ويقدم طريقة جديدة لمراقبة تنوعا من دوران الأوعية الدقيقة. فهو يعتبر مناسبة للمراقبة على المدى الطويل ، وعلى تركيبة مع التدخلات البيولوجية pharmacophysiological أو الجزيئي.
Abstract
معلومات أساسية : العوامل التنظيمية والفيزيولوجيا مفصل في الجسم الحي دوران الأوعية الدقيقة ظلت لم تتضح تماما بعد طرائق عديدة ومختلفة من التصوير قد اخترعت. في حين أن العديد من المعلمات العيانية تدفق الدم تعكس سرعة تدفق ، والتغيرات في سرعة تدفق الدم وخلايا الدم الحمراء (RBC) متقلب لا تعقد العلاقة الخطية في هذه الملاحظات المجهرية. هناك تقارير عن التفاوت بين سرعة وتدفق RBC RBC ، RBC تدفق البلازما وحجم التدفق والتنوع المكاني والزماني للتنظيم التدفق في الأنسجة الطرفية في الملاحظات المجهرية ، والأساس العلمي لشرط دراسات أكثر تفصيلا في مجال تنظيم استخدام microcirculatory intravital المجهري.
الطريقة : نحن تعديل طريقة جيف يختمن من الملاحظة المجهرية في الجسم الحي للعضلات القصية الخشائية الماوس. الفئران هي تخدير التهوية ، وحقنوا PKH26L fluorescently كرات الدم الحمراء ، المسمى لمراقبة مجهرية.
نتائج واستنتاجات : تم الكشف عن كرات الدم الحمراء وfluorescently المسمى حاليا بشكل جيد من قبل المجهر واسعة المجال. تقلص العضلات التي حركها زيادة التحفيز الكهربائي يتسبب في تدفق RBC. والكمي للمعلمات أخرى بما في ذلك السرعة والكثافة الشعرية RBC ممكنا. التسامح مع الفئران جيدا لعملية جراحية ، وحقن من كرات الدم الحمراء الملطخة ، والمراقبة المجهرية ، والتحفيز الكهربائي. لم يلاحظ أي ضرر العضلات أو الدم السفينة ، مما يوحي بأن لدينا وسيلة نسبيا أقل الغازية وملاءمة لفترة طويلة الأجل الملاحظات.
Protocol
RBC غشاء تلوين تم تصحيح خلايا الدم الحمراء الماوس من سلالة الفأر نفسه مع heparinization. وكانت ملطخة الماوس RBC مع PKH26 صبغ (551/567 نانومتر ؛ الأحمر رابط الخلية الفلورسنت عدة ، سيغما ، الولايات المتحدة). </li…
Discussion
نقاط هامة techinical هي كما يلي : (1) الحفاظ على الوضع الفسيولوجي للحيوان (التهوية ، ودرجة الحموضة ودرجة الحرارة حل perfusative الجسم ،) ، (2) حجم حقن RBC الملون ، والظروف (3) لمراقبة (عدسة الأمثل الاختيار ، وكثافة مضان). التطبيقات المحتملة في المستقبل هي على النحو التالي : (أ) بالاشتراك مع التدخلا?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر ليختمن JW نصيحته في المراقبة المجراة في العضلات.
Asai, A., Sahani, N., Ouchi, Y., Martyn, J., Yasuhara, S. In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy. J. Vis. Exp. (4), e210, doi:10.3791/210 (2007).