller og dokumenter pulsen, SPO_2, temperatur, åndedrætsfrekvens og slimhindefarve hvert 15. minut. Påfør øjensmøremiddel på begge øjne.
   BEMÆRK: Kun personale, der har gennemgået en passende uddannelse og er blevet godkendt af deres institutions IACUC, bør administrere eller overvåge anæstesi. Brugen af en veterinær anæstesimonitor kan hjælpe med at erhverve vitale tegn og anbefales. Veterinærbedøvelsesmonitoren erstatter dog ikke behovet for manuelt at kontrollere dyret hvert 15. minut. Se producentens anvisninger for korrekt brug af en veterinærmonitor.
6. Kontroller anæstesiens indsætning ved hjælp af en blid tåkleb klemme. kaninen skal være ikke-lydhør, før du fortsætter.
7. Barber forsigtigt kaninens kaudale underliv i området omkring det tredje og fjerde par inguinal patter.
8. Med størstedelen af håret fjernet, anvende en over-the-counter hårfjerning creme til barberet område. Fjern cremen 10 minutter efter påføring ved hjælp af fugtige papirhåndklæder fugtet med varmt vand.
   BEMÆRK: Kaninhud er meget skrøbelig/følsom. Hårfjerningscremen bør ikke bruges i mere end 10 minutter. Faktisk er det sikrere at prøve en "testplads" på 5 min og kun forlade længere, hvis test stedet angiver en længere periode er nødvendig.
9. Tør området af med alkohol-gennemblødt gaze puder til at rense injektionsstedet.
10. Placer kaninen på sit dorsum i et v-formet trug foret med et recirkulerende varmt vandtæppe og en absorberende pude.

2. Forberedelse af kontrastagenten

1. Rekonstruer det ikke-målrettede kontrastreagens i henhold til producentens anvisninger. Pipette op og ned forsigtigt at blande.
   BEMÆRK: Kontrastmidlet, der anvendes i denne protokol, er stabilt ved stuetemperatur i 4 - 6 timer efter rekonstituering. Vip forsigtigt hætteglasset mellem hver hentning.
   BEMÆRK: Den krævede opløsningsvolumen afhænger af antallet af kanaler, der skal injiceres. Kaninen har 4 kanalåbninger pr. Patte, og 0,2 ml opløsning er tilstrækkelig til at fylde et kanaltræ af en voksen newzealandsk hvid kanin (Oryctolaguscuniculus). Således kan et samlet volumen på 0,8 mL leveres til en brystkirtel.

3. Intraductal levering

1. Find de relevante patter, der skal injiceres; de 3^rd og^{4 th} par inguinal patter anbefales, da de let visualiseres, når dyret er placeret på sit dorsum.
2. Lad 0,2 mL steril 0,9% saltvand i en 1 mL Luer-lock tuberkulin sprøjte med en 22 G nål. Den 22 G-nål skal bortskaffes korrekt, når saltvandet er i sprøjten, og den udskiftes med en steril 25-gauge nål. Tør forsigtigt området af med 85% isopropylalkohol på en gazepude.
3. Med nålens facet op og sprøjten parallelt med dyrets krop skal du indsætte nålens facet i siden af patten og langsomt injicere 0,1-0,2 mL saltvand; dette vil give mulighed for bedre visualisering af kanalåbningerne.
4. 0,2 ml injektionsopløsning hældes i en 1 ml Luer-lock tuberkulin sprøjte.
5. Hold patten forsigtigt med tommelfingeren og pegefingeren og løft den lidt for at placere den til intraductal injektion; en bærbar okulær lup kan hjælpe med at visualisere kanalåbningerne.
6. Samtidig med at den løftede position af patte, forsigtigt kannulere kanalen af interesse ved hjælp af en 25 G stump-tip nål.
7. Efter kannulation drejes luer-låsesprøjten forsigtigt på navet på infusionsnålen med stump spids, indtil den er låst på plads.
8. Løft patten og injicere opløsningen langsomt for at minimere potentielle skader forårsaget af hurtigt bevægende væske i kanalen; på intet tidspunkt bør der være modstand ved injektion af opløsningen.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MicroMarker non-targeted contrast reagent	VisualSonics	VS-11694
Luer Lock 1 mL Syringes	BD	309628
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL	Wedgewood Compounding Pharmacy	GLYCOP-INJ013VC	6 month shelf life, supply may be limited.
Ketamine HCL 100 mg/mL	Animal Health International	21250699	http:// www.animalhealthinternational.com/
Acepromazine 10 mg/mL	Animal Health International	17640541
Xylazine 20 mg/mL	Animal Health International	20101547
Hair Removing Cream	Veet		Sensitive skin solution. Available through local retailers.
Blunt tip infusion needles	Sai Infusion Technology	B14-50	http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles
Veterinary Pulse Oximeter	EdanUSA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
Warm Water Pump	Gaymar	TP700
Warm Water Blanket	Animal Health International	21232696	Maxi-Therm Lite Warming Pads